Toksiinid (kreeka keelest toxikon - mürk), bakteriaalse päritoluga ained, mis võivad pärssida füsioloogilised funktsioonid, mis põhjustab loomade ja inimeste haigestumist või surma. Kõrval keemiline olemus kõik toksiinid on valgud või polüpeptiidid. See erineb teistest orgaanilistest ja anorgaanilistest ainetest mürgised ained Kui toksiinid sisenevad kehasse, põhjustavad nad antikehade moodustumist.
Mõnede nakkushaiguste (difteeria, sarlakid) puhul kasutatakse immuunsüsteemi tugevuse ja laste vastuvõtlikkuse määramiseks nahasiseseid teste, milles kasutatakse sobivaid lahjendatud toksiine. Positiivne reaktsioon(lokaalne nahapõletik toksiini manustamispiirkonnas) on põhjustatud toksiini mürgisest toimest nahakoele. Reaktsiooni negatiivset tulemust seletatakse naha sisse viidud toksiini neutraliseerimisega vastava immuunkehas sisalduva antitoksiiniga selleks piisavas koguses.
Toksiinid saadakse toksikogeensetest mikroobitüvedest (difteeria batsill või sarlakid streptokokk) nakatamise teel vedelale toitekeskkonnale (avatud koldepuljong), millele järgneb filtreerimine läbi bakterifiltrite. Saadud toksiinidest valmistatakse diagnostilised toksiinid Schick (difteeria) ja Dika (sarlakid). Toksiinid manustatakse nahasiseselt, 0,2 ml (Shika) ja 0,1 ml (Dika) keskossa. sisepind küünarvarred.
Anatoksiinid on toksogeensete mikroorganismide puljongikultuuride filtraadid, mis on eritöötluse tõttu kaotanud mürgisuse, kuid on säilitanud olulisel määral algsete toksiinide antigeensed ja immunogeensed omadused.
Inimese või looma kehasse sattudes põhjustavad toksoidid antitoksilise immuunsuse teket, see omadus võimaldab neid kasutada nende nakkushaiguste ennetamiseks, mis põhinevad patogeenide poolt eritatavate eksotoksiinide toimel, samuti loomade hüperimmuniseerimiseks. mis toodavad antitoksilisi seerumeid.
Olenemata toksoidi tüübist määravad selle immunogeensuse ja antigeensuse algse toksiini vastavad omadused. Seetõttu pööravad neid ravimeid tootvad laborid suurt tähelepanu toksiinide moodustumise optimaalsete tingimuste loomisele.
Toksiinide saamiseks suur tugevus vaja on tüvesid, millel on eriti väljendunud toksiinide moodustamise võime tehistingimustes. Kõigil toksogeensete bakterite tüvedel ei ole neid omadusi. Tootmise eesmärgil kasutatakse tüvesid, mis on kohandatud tehiskeskkonnaga ja säilitavad püsivalt toksiinide moodustamise võime.
Toksiini moodustavate ainete kultuure säilitatakse kas kuivatatud olekus või teatud tüüpi bakterite jaoks optimaalsel söötmel. Enne kasutamist massipartiide külvamiseks külvatakse tüved toksiini saamiseks kasutatud söötmele.
Kui kõik muud asjad on võrdsed, määrab toksiinide tugevuse kvaliteet toitainekeskkond Seetõttu pööravad laborid tähelepanu söötme ettevalmistamisele. Tooraine, kemikaalid ja muud keskkonda sattunud koostisosad on tootmisinstituutide biokeemilistes laborites kõige hoolikama kontrolli all.
Toksiinide moodustamiseks kasutatakse vedelat toitainekeskkonda, mille hulka kuuluvad lihavesi ja liha peptiline (Martini puljong, Ramoni sööde) või trüptiline (paavsti sööde) seedimise saadused.
Liha hüdrolüüsi protsessi juhitakse amiini üldlämmastiku ja valgu lagunemiskoefitsiendi määramisega, mis arvutatakse amiinlämmastiku ja üldlämmastiku suhtest. Kasutatakse ka lihavaba kaseiini, poolsünteetilist söödet.
Toksiinide moodustamiseks mõeldud toitekeskkonnale lisatakse süsivesikuid (glükoos, maltoos või nende segu). Käärimisel eralduvad süsivesikud suur hulk arenevas kultuuris toimuvate sünteesiprotsesside jaoks vajalik energia. Süsivesikute lisamine suurendab dramaatiliselt keskkonnas tekkivate toksiinide tugevust.
Lisaks süsivesikutele on toksiinide moodustumiseks vaja minimaalsetes annustes mõningaid metalle. Difteeriabatsilli toksiinide teket pärsib nii raua liig keskkonnas kui ka selle puudumine. Kui see on keskkonnas saadaval optimaalsed kogused rauatoksiinide moodustumine suureneb järsult.
Toksiini moodustumine toimub täielikult keskkonna teatud pH-taseme juures. Samal ajal muutub kultuuri kasvamise ajal pH väärtus ja võib jõuda väärtusteni, mis pärsivad toksiini moodustumist.
Selle kõrvaldamiseks lisatakse soovitud pH väärtuse säilitamiseks puhveraineid. Üks neist puhveromadustega ainetest on naatriumatsetaat, mida lisatakse puljongile koguses 0,5-0,75%.
Sõltuvalt toksiine tootva mikroobi bioloogilistest omadustest kasutatakse erinevaid kasvutingimusi ja eelkõige reguleeritakse keskkonna õhutamist. Difteeriabatsill moodustab maksimaalse õhutuse tingimustes toksiini, vastupidi, teetanuse batsill ja teised toksogeensed anaeroobid ei vaja hapnikku. Vastavalt see on esimene kord Teisel juhul kasvatatakse kultuur õhukeses, suure õhuga kokkupuutepinnaga söötme kihis, teisel juhul valatakse sööde kõrgesse kihti ja eraldatakse erinevad hapnikuadsorbendid (vatt, kuivad punased verelibled). lisatud.
Kultiveerimistemperatuur ja -kestus on erinevate mikroobide puhul erinev. Toksiini moodustumise protsessile on omane vajadus täiusliku temperatuuri reguleerimise järele termostaadis. Temperatuuri kõikumised mõjutavad negatiivselt toksiini tugevust. Seetõttu on termostaadid, milles toimub toksiinide moodustumine, varustatud täpsete termostaatidega.
Igal üksikjuhul määrab kultuuri kasvatamise kestuse toksiini moodustumise intensiivsus antud söötmeseerias. Kasvatamise lõpetamise küsimuse lahendamiseks määratakse toksiini tugevus ja söötme pH. erinevad kuupäevad kasvav.
Kui toksiini tugevus saavutab maksimumi, eraldatakse see mikroobikehadest, filtreerides läbi spetsiaalsete bakteriaalsete filtrite (anaeroobsed mikroorganismid) või tavaliste paberfiltrite (diphtheria bacillus).
Toksiliste filtraatide ülekandumine vanatoksiinile toimub pikaajalisel kokkupuutel formaldehüüdiga temperatuuril 39–40 °C. Formaliin on kombineeritud aminohapete, polüpeptiidide ja toksiinvalkude vabade aminorühmadega ning kaotab seetõttu oma toksilised omadused. Vanatoksiini toksiini üleminek toimub 3-4 nädala jooksul. Toksoidi õigeks moodustamiseks on oluline toksiini pH. Kõige soodsam on keskkonna neutraalne või kergelt aluseline reaktsioon.
Anatoksiine iseloomustab loomadele täielik kahjutus. Kui neid aga täielikult ei neutraliseerita, võivad need säilitada tekitavad toksiinijäägid tundlikus kehas hiline kahju. Seetõttu jälgitakse toksoidide kahjutuse kontrollimisel loomi pika aja jooksul. Toksoidide kahjutus on pöördumatu. Ükski mõju ei too kaasa kaotatud toksilisuse taastamist.
Toksoidid säilivad peaaegu täielikult antigeensed omadused toksiinid. Seda saab kontrollida erinevaid meetodeid in vitro (flokulatsioonireaktsioon, toksoidi sidumisreaktsioon) ja loomkatsetes, kus toksoidi manustamine põhjustab vastavate antitoksiinide moodustumist ja antitoksilise immuunsuse teket.
Toksoidid on püsivad; nad taluvad korduvat külmutamist ja sulatamist, peavad toimele vastu kõrge temperatuur ja on pikaajalisel ladustamisel stabiilsed.
Lisaks spetsiifilistele valkudele sisaldavad toksoidid ka ballastaineid, millest neid saab vabastada erinevaid meetodeid. Need põhinevad toksoidide võimel sadestuda, kui need on küllastunud neutraalsete soolade, sooladega raskemetallid, happed (vesinikkloriid, trikloroäädikhape, metafosforhape), samuti etüül- ja metüülalkoholi juuresolekul madalatel temperatuuridel. Neid meetodeid kasutatakse praegu puhastatud kontsentreeritud toksoidide saamiseks.
Toksoidid adsorbeeritakse erinevatele lahustumatutele ainetele (fosforisoolad, alumiiniumhüdroksiid), sellest valmistatakse sorbeeritud toksoidid, mida iseloomustab aeglane imendumine organismis, mille tulemusena on võimalik saada intensiivsem immuunsüsteem.
Oma kahjutuse, kõrge antigeensuse ja immunogeensuse tõttu on toksoidid kõige väärtuslikum vahend mitmete haiguste ennetamiseks ja raviks.
Praeguseks on toksoidid saadud: difteeria, teetanus, botuliin, stafülokokk, düsenteeria, gaasigangreeni patogeenide tekitatud toksiinidest, aga ka maomürgist.
Toksoidid valmistatakse vastavate patogeenide eksotoksiinidest, töödeldes neid 0,3-0,4% formaldehüüdiga ja hoides 3-4 nädalat 38-40°C juures. Difteeria, teetanus ja Hiljuti stafülokoki ja koolera toksoidid. Botulismivastased toksoidid on saadud, anaeroobne infektsioon. Neid ravimeid toodetakse puhastatud kujul; need vabastatakse ballastainetest ja adsorbeeritakse alumiiniumoksiidhüdraadile. Toksoidid põhjustavad antitoksiinide tootmist, mis neutraliseerivad eksotoksiine, kuid ei avalda kahjulikku mõju patogeenidele.
Vaktsiinidena kasutatavad toksoidid kutsuvad esile spetsiifilise immuunvastuse.
Immunoglobuliinid ja seerumid nakkushaiguste raviks ja ennetamiseks
IMMUNOGLOBULIINID (lat. immunis free, free from millest + globulus ball) on inimeste või loomade seerumi- ja sekretoorsed valgud, millel on antikehade aktiivsus ja mis osalevad kaitsemehhanismis nakkushaiguste patogeenide vastu.
Immunoglobuliine on 5 klassi: IgG, IgA, IgM, IgD ja IgE. Tavaliselt on IgG inimese seerumis kontsentratsioonis umbes. 1,2 g 100 ml kohta, moodustab 70-80% kõigist immunoglobuliinidest ja sisaldab põhiosa paljude viiruste ja bakterite vastaseid antikehi, samuti antitoksiine. IgA sisaldub vereseerumis ja eritistes (ternespiim, sülg jne) polümeeride kujul ("sekretoorne" immunoglobuliin - slgA). IgM sisaldab antikehi gramnegatiivsete bakterite endotoksiinide (lipopolüsahhariidide) ja viiruste vastu. IgD ja IgE esinevad vereseerumis madalates kontsentratsioonides. IgE sisaldab antikehi, näiteks reagiine, mis on seotud allergilised reaktsioonid. Mitmete haiguste korral võib I. sisaldus vereseerumis erineda normaalne tase, millel on diagnostiline väärtus.
Immunoglobuliini preparaadid. Immunoglobuliinipreparaatides on põhikomponendiks IgG. Töö on käimas IgM ja IgA-ga rikastatud gammaglobuliini preparaadi loomisel.
Leetrite ennetamiseks, viiruslik hepatiit Ja muude infektsioonide, aga ka hüpogammaglobulineemia ja agammaglobulineemia raviks kasutatakse ravimit "Tavaline inimese immunoglobuliin" (vananenud nimetus "Gammaglobuliin leetrite ennetamiseks"), mis kujutab endast 10% gammaglobuliini puhastatud fraktsiooni lahust. vereseerum (doonor, platsenta või abort). Ravimi tavaline profülaktiline annus on 1,5-3 ml, manustatuna ainult intramuskulaarselt. Meditsiinilistel eesmärkidel kasutatakse spetsiaalselt valmistatud ravimit “Normaalne inimese immunoglobuliin intravenoosne manustamine", mida manustatakse suurtes annustes (25-50 ml).
Spetsiifiline I., mis sisaldab teatud nakkusetekitajate või nende toksiinide vastaseid antikehi, saadakse vastavate antigeenidega immuniseeritud doonorite plasmast või seerumist. Selliste ravimite hulka kuuluvad teetanuse-, stafülokoki-, gripi-, entsefaliit-, läkaköha- ja muud immunoglobuliinid.
Ennetamiseks hemolüütiline haigus Ema ja isa vere Rh-sobimatusest põhjustatud vastsündinutel kasutatakse reesusvastast immunoglobuliini. Reesusvastane immunoglobuliin saadakse inimese vereseerumist koos kõrge sisaldus Rh-antigeeni vastased antikehad. Seda ravimit manustatakse esimese 48–72 tunni jooksul pärast sündi esmasünnitanud Rh-negatiivsetele naistele, kes on sünnitanud Rh-positiivse lapse. Reesusvastane immunoglobuliin seob loote Rh-antigeeni, mis tungib ema verre, kõrvaldades selle. hemolüütilise haiguse võimalus uue raseduse ajal.
IMMUNESEERUM (lat. immunis free, free) - antikehi sisaldavad inimese või looma veretooted; kasutatakse erinevate haiguste diagnoosimiseks, raviks ja ennetamiseks.
I.s. põhineb antigeenide omadusel kutsuda esile antikehade teket organismis. Immuunseerumid saadakse immuniseeritud loomadelt ja inimestelt, samuti inimestelt, kes on nakatunud. haigus, mille puhul veri sisaldab vastavaid antikehi (konvalestsentsseerum). Seerumid võivad sisaldada nn. normaalsed antikehad, näiteks alloantikehad või isoantikehad, mis moodustuvad kehas väljaspool kunstlikku immuniseerimist. Korduva immuniseerimise tulemusena, st sisaldades antikehi kõrged kontsentratsioonid, - hüperimmuunseerumid.
On diagnostilisi ja terapeutilisi-profülaktilisi seerumeid. Diagnostiline I.s. kasutatakse mitmesugustes immunoolreaktsioonides patogeeni tüübi, alamliigi või serotüübi (serotüübi) kindlakstegemiseks inf. haigused, erinevate antigeenide määramine bioloogilistes materjalides. Olenevalt immunoloogiliste reaktsioonide olemusest eristatakse aglutineerivaid, sadestavaid, fluorestseeruvaid, hemolüütilisi, radioaktiivsete nukliididega märgistatud, ensüümide jt. diagnostilised seerumid. Kiiludes kasutatakse praktikas laialdaselt diagnostilisi seerumeid veregrupi määramiseks, koe tüpiseerimiseks, allogeensete siirdamiste ja vereülekannete ajal, organismi immunoloogilise seisundi iseloomustamiseks (immunoglobuliinide klasside määramine jne).
Terapeutiliste ja profülaktiliste seerumite hulka kuuluvad antitoksilised, antibakteriaalsed, viirusevastased seerumid, aga ka immunoglobuliinid. Antitoksilised seerumid saadakse hüperimmuniseeritud loomadelt (tavaliselt hobustelt) toksoidide kasvavate annuste parenteraalse manustamisega (vt Antitoksiinid), harvemini toksoidiga immuniseeritud doonoritelt. Antitoksilisi seerumeid kasutatakse toksiineemiliste infektsioonide raviks ja ennetamiseks, mis põhinevad bakteriaalsete eksotoksiinide toimel organismile (teetanuse, botulismi, difteeria, gaasigangreeni tekitajad, stafülokoki infektsioonid). Antitoksilised on ka seerumid, mis sisaldavad madude, ämblike ja mürkide mürkide vastaseid antikehi. taimset päritolu. Antitoksilistes seerumites olevad antikehad neutraliseerivad vastavate toksiinide mõju.
Antibakteriaalsed seerumid saadakse vastavate tapetud bakterite või nende antigeenidega hüperimmuniseeritud hobuste või härgade verest. Neid seerumeid ei leitud lai rakendus teiste tõhusamate antimikroobsete ainete kättesaadavuse tõttu.
Viirusevastased seerumid saadakse nende loomade verest, keda on immuniseeritud viiruste või vastavate viiruste vaktsiinitüvedega. Need seerumid puhastatakse madalal temperatuuril alkoholisadestamise meetoditega, et saada immunoglobuliini või gammaglobuliini preparaate (heterogeensed immunoglobuliinid). Nende hulka kuuluvad gammaglobuliini vastu puukentsefaliit, marutaudivastane gammaglobuliin jne.
Inimverest saadud immunoglobuliinid (homoloogsed immunoglobuliinid), välja arvatud normaalne immunoglobuliin inimestele, on suunav mõju. Homoloogiliste immunoglobuliinide eeliseks heterogeensete ees on nende nõrk reaktogeensus ja antikehade pikem ringlemine organismis (30-40 päeva jooksul). Kõrgeim väärtus Kiiludes on praktikas kõige vähem komplementaarset toimet immunoglobuliinidel, mis erinevalt tavapärastest immunoglobuliinipreparaatidest, mis on ette nähtud intramuskulaarne süstimine, kasutatakse intravenoosseks manustamiseks.
Sihtotstarbeliste immunoglobuliinide hulgast eraldatakse reesusvastane immunoglobuliin, mida kasutatakse vastsündinute hemolüütilise haiguse immunoprofülaktikaks. Seda manustatakse esmasünnitavatele Rh-negatiivsetele naistele sünnitusjärgsel perioodil või pärast aborti.
SEERUMIHAIGUS – allergiline haigus, mis areneb vastusena vereseerumi või selle preparaatide parenteraalsele manustamisele. Haiguse kulg sõltub seerumi kvaliteedist, kogusest, manustamisviisist ja organismi reaktsioonivõimest. Haigus põhineb veresoonte ja kudede kahjustusel immuunkomplekside poolt, mis moodustuvad organismis vastusena võõrvalgu sissetoomisele. Immuunkompleksid koosnevad antigeenist (võõrvalgust), antikehadest ja komplemendist (vt Allergia).
Inkubatsiooniperiood seerumi esmasel manustamisel kestab see 2 kuni 12 (tavaliselt 7-12) päeva, kusjuures taastutvustamist vähendatakse 1-3 päevani. Haigus algab ägedalt: kehatemperatuur langeb ja seejärel tõuseb, seerumi süstimise kohas ilmnevad valu ja turse; piirkondlik, aga ka muu lümf. sõlmede suurus suureneb. Üks peamisi sümptomeid on lööve. Sagedamini on see polümorfne urtikaaria või erütematoosne, kujuline, mõnikord leetrite või sarlakilaadne, millega kaasneb valulik sügelus. Patsiendi nägu on kahvatu ja pundunud. Võimalik on ohtlik, kuid kiiresti mööduv kõriturse. Mõnikord tekib jäsemete liigestes valu ja täheldatakse turset. Võib tekkida bronhiit, bronhospasm ja isegi äge emfüseem. Vererõhk langeb, pulss kiireneb, mõnikord aeglustub. Võimalik müokardi kahjustus, neuriit, radikuliit, lihaste nõrkus. Rasketel juhtudel on kahjustatud neerud (turse, oliguuria ja harvem albuminuuria).
Prodromaalse perioodi vereanalüüs näitab kerget leukotsütoosi ja seejärel leukotsütopeeniat, lümfotsütoosi, eosinofiiliat, trombotsütopeeniat. ESR esmalt väheneb, seejärel suureneb. Avastatakse hüpoglükeemia ja vere hüübimise vähenemine. Seerumihaigus võib piirduda ainult lokaalsete ilmingutega (turse, hüperemia, sügelus, nahanekroos vereseerumi manustamiskohas). Relapsid on võimalikud spetsiifiliste antikehade korduva kuhjumise tõttu, mis interakteeruvad verre jäänud süstitud seerumiga. Sellistel juhtudel võib haigus kesta mitu nädalat või kuud. Seerumi korduval manustamisel võib see areneda anafülaktiline šokk. Kiil. anafülaktilise šoki pilt ja ravi – vt Anafülaksia.
Ravi viib läbi arst. Kergete vormide korral võib see piirduda suukaudse manustamisega. antihistamiinikumid Ja kohalik rakendus vahendid, mille eesmärk on vähendada sügelust (soojad vannid, hõõrumine mentooli ja salitsüülalkoholiga). Raskematel juhtudel on näidustatud antihistamiinikumide (suprastiin, difenhüdramiin jne) ja glükokortikoidide süstimine. On ette nähtud askorutiin, kaltsiumglükonaat ja vastavalt näidustustele - diureetikumid, bronhodilataatorid jne.
Ennetamine: avastamine ülitundlikkus patsiendilt seerumile. Sel eesmärgil süstitakse küünarvarre sisepinnale intradermaalselt 0,02 ml seerumit, mis on lahjendatud naatriumkloriidi isotoonilise lahusega (1:100). Test loetakse positiivseks, kui 20 minuti pärast ilmneb süstekohas turse ja hüperemia. 1-3 cm või rohkem. Nendel juhtudel, kui puuduvad elutähtsad näidustused, on parem seerumit mitte manustada. Seerumi terapeutiline annus manustatakse fraktsionaalselt Bezredki meetodil: esmalt manustatakse subkutaanselt 0,1 ml, 20 minuti pärast veel 0,2 ml ja ühe tunni pärast ülejäänud annus intramuskulaarselt.
Vaktsiinid mikroobiraku üksikutest antigeensetest komponentidest
Nagu teada, sisaldab mikroobirakk suurel hulgal antigeene, kuid mitte kõik neist ei kutsu võrdselt esile immuunsuse teket. Sellega seoses otsustasid nad eraldada mikroobirakkudest need antigeenid, millel on kõige tugevamad immunogeensed omadused. See meetod kuulub N.F. Gamaleyale. Sellised antigeenid enteraalse tüüfuse rühma mikroorganismides on valgu glütsidonoidkompleks (täielik antigeeni kiri). Sellesse vaktsiinide rühma kuulub ka projekti antigeen. Antigeenide saamiseks kasutatakse erinevaid keemilisi meetodeid: ekstraheerimine trikloroäädikhappega, ensümaatilised transformatsioonid, happeline hüdrolüüs jne. Kui komplekssed antigeenid viiakse kehasse puhtal kujul, lahustuvad need kiiresti ega taga vajalikku pikaajalist immuunsust. Seetõttu lisatakse neile tavaliselt erinevaid adsorbente (ammooniummaarjas), mis naha alla sattudes loovad antigeeni “depoo” ja suurendavad nende immunogeenset toimet. Komplekssetest immunogeensetest antigeenidest koosnevaid vaktsiine nimetatakse keemilisteks vaktsiinideks.
Anatoksiinid- mikroorganismide jäätmed. Immuunsuse kujunemine mitmete haiguste (difteeria, botulism jt) korral on oma olemuselt valdavalt antitoksiline. Seetõttu tekkis idee kasutada nende haiguste ennetamiseks mitte mikroobe, vaid nende endotoksiine. Puhaste toksiinide kasutamise meetodid, isegi väga väikestes kogustes, lõppesid ebaõnnestumisega, kuna vaktsineeritutel tekkisid väga rasked üldised ja eriti lokaalsed reaktsioonid, millega kaasnes nahanekroos. Immuunseerumiga neutraliseeritud mürke (neutraalseid segusid) üritati kasutada, kuid seda meetodit ei kasutatud laialdaselt, sest süstitud seerum tekitas organismi sensibiliseerimise. Eriti edukas oli prantsuse teadlase Ramoni väljatöötatud meetod, mis lisas toksiinile väikestes kogustes formaldehüüdi ja hoidis seda 37 0 C juures 30-32 päeva. Selle tulemusena saadi neutraliseeritud ravim, mis säilitas oma immuniseerivad võimed. On kindlaks tehtud, et toksiini muundamise mehhanismiks toksoid kahe protsessi taga: toksiini labiilse molekulaarse antigeense struktuuri stabiliseerumine ja selle toksofoorirühmade blokeerimine. Toksoide toodetakse puhastatuna toitekeskkonna ballastvalkudest, lisades dekodeerivaid aineid (alumiiniumfosfaat, alumiiniumoksiidhüdraat jne). Kasutatakse toksoide difteeria, botulismi ennetamiseks.
Vaktsiinide tüübid patogeenide arvu järgi
Monovaktsiinid on vaktsiinid, mis on valmistatud ühest patogeenist või antigeenist; kahe antigeeniga - divvaktsiin; kolmega - trivaktsiiniga. Mitmete infektsioonide vastaseid antigeene sisaldavaid vaktsiine nimetatakse multivaktsiinideks või kombineeritud vaktsiinideks. Seotud vaktsiinid valmistatakse erinevate bakterite antigeenidest ja nende toksiinidest. Näiteks difteeria-läkaköha vaktsiin, mis sisaldab difteeria toksoid ja tapetud läkaköhabakterid, seotud soolevaktsiin - teetanuse toksoid, tüüfuse ja mumpsi bakterid. Juhtudel, kui vaktsiin koosneb sama tüüpi mikroorganismide erinevatest tüvedest, nimetatakse seda polüvalentseks [Radchuk, 1991].
Sest spetsiifiline ennetamine Nakkushaiguste puhul, mille patogeenid toodavad eksotoksiini, kasutatakse toksoide. Anatoksiin on eksotoksiin, millel puuduvad toksilised omadused, kuid millel on antigeensed omadused. Toksoidi tootmise meetodi pakkus välja 1923. aastal prantsuse teadlane Ramon. Erinevalt vaktsiinidest tekib inimestel kasutamisel antimikroobne immuunsus, toksoidide manustamisel moodustub antitoksiline immuunsus, kuna need kutsuvad esile antitoksiliste antikehade - antitoksiinide - sünteesi.
Hetkel kasutusel: difteeria, teetanus, botuliin, stafülokoki toksoidid, koolera toksoidid. Need saadakse teetanuse, difteeria, botulismi ja teiste mikroorganismide tekitajate sügavkasvatamisel fermentaatorites, mille tulemusena kogunevad kultuurivedelikku toksiinid. Pärast eraldamist mikroobirakud Eraldamise teel neutraliseeritakse kultuurivedelik (toksiin) formaldehüüdiga kontsentratsioonis 0,3=0,4% temperatuuril 37 ˚C 3-4 nädala jooksul. Neutraliseeritud toksiin – toksoid, mis on kaotanud mürgisuse, kuid säilitanud oma antigeensuse, allutatakse puhastamisele ja kontsentreerimisele, standardimisele ja pakendamisele. Puhastatud toksoididele lisatakse säilitusainet ja adjuvanti. Selliseid toksiine nimetatakse puhastatud sorbeeritud. Toksoidi doseeritakse antigeensetes ühikutes (EC – sidumisühik, LF – flokulatsiooniühik).
Toksoidide tiitrimine flokulatsioonireaktsioonis (Ramoni meetodil) viiakse läbi standardse flokuleeriva antitoksilise seerumi abil, milles on teada rahvusvaheliste antitoksiliste ühikute (ME) arv 1 ml-s.
Toksoide toodetakse üksikute preparaatidena ja osana seotud vaktsiinidest, mis on ette nähtud immuniseerimiseks mitme haiguse vastu.
Preparaate, mis on ette nähtud immuniseerimiseks ühe nakkuse vastu, nimetatakse monovaktsiinideks, kahe nakkushaiguse vastu - divvaktsiinideks, kolme vastu - trivaktsiinideks, mitme infektsiooni vastu - polüvaktsiinideks.
Toksoidide eelised seisnevad selles, et nad ei saa põhimõtteliselt põhjustada nakkushaigust ja neid saab kasutada nõrgenenud laste, haigete laste vaktsineerimiseks. kroonilised haigused ja immuunpuudulikkusega lapsed.
Immuunseerumid. Klassifikatsioon. Ettevalmistus, puhastamine, pealekandmine. Antitoksilised seerumid. Ettevalmistus, puhastamine, tiitrimine, pealekandmine, tüsistused kasutamise ajal ja nende vältimine
Seerumi immuunpreparaatide hulka kuuluvad immuunseerumid ja immunoglobuliinid.
Need ravimid tagavad passiivse immuunsuse nakkushaiguste patogeenide suhtes. Immuunseerumid saadakse hüperimmuniseeritud (intensiivselt immuniseeritud) loomade (hobuste, eeslite, jäneste) verest vastava vaktsiiniga või immuniseeritud inimeste verest (kasutatakse doonori-, platsenta-, abordiverd). Nendest ballastvalkude eemaldamiseks ja antikehade kontsentratsiooni suurendamiseks allutatakse natiivsetele immuunseerumitele. puhastamine kasutades erinevaid füüsikalis-keemilisi meetodeid (alkohol, ensümaatiline, afiinsuskromatograafia, ultrafiltratsioon).
Loomaverest saadud immuunseerumi preparaate nimetatakse heteroloogne ja inimeste verest - homoloogne. Seerumiravimite aktiivsus väljendub antikehade tiitrites – antitoksiinid, hemaglutiniinid, komplementi siduvad, viirust neutraliseerivad jne.
Seerumi immuunpreparaate kasutatakse spetsiifiliseks raviks ja hädaolukordade ennetamiseks. Peamine terapeutilise ja ennetava toime mehhanism taandub bakterite, viiruste ja nende antigeenide, sealhulgas kehas leiduvate toksiinide seondumisele ja neutraliseerimisele antikehade poolt. Sellega seoses eristatakse viirusevastaseid, antibakteriaalseid ja antitoksilisi immuunseerumi ravimeid.
Seerumipreparaate manustatakse intramuskulaarselt, subkutaanselt ja mõnikord ka intravenoosselt. Ravimi manustamise toime ilmneb kohe pärast manustamist ja kestab 2-3 nädalat. (heteroloogilised antikehad) kuni 4-5 nädalat. (homoloogsed antikehad). Et välistada esinemine anafülaktiline reaktsioon ja seerumtõve korral manustatakse ravimeid Bezredki meetodil.
Homoloogseid seerumipreparaate kasutatakse laialdaselt viirusliku hepatiidi, leetrite ennetamiseks ja raviks, botulismi, teetanuse, stafülokoki ja muude infektsioonide raviks. Heteroloogiliste seerumipreparaatide kasutamine on rangelt piiratud, kuna nende manustamise ajal on allergiliste tüsistuste oht.
Hiljuti on saadud monoklonaalsetel antikehadel põhinevaid immuunpreparaate. Kuid nad ei ole veel leidnud laialt levinud ravi- ja profülaktiline kasutamine, kuid neid kasutatakse endiselt diagnostilistel eesmärkidel.
Antitoksilised seerumid sisaldavad eksotoksiinide vastaseid antikehi. Need saadakse loomade (hobuste) hüperimmuniseerimisel toksoidiga. Selliste seerumite aktiivsust mõõdetakse AE (antitoksilised ühikud) või RÜ (rahvusvahelised ühikud) - see on minimaalne kogus seerum, mis on võimeline neutraliseerima teatud koguse (tavaliselt 100 DLM) loomset toksiini teatud tüüpi ja teatud mass.
Praegu on Venemaal laialdaselt kasutusel järgmised antitoksilised seerumid - antidifteeria, teetanusevastane, antigangrenoos, antibotuliin ja antitoksiliste seerumite kasutamine vastavate infektsioonide ravis on kohustuslik.
Antitoksilisi seerumeid saab tiitrida kolme meetodiga - Ehrlich, Roemer, Ramon. Ehrlichi meetod – enne seerumite tiitrimist määratakse toksiini tingimuslik letaalne (test)doos. Toksiini katseannuseks (Lt) loetakse kogust, mis 1 RÜ standardseerumiga segatuna põhjustab 50% katseloomade surma. Tiitrimise teises etapis kuni erinevad lahjendused testitavale seerumile lisatakse toksiini testdoos, segu hoitakse 45 minutit ja manustatakse loomadele. Saadud tulemuste põhjal arvutatakse testitud antitoksilise seerumi tiiter.
Difteeriavastast seerumit tiitritakse Roemeri meetodil.
Vajalik on tundlikkuse test võõrvalgu suhtes, kuna antitoksiline seerum on heterogeenne. Kui test on positiivne, viiakse läbi esialgne desensibiliseerimine (arsti juuresolekul), seejärel manustatakse vajalik annus seerumit kortikosteroidide katte all. Seerumi tõttu võivad tekkida mitmesugused tüsistused, millest kõige ohtlikum on anafülaktiline šokk. Seerumtõbi võib tekkida haiguse teisel nädalal. Antitoksilisele seerumile on alternatiiv - natiivne homoloogne plasma (manustada 250 ml 1-2 korda päevas).
Antitoksilised seerumid: antidifteeria, teetanusevastane. Laialdaselt kasutatakse: gangrenoosne, botuliinivastane. Antitoksiliste seerumite kasutamine asjakohaste infektsioonide ravis on kohustuslik.
Immuunsüsteem
Immuunsüsteem hõlmab spetsialiseeritud, anatoomiliselt eristatavat lümfoidkoe, mis on laiali kogu kehas erinevate lümfoidsete moodustiste ja üksikute rakkude kujul.
Seal on esmased - kesksed ( Luuüdi ja harknääre) ja sekundaarne - perifeerne (põrn, Lümfisõlmed, lümfoidkoe akumulatsioonid) immuunsüsteemi organid. Kõik need on omavahel seotud vereringesüsteemi, lümfivoolu ja ühtne süsteem immunoregulatsioon.
Esmane – keskasutused immuunsussüsteem.
Immuunsüsteemi keskorganid - luuüdi ja harknääre - täidavad kõige olulisemaid funktsioone, tagades immuunsüsteemi iseenesliku uuenemise, nendes organites toimuvad lähterakkude proliferatsiooni protsessid, nende diferentseerumine ja küpsemine kuni sisenemiseni. immuunsüsteemi perifeersete organite ringlus ja asustamine küpsete immunokompetentsete rakkudega.
Riis.
Riis.
Sekundaarne - immuunsüsteemi perifeersed organid.
Immuunsüsteemi perifeersed elundid ja koed - lümfisõlmed, põrn ja limaskestadega seotud lümfoidkoed - on antigeenide kohtumispaik immunokompetentsete rakkudega, antigeeni äratundmise ja spetsiifilise vastuse kujunemise koht, interaktsiooni koht. immunokompetentsed rakud, nende proliferatsioon (klonaalne ekspansioon), antigeenist sõltuv diferentseerumine ja immuunvastuse produktide akumulatsioonikoht.
Molekulaarsed vaktsiinid (toksoidid). Kviitung. Rakendus. Näited
Vastus: Molekulaarsed vaktsiinid - neis on antigeen molekulaarses vormis või isegi oma molekulide fragmentide kujul, mis määravad spetsiifilisuse, st epitoopide, determinantide kujul.
Looduslike patogeensete mikroobide kultiveerimise käigus võib saada kaitsva antigeeni, mille käigus nende bakterite sünteesitud toksiin muundatakse toksoidiks, mis säilitab oma spetsiifilise antigeensuse ja immunogeensuse. Toksoidid on teatud tüüpi molekulaarne vaktsiin.
Anatoksiinid on preparaadid, mis on saadud valgubakteriaalsetest eksotoksiinidest, millel puuduvad täielikult nende toksilised omadused, kuid mis säilitavad antigeensed ja immunogeensed omadused.
Kviitung:
Toksogeenseid baktereid kasvatatakse vedelas keskkonnas, filtreeritakse mikroobikehade eemaldamiseks bakterifiltrite abil, filtraadile lisatakse 0,4% formaliini ja hoitakse termostaadis temperatuuril 30-40 °C 4 nädalat kuni mürgiste omaduste täieliku kadumiseni, testitakse steriilsus ja toksiline ja immunogeensus. Neid ravimeid nimetatakse looduslikeks toksoidideks; praegu neid peaaegu ei kasutata, kuna need sisaldavad suures koguses ballastaineid, mis mõjutavad keha negatiivselt. Puhastan toksoidid füüsikaliselt ja keemiliselt ning adsorbeerin adjuvantidele. Selliseid ravimeid nimetatakse adsorbeeritud kõrgelt puhastatud kontsentreeritud toksoidideks.
Toksoidide tiitrimine follikulatsioonireaktsioonis viiakse läbi standardse follikuleeriva antitoksilise seerumi abil, milles antitoksiliste ühikute arv on teada. 1 antigeenne ühik toksoidi on tähistatud Lf, see on toksoidi kogus, mis siseneb follikulatsioonireaktsiooni 1 ühiku difteeria toksoidiga.
Rakendus:
Toksoide kasutatakse ennetamiseks ja harvem toksiineemiliste infektsioonide (difteeria, gaasigangreen, botulism, teetanus) raviks. Toksoide kasutatakse ka antitoksiliste seerumite saamiseks loomade hüperimmuniseerimise teel.
adsorbeeritud stafülokoki toksoid
botuliini toksoid
gaasipatogeenide eksotoksiinidest pärit toksoidid.
Immunoglobuliinid, tüübid. Ettevalmistus, puhastamine, pealekandmine.
Vastus: Immunoglobuliinid (IG, Ig) on glükoproteiinide eriklass, mis esinevad B-lümfotsüütide pinnal membraaniga seotud retseptorite kujul ning vereseerumis ja koevedelikus lahustuvate molekulide kujul ning on võimelised seonduma. väga selektiivselt teatud tüüpi molekulidele, mis sellega seostuvad, nimetatakse antigeenideks. Immuunsüsteem kasutab antikehi võõrkehade (nt bakterid ja viirused) tuvastamiseks ja neutraliseerimiseks.
Immunoglobuliinide ehituse üldplaan: 1) Fab; 2) Fc; 3) raske ahel; 4) kerge kett; 5) antigeeni sidumiskoht; 6) hingeosa
Immunoglobuliinide omadused:
Immunoglobuliin mitte ainult ei täida kehas kaitsefunktsiooni, vaid seda kasutatakse aktiivselt ka meditsiinis. Kvaliteetne ja kvantifitseerimine Erinevate klasside antikehi kasutatakse erinevate patoloogiate tuvastamiseks. Immunoglobuliinid sisalduvad ravimites, mis on ette nähtud nakkushaiguste ja mitmete muude seisundite ennetamiseks ja raviks.
Immunoglobuliinide klassid ja nende funktsioonid:
Sõltuvalt struktuurist ja täidetavatest funktsioonidest eristatakse viit immunoglobuliinide klassi: G, M, E, A, D.
Immunoglobuliin G (IgG)
see on peamine vereseerumis sisalduvate immunoglobuliinide klass (70–75% kõigist antikehadest);
mida esindab neli alamklassi (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), millest igaüks täidab oma ainulaadseid funktsioone;
annab peamiselt sekundaarse immuunvastuse, mis hakkab tootma mõni päev pärast M-klassi immunoglobuliinide manustamist;
püsib kehas pikka aega, vältides sellega uuesti haigestumist eelnev infektsioon(näiteks tuulerõuged);
annab immuunsuse, mille eesmärk on kahjulike neutraliseerimine mürgised ained mikroorganismid; See on väikese suurusega, mis võimaldab sellel kergesti tungida raseduse ajal läbi platsenta lootele, kaitstes seda infektsioonide eest.
Immunoglobuliin M (IgM)
hakkab tootma kohe pärast tundmatu võõragensi sisenemist organismi, olles esimene kaitseliin antigeenide vastu;
Tavaliselt on selle kogus umbes 10% immunoglobuliinide koguarvust;
M-klassi antikehad on suurimad, seetõttu esinevad nad raseduse ajal ainult ema veres ega suuda lootele tungida.
Immunoglobuliin A (IgA)
vereseerumis on selle sisaldus umbes 15-20% kõigist immunoglobuliinidest;
selle põhiülesanne on kaitsta limaskesti mikroorganismide ja muude võõrainete eest, seetõttu nimetatakse seda ka sekretoorseks;
Immunoglobuliin E (IgE)
tavaliselt verest praktiliselt puudub;
pärast antigeeni kinnitumist IgE-ga vabanevad histamiin ja serotoniin - ained, mis vastutavad turse, sügeluse, põletuse, lööbe ja muude allergiate iseloomulike ilmingute eest;
kui immunoglobuliin E on tõusnud, võib see viidata organismi kalduvusele allergilisele patoloogiale, nn atoopiale (näiteks atoopiline dermatiit).
Immunoglobuliin D (IgD)
Tavaliselt on selle kontsentratsioon veres äärmiselt madal (alla 1% antikehade koguhulgast) ja selle funktsioonid pole täielikult selged.
Antikehi kasutatakse aktiivselt ravimid. Praegu saate immunoglobuliini osta peaaegu igas apteegis.
Kviitung:
Immunoglobuliinipreparaatide saamiseks kasutatakse kõige sagedamini Kohni meetodit, valgu fraktsioneerimise meetodit. etüülalkohol. Kasutatakse selle meetodi erinevaid modifikatsioone, fraktsioneerimine toimub madalal temperatuuril. Kasutatakse täiendavaid viise fraktsioneerimine, et vabastada ravimid pigmentidest, gonadotroopsetest hormoonidest, veregrupi ainetest ja muudest antigeenidest. Et tagada viirusliku saastumise välistamine kaasaegses tootmises, täiendavaid meetodeid vadakupreparaatide neutraliseerimine: pastöriseerimine ( kuumtöötlus materjalid 60°C juures 10 tundi), töötlemine kloroformi, polüetüleenglükooli, R-propiolaktooniga, ultraviolettkiirgusega.
Immunoglobuliinipreparaate kontrollitakse vastavalt füüsilised ja keemilised omadused hoolduseks kogu valk, killustatud ja agregeeritud molekulid, elektroforeetiline homogeensus, ballast vadakuvalkudest puhastamise aste, steriilsus, toksilisus, pürogeensus, hüppevõime, HBsAg ja C-hepatiidi viiruse ja HIV antikehade olemasolu. Venemaa nõuete kohaselt ei tohiks immunoglobuliini fragmentide ja agregaatide arv kaubanduslikes preparaatides ületada 3%, kuigi vastavalt Euroopa farmakopöa see muudetud molekulide protsent immunoglobuliinipreparaatides võib ulatuda 10-ni.
Rakendus:
Inimese immunoglobuliin on ette nähtud järgmiste haiguste jaoks:
immuunpuudulikkuse seisundid;
rasked viirus-, bakteriaalsed, seeninfektsioonid;
haiguste ennetamine riskirühma kuuluvatel inimestel (näiteks väga enneaegselt sündinud lastel).
Samuti on spetsiifiliste seisundite vastased antikehad. Reesusvastast immunoglobuliini kasutatakse Rh-konflikti korral raseduse ajal. Rasketele allergilised haigused- allergiavastane immunoglobuliin. See ravim on tõhusad vahendid atoopiliste reaktsioonide tõttu. Näidustused kasutamiseks on järgmised:
allergiline dermatiit,
Neurodermatiit, urtikaaria, Quincke ödeem;
Atoopiline bronhiaalastma;
Heina palavik.
Kohene ülitundlikkus. Anafülaksia – määratlus, üldised omadused, ilmingud
Vastus: Vahetut tüüpi ülitundlikkus (IHT) on ülitundlikkus, mida põhjustavad allergeenide vastased antikehad (IgE, IgG, IgM). Tekib mõni minut või tund pärast kokkupuudet allergeeniga: veresooned laienevad, nende läbilaskvus suureneb, tekib sügelus, bronhospasm, lööve, turse.
HNT sisaldab I, II ja III tüüpi allergilisi reaktsioone:
I tüüp - anafülaktiline.
Esmasel kokkupuutel antigeeniga moodustub IgE, mis kinnitub Fc fragmendi abil nuumrakkude ja basofiilide külge. Taastoodud antigeen ristseondub rakkudel IgE-ga, põhjustades nende degranuleerumist ja vabastades histamiini ja teisi allergia vahendajaid.
Allergeeni esialgne tarbimine põhjustab plasmarakkudes IgE ja IgG4 tootmist. Sünteesitud IgE kinnitub Fc fragmendi kaudu veres olevate basofiilide ja limaskestade nuumrakkude Fc retseptoritega, sidekoe. Kui allergeen siseneb uuesti nuumrakud ja basofiilid, moodustuvad IgE kompleksid allergeeniga, põhjustades rakkude degranulatsiooni.
Anafülaktiline šokk - tekib ägedalt kollapsi, turse, spasmi tekkega Sujuv muskel; lõpeb sageli surmaga.
Urtikaaria - veresoonte läbilaskvus suureneb, nahk muutub punaseks, tekivad villid ja sügelus.
Bronhiaalastma – tekivad põletikud, bronhospasm, limaeritus bronhides suureneb.
II tüüp - tsütotoksiline.
Rakul paikneva antigeeni tunnevad ära IgG ja IgM klassi antikehad. "Rakk-antigeen-antikeha" interaktsiooni käigus toimub komplemendi aktiveerimine ja raku hävitamine kolmes suunas: komplemendist sõltuv tsütolüüs; fagotsütoos; antikehast sõltuv rakuline tsütotoksilisus.
II tüüpi ülitundlikkuse järgi arenevad välja mõned autoimmuunhaigused, mis on põhjustatud autoantikehade ilmnemisest enda kudede antigeenide vastu: pahaloomuline myasthenia gravis, autoimmuunne. hemolüütiline aneemia, pemphigus vulgaris, Goodpasture'i sündroom, autoimmuunne hüpertüreoidism, insuliinsõltuv II tüüpi diabeet.
III tüüp - immunokompleks.
Klasside IgG ja IgM antikehad moodustavad immuunkomplekse lahustuvate antigeenidega, mis aktiveerivad komplementi. Antigeenide liigse või komplemendi puudumise korral ladestuvad immuunkompleksid veresoonte seintele, basaalmembraanidele, st Fc-retseptoritega struktuuridele.
III tüüpi ülitundlikkuse esmased komponendid on lahustuvad immuunkompleksid antigeen-antikeha ja komplement (anafülatoksiinid C4a, C3a, C5a). Antigeenide liigse või komplemendi puudumise korral ladestuvad immuunkompleksid veresoonte seinale, basaalmembraanidele, s.t. struktuurid, millel on Fc-retseptorid. Kahjustused on põhjustatud trombotsüütidest, neutrofiilidest, immuunkompleksidest ja komplemendist.