Toitekeskkond läkaköha patogeeni isoleerimiseks. Läkaköha põhjustaja morfoloogia

Esimene ajalooline teave läkaköha esinemissageduse kohta pärineb keskajast, kui Hollandis, Prantsusmaal ja Inglismaal kirjeldati haiguse epideemiaid.

Belgia bakterioloog Jules Bordet ja prantsuse teadlane Octave Zhangu eraldasid ja kirjeldasid 1906. aastal esimest korda maailmas haiguse tekitajat, mida hiljem hakati nimetama Bordet Zhangu batsilliks. Hiljem nimetati J. Bordet auks bakterite perekond Bordetella. Massiline vaktsineerimine läkaköha vastu algas 20. sajandi keskel.

Läkaköha on inimese hingamisteede äge nakkusprotsess, mis mõjutab bronhide, bronhioolide, aga ka kõri ja hingetoru limaskesta, millega kaasneb kramplik paroksüsmaalne köha. Whooping köha põhjustab bakter Bordetella läkaköha.

Läkaköha põhjustaja mikrobioloogilised omadused

Perekonda Bordetella kuuluvad mitmed inimese hingamisteede haiguste patogeenid, millest ülima tähtsusega on läkaköha põhjustaja Bordetella pertussis ja parapertussise (kliiniliselt sarnane haigus, kuid esineb kergel kujul) põhjustaja Bordetella parapertussis. .

Selle perekonna bakterid on gramnegatiivsed (ei säilita värvimisel värvainet), neil on vardakujuline kuju ja väike suurus, liikumatud.

Läkaköha pulk - Bordetella pertussis - iseloomustab väike suurus (ei ületa 1 mikronit), on võimeline moodustama kaitsva mikrokapsli, mis on kaetud mikrovilliga. Bakter on võimeline paljunema ainult hapniku juuresolekul (aeroobne) ja on toitainekeskkonna suhtes üsna nõudlik. Läkaköha kolooniad meenutavad pärleid või elavhõbedapiiskasid: hõbedased, väikesed, sfäärilised ja koonusekujulised.

Läkaköha peamised struktuurielemendid - kaitsev mikrokapsel, mikrovillid, rakusein (välis- ja sisemembraan) - kannavad mikroorganismi antigeenset koormust ja toodavad toksiine, tagades immuunvastuse ja haiguskliiniku.

Erinevalt tõelisest läkaköha tekitajast on B. parapertussis suur, kasvab teistes kolooniates toitainekeskkonnas ja, mis kõige tähtsam, erineb antigeenide struktuuri poolest.

Perekonda Bordetella kuuluvate bakterite antigeenne struktuur on väga keeruline. Kapsel sisaldab 14 aglutinogeeni (kapsli antigeenid), mida nimetatakse faktoriteks. Seega on faktor 1, 2, 3 spetsiifiline B.pertussis'e suhtes, antigeenne faktor 14 on iseloomulik B.parapertussis'ele ja faktor 7 on kogu Bordetella perekonna jaoks tavaline.

Kokku on läkaköhas 8 aglutinogeeni, kuid juhtivad on 1,2 ja 3. Sõltuvalt nende antigeenide kombinatsioonist ühe bakteriaalses rakus, 4 serotüübi eristatakse: 1,2,0; 1,0,3; 1,2,3; 1,0,0. Esimesed kaks serotüüpi eraldatakse sagedamini vaktsineeritud patsientidelt ja kergete vormidega patsientidelt, viimane - raskete vormidega patsientidelt.

Läkaköha patogeensuse tegurid:

Bakteriraku toime rakendamisel inimkehale mängivad esmatähtsat rolli läkaköha patogeensustegurid.

Nende hulgas on:


Whooping köha epidemioloogia

Nakkuse allikaks on haige inimene (antroponootiline infektsioon). Praegu ei ole bordetella bakterikandja tõestatud. Nakkusperiood kestab 1 kuni 25 haiguspäeva.

Traditsiooniliselt nimetatakse läkaköha "lapseea infektsiooniks", sest. tegelikult leitakse 95% juhtudest lastel ja ainult 5% täiskasvanutel. Siiski on tõendeid selle kohta, et tegelik arv juhtumeid täiskasvanutel on kõrgem kui ametliku statistika. See on tingitud asjaolust, et arstid on täiskasvanu uurimisel pisut ettevaatlikud, kuna neil on eelarvamused selle nakkuse vastuvõtlikkuse kohta lastele. Lisaks esineb täiskasvanutel haigus kustutatud kujul, ägedate hingamisteede infektsioonide varjus, mis muudab diagnoosimise keeruliseks.

Kõige rohkem haigusjuhte registreeritakse vanuserühmas kuni 1 aasta. See on tingitud mittetäielikust vaktsineerimist selle vanuse imikute ja nende kõrge vastuvõtlikkuse tõttu. Riskirühm on ka nooremad koolilapsed: vaktsineerimisjärgne immuunsus 5-7. eluaastaks on oluliselt nõrgenenud, seetõttu koguneb selle vanuserühma laste seas palju haigustekitaja ringlemist toetavaid mitteimmuunseid.

Läkaköha edasikandumise mehhanism on aerosool, levikutee on õhus.

Nakkuslikkus (nakkus) on väga kõrge ja nakkavuse indeks on 70-100%. Immuunsuse puudumisel hõivava köha (kui ei ole vaktsineeritud või isik ei olnud haige), vastuvõtlikkuse lähenemisviisi 90%.

Põhjuslik agent Whooping köha on massiliselt vabaneb keskkonda köha. Krambilise läkaköhaga moodustub jäme aerosool, mis settib kiiresti 2 meetri raadiuses. Võime tungida hingamisteedesse on väike: sülje ja röga osakesed jäävad ülemistesse hingamisteedesse, kus nakkusprotsessi ei saa realiseerida. Seetõttu on läkaköhaga nakatumiseks vajalik väga pikk ja tihe kontakt.

Keskkonna stabiilsus on madal. Läkaköhapulk sureb kiiresti ultraviolettkiirte ja kuumutamise mõjul (50 kraadi juures sureb 30 minutiga), inaktiveeritakse kiiresti tõhusate desinfitseerivate lahustega. Kuivanud rögas majapidamistarvetel sureb see üsna kiiresti ja märjana võib püsida mitu päeva. Hooajalisus: sügis-talv haripunktiga novembris-detsembris.

Immuunsus pärast haigust on pingeline ja püsiv. Taasinfektsioon immuunpuudulikkusega on võimalik, kuid sellised juhtumid nõuavad laboratoorset uurimist.

Haiguse asjakohasus

Läkaköha on vaktsiiniga välditav infektsioon. 90ndate lõpus. 20. sajandil algas järk-järgult läkaköha esinemissageduse tõus ja praegu on haigestumuse kasv ühtlane. Seega oli Vene Föderatsiooni haigestumus 2015. aastal 4,42 juhtu 100 000 elaniku kohta, 2014. aastal - 3,23 juhtu 100 000 elaniku kohta, 2012. aastal - 3,15 juhtu 100 000. 2014. aastal registreeriti 1 surmajuhtum.

Struktuuris vanuse järgi oli 2015. aastal alla ühe aasta vanade laste osakaal 2014. aastal 82% - 54%.

Läkaköha esinemissageduse suurenemise põhjused:


Samuti tuleb märkida, et haiguste arvu tegelikud numbrid võivad oluliselt ületada statistilisi, sest. tegelikkuses ei ole alati võimalik läkaköha diagnoosida: haigus võib kulgeda ebatüüpiliselt, sümptomid võivad olla sarnased parapertussisile ning tänapäevased diagnostikameetodid pole väikelinnades kättesaadavad.

Läkaköha patogenees

Aeg läkaköha sissehingamisest kuni esimeste sümptomite ilmnemiseni (inkubatsiooniperiood) on 3–14 päeva.

Epiteel on bakterite kinnitamise ja korrutamise koht hingamisteedes. Protsess on vähem väljendunud trahheto, kõri, rohkem - bronhides ja bronhioolides.

Patogeen ei ilmu verre. Paljunemisprotsess kestab 2-3 nädalat ja sellega kaasneb aktiivne eksotoksiinide – rakuvälise adenülaattsüklaasi ja läkaköhatoksiini – tootmine. Läkaköha toksiinil on äärmiselt negatiivne mõju hingamisteedele, südame-, immuun- ja närvisüsteemile. Ilmneb väljendunud bronhospasm, vasokonstriktsioon, mis põhjustab vererõhu tõusu, immuunsuse rakuline side on oluliselt pärsitud.

Pärast paljunemistsükli lõppu bordetella hävib ja rakkudest lahkub suur hulk patogeensusfaktoreid. Algab prekonvulsiivne katarraalne periood, mis kestab 10-13 päeva (mida lühem, seda halvem on prognoos). Limaskesta membraan on nekrootiline, hävitatud haavandid võivad ilmuda. Moodustuvad mädase röga pistikud, mis ummistavad bronhide ja alveoolide valendikku, mis võib kaasa aidata nende kokkuvarisemisele.

Bakteriaalsete toksiinide pidev mõju hingamisteede retseptoritele suurendab vagusnärvi erutatavust. Närviimpulsid sisenevad pidevalt medulla piklikusse, mille tulemuseks on hingamiskeskuse ergastuse fookus - domineeriv.

Selle tulemusena muutub köharefleks isemajandavaks ega vaja bakterite osalemist. Köha muutub läkaköhale iseloomulikult spastiliseks ja kramplikuks. See võib ilmneda mis tahes ärritajatest: valu, puudutus jne. Tekib kramplik spasmiline köha periood, mis kestab vaktsineeritutel 1-1,5 nädalat, vaktsineerimata kuni 6 nädalat.

Kuna hingamiskeskuse läheduses on ka palju muid olulisi elutegevuse reguleerimise keskusi, siis nendesse leviv erutus põhjustab oksendamist, vererõhu hüppeid ning näo- ja kehalihaste spasme.

Pärast kramplikku köha algab järkjärguline taastumisperiood, mis kestab olenevalt immuunseisundist ja tüsistustest 2 nädalast 6 kuuni.

Läkaköha toksiinidel on negatiivne mõju soolefloorale ja soolemotoorikale, mis põhjustab düsbakterioosi ja kõhulahtisust. On teada, et läkaköha sekundaarne immuunpuudulikkus on põhjustatud immuunrakkude apoptoosist. See seletab sagedast klamüüdia, mükoplasma kopsupõletiku ja bronhiidi lisamist, bronhide obstruktsiooni arengut.

Läkaköha tekitaja kuulub perekonda Bordetella. Mikrobioloogia uurib mitut tüüpi patogeene, mis ei anna nende arengu ajal ristimmuunsust. Eksperdid isoleerivad Bordetella pertussis liigi tekitaja, mis on võimeline provotseerima läkaköha teket organismis, lisaks eraldatakse parapertussis’e põhjustav Bordetella parapertussis liik. Teadlased teavad nende mikroorganismide kolmandat liiki (Bordetella bronchiseptica), mis provotseerib närilistel bronhopneumoonia arengut. Seda tüüpi patoloogiline mikroorganism on võimeline läkaköha tagajärjel sattuma väliskeskkonda.

Bakterite morfoloogilised ja biokeemilised omadused, kultuuriuuringud

Bordetella pertussis on munajas, ümarate otstega gramnegatiivne bakter. Sellel mikroorganismil ei ole välisstruktuuris vimpude ja eoste kujul moodustisi, ta on võimeline moodustama kapsli.

Mikroorganism on eranditult aeroob. Keskkonna optimaalne temperatuurirežiim mikroorganismi arenguks on 37º C. Bakterid kasvavad väga aeglaselt ja ainult toitekeskkonnas, samas kui bakter moodustab kolooniaid, mis näevad välja nagu elavhõbedatilk. Baktereid iseloomustab R-S transformatsioon. Bakteriorganism on võimeline läbi viima glükoosi ja laktoosi lagundamist happe moodustumiseni, samas kui gaasi sünteesi protsess ei toimu.

Bordetella, olles ranged aerobrid, saab kasvatada järgmistel toitainete söötme:

  • kartuliagar, millele on lisatud 20-25% inimverd;
  • kaseiini agar.

Teiste mikroorganismide esindajate kasvu pärssimiseks valmistatakse penitsilliini lisandid spetsiaalsesse toitainekeskkonda. Läkaköha ja parapertussi mikroorganismid kartuli-glütseriini söötmel, millele on kasvu käigus lisatud inimverd, moodustavad väikseid läikivaid kolooniaid, mille kuju on elavhõbedatilgale lähedane, ning kaseiin-söe söötmel moodustavad bakterid hallikas-kreemikaid kolooniaid.

Mõlemat tüüpi bakteritel on hemolüütilised omadused. B. pertussis on võimeline dissotsieeruma: värskelt saadud bakteriosakesed on S-kujuga (esimene faas, millel on iseloomulikud morfobioloogilised omadused). Teine ja kolmas faas on üleminekuvormid.

Neljandas faasis olevad bakterid klassifitseeritakse R-vormiks, selles faasis on haiguse viimases staadiumis sekreteeritud mikroorganismid. Positiivne diagnoos läkaköha bakteriaalse diagnoosi ajal tehakse ainult siis, kui mikroorganism avastatakse esimeses faasis.

Antigeense struktuuri, patogeensuse, resistentsuse ja epidemioloogia

Bakteriosakestel on keeruline antigeenne struktuur, mikrobioloogia valdkonna spetsialistid eristavad mitmeid perekonnale ühiseid antigeene ja spetsiifilisi antigeene, mis on iseloomulikud teatud tüüpi bakteriosakestele ja tüüpilistele antigeenidele. Bakterid sisaldavad oma koostises bioaktiivseid aineid, mida iseloomustab toksiliste omaduste olemasolu. Peamised sellised ained on:

  • termolabiilne dermonekrootiline aine;
  • termostabiilne aine - endotoksiin;
  • hemaglutiniin;
  • histamiini sensibiliseeriv faktor;
  • kaitsev antigeen;
  • lümfotsütoosi stimuleeriv tegur.

Loe ka: Kuidas ravitakse punetisi lastel?

Lisaks on mikroorganismil O-antigeen, mis on termostabiilne ja perekonnaspetsiifiline, ning 14 pinna termolabiilset kapsli K-antigeeni.

Peamised patogeensed tegurid on:

  • termostabiilne endotoksiin - toksiin, mis võib tekitada palaviku seisundi algust ja progresseerumist;
  • valgu toksiini antifagotsüütilise aktiivsusega, aidates kaasa lümfotsütoosi stimuleerimisele;
  • agressiooniensüümid;
  • ensüümid, mis suurendavad veresoonte läbilaskvust;
  • histamiini sensibiliseerivate omadustega tegurid;
  • epiteelirakkude surma provotseerivad tegurid.

Bakteriosakeste adhesiooniprotsessis osalevad hemaglutiniin ja bakteriosakese välismembraani valgud.

Mikroorganism on keskkonnategurite suhtes väga ebastabiilne.

Desinfitseerimisvahendite mõjul hävib bakter kiiresti.

Läkaköha on antroponootiline infektsioon. Nakkuse allikas on haiged inimesed ja bakterite kandjad.

Inimese nakatumine toimub mikroorganismi tungimisega hingamisteede kaudu õhu kaudu leviva ülekande protsessis.

Kessav köha on üldleviv haigus, haigus on nakkav. Parapertussis on vähem levinud ja on palju kergem.

Haiguse patogenees inimkehas

Läkaköha põhjustajaks on mitteinvasiivne mikroob, see tähendab, et need bakterid ei tungi sihtrakkudesse. Sissepääsu nakkav väravad on hingamisteed. Epiteelikihis adsorbeeritakse adhesiivsete tegurite olemasolu tõttu bordetella epiteelikihi rakkude ripsmete pinnale. See on koht, kus mikroorganismid paljunevad ja toodavad toksiine. Pärast toksiinide ja agressiivsete ensüümide vabanemist algab põletikulise protsessi progresseerumine ja limaskesta turse.

Põletiku ja turse progresseerumise käigus osa epiteelirakke sureb. Haiguse arengu käigus ärritatakse pidevalt hingamissüsteemi ja selle limaskesta närviretseptoreid eralduvate toksiinide poolt, mis kutsub esile köha. Köha arendamisel antakse suur tähtsus toksiinide sensibiliseerivatele omadustele, mis on vabastatud B.PERTUSSISi elu jooksul.

Läkaköha patogeneesi kujunemisel on peamine roll mürgistel ainetel, mis põhjustavad kõri, hingetoru ja bronhide limaskestal paiknevate närvilõpmete pidevat ärritust. See ärritus kutsub läkaköha põdeval inimesel esile köha. Läkaköha toksiini mõjul tekkivad ärritusimpulssid edastatakse kesknärvisüsteemile, mis viib reaktsiooni moodustumiseni kongestiivse fookuse kujul, mis kutsub esile patsiendi köha. Ärritus, mis moodustub toksiinide mõjul ja põhjustab köha, on häire ilmingu peamine märk.

Läkaköhaga nakatumisel läbib patogeen inkubatsiooniperioodi, mis on 3-15 päeva. Haiguse kulgu võib jagada kolmeks perioodiks:

  • katarraalne periood;
  • köha periood;
  • loa periood.

Nende haiguste tekitajad kuuluvad perekonda Bordetella.

1. Bordetella pertussis – läkaköha tekitaja, kirjeldasid Bordet ja Zhangu 1906. aastal.

2. Bordetella parapertussis - parapertussise tekitaja, kirjeldasid Eldering ja Kondrik 1937. aastal.

3. Bordetella bronchiseptica – põhjustab loomadel haigusi. Inimestel põhjustavad need bakterid bronhopneumooniat koos läkaköhaga. Esmakordselt inimestel kirjeldas seda haigust Brown 1926. aastal (harv).

Morfoloogia. Läkaköha bakterid on väikesed munakujulised pulgad, 0,3–0,5 × 1–1,5 µm. Para-läkaköha tekitaja on veidi suurem. Mõlemad mikroobid ei oma eoseid ja on liikumatud. Spetsiaalse värvimisega on kapsel nähtav. Gramnegatiivne. Intensiivsemalt värvitud poolakad.

Ultralõiked näitavad nukliidis kapslitaolist kesta, valuutaterasid ja vakuoole.

kasvatamine. Läkaköha ja parapertussise tekitajad on aeroobid. Tolerantne toitainekeskkonna suhtes. Nende kasvatamise jaoks kasutatakse Borde-Zhang Medium (glütseriinkartuliga verega). Praegu kasutatakse AMC söödet (kaseiin-söeagar) - see on poolsünteetiline ilma vereta sööde. Aminohapete allikaks on siin kaseiinhüdrolüsaat. AMC keskkond erineb Bordet-Zhangu keskkonnast lihtsama ja soodsama tootmismeetodi poolest.

Võõrfloora kasvu pärssimiseks lisatakse söötmele penitsilliini 0,25–0,5 ME 1 ml söötme kohta või metitsilliini – 2,5–4 μg 1 ml kohta. Penitsilliini saab rakendada kandja pinnale plaatidel.

Külvale kandjat inkubeeritakse termostaadis temperatuuril 35-36 ° C, pH 6,8-7,4. Kultuurid peavad olema kaitstud kuivatamise eest; sest vesi veega paigutatakse termostaadiga.

B. Pertussis kolooniad ilmuvad 48-72 tunni pärast ja B. parapentssis - 24-48 tunni pärast.

AMC söötmel on B. pertussise kolooniad väikesed, läbimõõduga 1-2 mm, B. parapertussise kolooniad on mõnevõrra suuremad. Mõlema mikroobi kolooniad on läikivad, hallikas-kreemika värvusega (kaseiin-söeagaril meenutavad elavhõbedapiiskasid). Kolooniate eemaldamisel jääb viskoosne kreemjas jälg. Stereoskoopilise mikroskoobiga kolooniaid uurides on nähtav valguskoonus (kolooniad heidavad varju). Valgusallika (lambipirni) asukoha muutumisel muudab asendit vari Valguskoonuse (saba) olemasolu on diagnostilise väärtusega.

B. parapertussis moodustab ensüümi türosinaasi, seetõttu türosiini sisaldavas söötmes see lõhustub ja sööde muutub pruuniks. Keskmise värvi muutus on diferentsiaalne diagnostiline märk.

Vedelates keskmistes söötmes, läkaköha ja paramerskessi bakterid moodustavad ühtse hägususe ja alumise sette. Verega agaril annavad nad hemolüüsi tsooni.

Värskelt isoleeritud kultuuridel on kõige sagedamini sujuv s-kuju (I faas). Ebasoodsates tingimustes või haiguse hilises staadiumis võetud materjalis kasvatamisel võivad ilmneda dissotsieerunud vormid (II-IV faasid).

Ensümaatilised omadused. Läkaköha patogeenid ei lagunda süsivesikuid ega käärita valke. Parapendursi bakterid tekitavad ensüüme ureaasi ja türosinaasi.

Läkaköha ja parapertussise bakterid toodavad patogeenseid ensüüme: hüaluronidaasi, plasmakoagulaasi ja letsitinaasi.

toksiinide moodustumine. Loomkatsetes tuvastati läkaköhabatsillis nelja tüüpi valgutoksiini: 1) termolabiilne dermonekrootiline toksiin; 2) termostabiilne endotoksiin; 3) leukotsütoosi stimuleeriv faktor (stimuleeriv leukotsütoos); Selle parenteraalne manustamine põhjustas eksperimentaalsete loomade surma; 4) histamiini sensibiliseeriv faktor – hiirtele manustamisel suurenes nende tundlikkus histamiini suhtes.

Kaks esimest toksiini tüüpi on iseloomulikud ka parapektorsi põhjustajale.

Antigeenne struktuur. Perekonna Bordetella bakteritel on keeruline antirenaalne struktuur. Laboratoorse diagnoosi kõige olulisemad antigeenid on aglutinogeensed. Üldine aglutinogeen on 7. Liigispetsiifiline aglutinogeen läkaköha bordetella puhul on 1, parapertussis bordetella puhul - 14, bronhoseptilise bordetella puhul - 12.

Liikide eristamiseks kasutatakse monospetsiifilisi seerumeid 1, 14, 12 (seerumeid toodab N. F. Gamaleya Epidemioloogia ja Mikrobioloogia Instituut).

Lisaks liigispetsiifilistele antigeenidele on Bordetella esindajatel ka teisi aglutinogeene, mille erinev kombinatsioon määrab serovari (tabel 48.).

Vastavalt kolme peamise aglutinogeeni 1,2,3 kombinatsioonile, mis määratakse aglutinatsioonireaktsioonis monospetsiifiliste seerumitega, eristab B. pertussis kolme serovari: 1,2,3; 1,2,0; 1,0,3.

Keskkonnakindlus. Läkaköha ja parapertussise tekitajad ei ole kuigi vastupidavad. Temperatuuril 56 ° C surevad nad 20-30 minutiga. Ka madalad temperatuurid mõjuvad neile halvasti. Otsene päikesevalgus tapab nad 1-2 tunniga; UV-kiired - mõne minuti pärast. Kuivas rögas püsivad need bakterid mitu tundi. Tavalised desinfitseerimislahused hävitavad need kiiresti.

Mõlemat tüüpi mikroobid ei ole väga tundlikud antibiootikumide suhtes, nad ei ole tundlikud penitsilliini suhtes.

Loomade vastuvõtlikkus. Looduslikes tingimustes ei ole loomad selle perekonna patogeenide suhtes vastuvõtlikud. Katsetingimustes on võimalik ahvidel ja noortel koertel paljuneda läkaköha ning põhjustada hiirte surma.

Nakkuse allikad. Haige mees. Katarraalse perioodi patsiendid on eriti nakkavad.

Edastamise marsruudid. Lennumarsruut. Erinevate objektide roll on ebatõenäoline läkaköhabakterite ebastabiilsuse tõttu väliskeskkonnas.

Patogenees. Läkaköha ja parapertussise tekitajad põhjustavad ägedat haigust, millega kaasneb kramplik köha. Sattunud ülemiste hingamisteede limaskestale paljunevad seal bakterid ja hävivad osaliselt. Vabanenud toksiin mõjub kesknärvisüsteemile, ärritab ülemiste hingamisteede limaskesta närviretseptoreid, mis aktiveerib köharefleksi. Selle tulemusena tekivad krambihoogud köha. Haiguse protsessis täheldatakse mitmeid perioode: katarraalne, spasmiline köha ja protsessi taandumine.

Immuunsus. Pärast haigust tekib stabiilne immuunsus, mille määravad humoraalsed ja rakulised tegurid.

Ärahoidmine. Patsientide tuvastamine ja isoleerimine. Nõrgenenud lastele, kes on kokku puutunud haige läkaköhaga, antakse immunoglobuliini. Spetsiifilise ennetuse peamised meetmed on laste immuniseerimine DTP-ga (läkaköha-difteeria-teetanuse vaktsiin). Vaktsiini manustatakse kolm korda kuni 6 kuud, millele järgneb revaktsineerimine.

Ravi. Haiguse varases staadiumis kasutatakse läkaköhavastast immunoglobuliini. Ravi toimub erütromütsiini ja ampitsilliiniga.

testi küsimused

1. Kirjeldage morfoloogilisi omadusi põhjusliku suhkru ja parapermassis.

2. Millistel söötmetel ja milline on läkaköha ja parapertussi mikroobide kasvu iseloom?

3. Läkaköha ja parapertussise patogeenide püsivus väliskeskkonnas.

4. Pertusside ja paraprussia patogeenide diferentsiaalmärgid.

5. Nakkuse allikad, levikuteed, läkaköha patogenees.

Mikrobioloogilised uuringud

Uuringu eesmärk: patogeeni tuvastamine ja läkaköha patogeenide eristamine parapertussist.

Uurimismaterjal

Ninaneelu eemaldatav limaskest.

Peamine uurimismeetod

Mikrobioloogiline

Teadustöö edenemine

Teine - kolmas õppepäev

Põllukultuurid eemaldatakse termostaadist ja vaadatakse suurendusklaasi või stereoskoopilise binokulaarse mikroskoobi abil. Kahtlaste kolooniate olemasolul eraldatakse need AMC jaoks: sektoriteks jagatud Petri tassides või katseklaasides. Põllukultuurid asetatakse termostaadi. Kui kolooniaid on palju, võib mõnest neist teha määrdeid, värvida ja vaadata mikroskoobi all. Väikeste gramnegatiivsete varraste olemasolul viiakse läbi testaglutinatsioonireaktsioon monospetsiifilise geneerilise seerumiga 7. Positiivne aglutinatsioonireaktsioon näitab, et isoleeritud kultuur kuulub perekonda Bordetella. Bordetella tüübi määramiseks viiakse läbi aglutinatsioonireaktsioon monospetsiifiliste liikide seerumitega 1 ja 14. Reaktsioonid asetatakse slaidile. Aglutinatsioonitesti positiivne tulemus võimaldab anda esialgse vastuse.

Uurimistöö neljas päev

Põllukultuurid eemaldatakse termostaadist ja vaadatakse: esmalt palja silmaga, pöörates tähelepanu söötme värvusele (kui esineb pruuni värvi määrdumine), seejärel uuritakse kasvu stereoskoopilise mikroskoobi abil.

Kahtlaste kolooniate olemasolul tehakse isoleeritud kultuurist määrded, värvitakse Grami järgi ja uuritakse mikroskoobi all. Seejärel tehakse jällegi (puhaskultuurist) klaasil aglutinatsioonireaktsioon monospetsiifiliste seerumitega 1,2,3 ja 14. Aglutinatsiooni tulemused võimaldavad eristada B. pertussist B. parapertussisest ja kui see on B. pertussis , seejärel määrake serovar: 1- serovar 2 - (1,2,3), serovar 2 - (1,2,0), serovar 3 - (1,0,3). Serovari määramisel on epidemioloogiline tähtsus.

Eraldatud kultuuri lõplikuks identifitseerimiseks (positiivse aglutinatsiooniga monospetsiifiliste seerumitega) pannakse proov ureaasi olemasolu tuvastamiseks ja inokuleeritakse 0,1% türosiini sisaldavale kaldus agarile (vt joonis 49).

Ureaasi test. Väikesesse katseklaasi valatakse 0,3-0,4 ml 2% uurea lahust, sisestatakse kultiveerimissilmus ja lisatakse 2-3 tilka fenoolftaleiini. Toru loksutatakse ja asetatakse termostaadi. Arvestada reaktsiooniga 2 ja 24 tunni möödudes Läkaköhabakterid ei muuda söötme värvi. Parapertussis bakteritel on ensüüm ureaas, mis lagundab karbamiidi, moodustades ammoniaagi. Ammoniaak muudab indikaatorit ja keskkond muutub punaseks.

Katse türosiiniga. Katseklaasides 0,1% türosiiniga kaldus MPA-le inokuleeritakse isoleeritud kultuur ja asetatakse termostaati. Järgmisel päeval võtke toru termostaadist välja ja kontrollige seda. Kasvu olemasolu katseklaasis ja söötme pruun värvus viitavad parapertussise patogeenide kasvule. Läkaköha patogeenid sellel söötmel ei kasva.

Uurimistöö viies päev

Kahtlaste kolooniate puudumisel andke eitav vastus.

Kiirendatud diagnostika

Bakterioloogilise uurimismeetodiga saab vastuse 3-4 päevaga.

1. Immunoluminestsentsmeetodi kasutamine võimaldab anda vastuse paar tundi pärast materjali võtmist, tuvastades mikroobid vahetult tampooniproovidest.

2. AMC söötmel olevatest põllukultuuridest võib nähtava kasvu puudumisel teha määrdejälje: selleks puudutatakse külvikohale steriilset kummikorki ja jäljend kantakse slaidile. Jälje määrdumist uuritakse immunofluorestsentsi abil. Määrides leitakse baktereid B. pertussis või B. parapertussis.

testi küsimused

1. Mis on materjal läkaköha kahtluse korral uurimiseks?

2. Milliseid materjali kogumise meetodeid kasutatakse haigustekitaja tuvastamiseks läkaköha kahtluse korral?

3. Mida lisatakse söötmele võõra mikrofloora kasvu mahasurumiseks?

1. Võtke 10 tassi AMC söödet, viaal penitsilliiniga, mis sisaldab 300 000 ühikut. Lahjendage penitsilliinist nii, et 0,1 ml sisaldab 7,5 ühikut. Arvutage söötme koguhulk.

2. Koguge üksteiselt ninaneelueritust ja inokuleerige AMC söötmele.

3. Võtke õpetaja käest nõu läkaköha või parapertussis bakterite külviga, uurige stereoskoopilise mikroskoobi abil kolooniate olemust. Kahtlased kolooniad külvavad AMC söötme sektorile (puhaskultuuri isoleerimine).

4. Võtke õpetajalt AMC söötme sektoril kasvatatud läkaköha või parapertussise patogeenide puhaskultuur ja tehke aglutinatsioonitest diagnostilise läkaköhaseerumiga.

Positiivse aglutinatsioonitesti olemasolul tehke ureaasi test ja inokuleerige türosiiniga söötmele (0,1%).

Toiteainekeskkond

AMC. Kolmapäev, mille koostas Epidemioloogia ja Mikrobioloogia Instituut. N. F. Gamaleja. AMC valmis keskkond on must, kondensaadivesi ei tohi sisaldada süsinikuosakesi. Valmis kujul võib söödet säilitada pikka aega (kuni kuu või kauem), kaitstes seda kuivamise eest.

Läkaköha, mis on haigused, mis tekivad ägedalt ja koos hingamisteede põletikuga. Kaasas tugev ja püsiv köha. Esineb sagedamini lastel. Haigustekitaja kuulub perekonda Pertusiss. Tänaseks vaktsineeritakse läkaköha vastu vaktsineerimiskava järgi. Tänu sellele moodustub immuunsus, läkaköha on väga raske haigestuda.

Patogeeni üldised omadused

Läkaköha on gramnegatiivne kepp. Läkaköha põhjustavad bakterid, mitte viirused. See tähendab, et selle rakkude struktuuris on teatud erinevusi. Sellel on rakus vähem lipiidide kihte. Läkaköha tekitaja avastati juba ammu. Esmalt tuvastati see lapse ülemiste hingamisteede määrdumise mikroskoopilise uurimisega. See kepp on liikumisvõimetu, kuna sellel puuduvad vastavad lipikud. Tema jaoks ebasoodsates tingimustes vaidlust ei teki. See tähendab, et see on kergesti ravitav eristatavate ravimitega.

Erguti omadused

Läkaköha mikrobioloogia põhineb selle omadustel vastavalt kultiveerimistingimustele ja biokeemilistele parameetritele. Läkaköha tekitaja on range aeroob. See tähendab et ta elab ainult normaalse hapnikusisaldusega tingimustes. Ilma selle gaasita ei suuda patogeen ellu jääda. Ta sureb. Selle tuvastamiseks kasutatakse bakterioloogilisi uuringuid. See seisneb nina ja neelu eritumise istutamises spetsiaalsele söötmele. Need sisaldavad neid aineid, milles see pulk kasvab. Arendamiseks hoitakse teatud temperatuuri. Läkaköha puhul on see 37. Terav kõikumine võib lõppeda surmaga. Söötmel kasvab patogeen ümarate laikudena (või teisisõnu elavhõbedatilkadega sarnaste kolooniatena).

Patogeeni tuvastamine on võimalik ainult s-vormis.

See tähendab, et Bortodella perekonnas on liik pertusiss võimeline transformeeruma. Näiteks mis tahes ravimite võtmine või arenguks ebasoodsate tingimuste loomine võib põhjustada aktiivse vormi passiivseks muutumist. Seega ootab patogeen need tingimused ära. Uue soodsa keskkonna kujunemisega muundub see tagasi ja jätkab oma tsüklit.

Igal mikroorganismil on selle iseloomustamiseks patogeensusfaktorid ja antigeenne struktuur.

Virulentsuse tegurid

Need on tegurid, mis tagavad mikroobide paljunemise inimkehas. See tähendab, et ilma nendeta ei suuda mikroorganism inimest mõjutada ega areneda. Tavaliselt on nendeks teguriteks toksiinid, mis tekivad siis, kui teatud annus patogeeni satub organismi. Need moodustavad sümptomite arengu. Näiteks läkaköha puhul on murettekitavad järgmised sümptomid:

  • pikaajalised köhahood;
  • nohu ja palavik;
  • temperatuur on madal.

Peamine sümptom on spasmiline köha. Selle kordade arv päevas võib ulatuda 30-40 korda. See kliinik on tingitud just mikroorganismi patogeensusteguritest. Läkaköha korral hõlmavad need järgmist:

  1. Endotoksiin. See tähendab, et patogeeni sattumisel kehasse eraldub endotoksiin, mis temperatuuri ilmnemisel ei hävine. Seda nimetatakse ka termostabiilseks. See põhjustab palavikku. Temperatuuri raskusaste sõltub selle kogusest.
  2. Ensüümid. Need ained mõjutavad veresoonte seinu. Selle läbilaskvus suureneb ning tekivad köha ja nohu.
  3. Erinevate seadmete pinnal moodustised tugevaks limaskestale kinnitumiseks.

Läkaköha kliinik sõltub otseselt annuse suurusest ja inimese immuunsusest.

Antigeenid

Need on ained mikroobirakus, mis mõjutavad antikehade teket inimkehas. Miks on neid vaja teada? Neid teadmisi kasutatakse seroloogiliseks diagnoosimiseks. See tähendab, et antikehade taseme määramine. Viimased tekivad organismis võõrkehade tungimisel. Pole tähtis, milline aine see on - viiruslik või bakteriaalne. Antikehad pakuvad kehale kaitset. Seetõttu tekivad läkaköha korral inimestel selle antigeenide vastu antikehad. Toimub mikroobi sidumine ja eemaldamine kehast. Kogu probleem on selles, et esimesel kontaktil tekivad need liiga kauaks.. Selleks on vaktsiin. nende antikehade tootmiseks. Ja patogeeniga kohtudes ei saa haigus lihtsalt areneda, kuna antikehad on juba olemas ja need neutraliseerivad läkaköha. Bordetellast eraldatakse somaatilised ja flagellaarsed antigeenid.

Stabiilsus väliskeskkonnas

Eripäraks on madal stabiilsus väliskeskkonnas. Kuna mikroob sureb hapniku puudumisel, on anaeroobsete tingimuste loomine tegur, mis vähendab bordetella arvukust. Samuti ei ole see võlukepp erinevate desinfektsioonivahendite toimele üldse vastupidav. Sureb temperatuuril alla ja üle 37 kraadi. Keetmisel ja külmutamisel sureb koheselt.

Samuti sureb see ultraviolettkiirguse mõjul.

Patogeeni epidemioloogia lühikirjeldus

Läkaköha põhjustajat iseloomustab peamiselt laste kaotus. Põhjuseks on lasteaedade ülerahvastatus ja vaktsineerimiste puudumine. See edastatakse ainult inimeselt inimesele. Kuna sellel on seadmed hingamisteede limaskestale kinnitamiseks. Inimestel on omakorda läkaköha jaoks spetsiaalsed retseptorid. See on tingitud ainult inimkeha lüüasaamisest. Kuna läkaköha on antroponoos, on selle allikaks ainult inimene. See edastatakse aerosooliga. See tähendab, et köhimisel või aevastamisel läbi õhu. Seda ei edastata kontakti kaudu või väga harvadel juhtudel, kui nad kasutavad ainult söögiriistu. Ja see peaks juhtuma samal ajal.

Läkaköha on väga nakkav. Esineb kogu keskkonnas. See on läkaköha vastu vaktsineerimata jätmise oht. Kasutage DTP-d. Just selle vaktsiini läkaköha komponent võib põhjustada allergilisi reaktsioone. Selle põhjuseks on selle kõrged patogeensed omadused, mida mainiti eespool. Läkaköha esineb haiguspuhangutena. Kui perekonnas haigestub immuunsuse puudumisel üks inimene, haigestuvad kõik pereliikmed. Läkaköhal on inimorganismile teatud tagajärjed.

Immuunsus pärast haigust moodustub kogu eluks. See tähendab, et hilisemad kontaktid ei anna haiguse arengut.

Ärahoidmine

Patogeeni peamistest morfoloogilistest omadustest, selle struktuurist ja patogeensusteguritest lähtuvalt on välja töötatud ennetusmeetmed. Nagu ikka, koosnevad need isiklikust ennetusest ja vaktsiinide kasutuselevõtust. Teades patogeeni keskkonnas püsivuse põhiomadusi, moodustavad need isikliku hügieeni põhireeglid:

  • ruumide märgpuhastus;
  • kasutades tõestatud desinfektsioonivahendeid;
  • kui ilmnevad esimesed sümptomid köha kujul, mis ei kao pikka aega, pöörduge viivitamatult spetsialisti poole.

Vaktsineerimisel on juhtiv roll läkaköha vormis epideemia tekke ärahoidmisel. Sel eesmärgil kasutatakse kombineeritud DTP vaktsiini.. Tänu sellele sünteesitakse inimkehas kaitsvaid antikehi. See tähendab, et mikroversioonis on simuleeritud nakkusprotsess, mis kulgeb väga kergel ja silmapaistmatul kujul, mis võimaldab vältida läkaköha korral elanikkonna surmajuhtumeid.

Läkaköha on antroponootiline infektsioon, mis kandub inimeselt inimesele. Ülaltoodud omaduste tõttu on patogeenil kehale väljendunud patogeenne toime. Vaktsineerimata jätmise tagajärjed võivad olla isegi surmavad.

Läkaköha tekitajaks on üksikult või paarikaupa paiknev väike coccobacterium. Nad on liikumatud, ei moodusta eoseid, neil on kapsel, joovad. Gramnegatiivne. Kemoorganotroofid, ainult oksüdatiivne metabolism, ranged aeroobid. Läkaköha tekitaja ei kasva lihtsal toitainekeskkonnal. Teatud aminohapped on vajalikud kasvufaktoritena. Lihtsatel toitainetel kasvu pärsivad tekkivad rasvhapped. Nende neutraliseerimiseks kasutatakse verd, sütt või ioonivahetusvaikusid. Patogeeni kasvatatakse kartuli-glütserooli agaril vere lisamisega (Borde-Gangu sööde), vereagaril ja poolsünteetilisel kaseiin-söe agaril ilma verd lisamata. Läkaköhabakterite kolooniad on väikesed, ümmargused, siledate servadega, läikivad, meenutavad elavhõbeda- või pärliterakesi. Värskelt eraldatud kultuurid moodustavad kolooniate S-vormi (faas 1), edasise kultiveerimisega võivad nad moodustada R-vorme (2. faas). Veresöötmel moodustavad nad hemolüüsi tsooni. B.pertussis on ensümaatiliselt inaktiivne, ei lagunda suhkruid, ei oma proteolüütilist aktiivsust ja ei taasta nitraate.

Antigeenid

Perekonna Bordetella bakterite antigeenne struktuur on üsna keeruline. Nad paljastasid 14 antigeenset komponenti ehk aglutinogeeni. Üldine aglutinogeen on 7. Liigispetsiifiline aglutinogeen läkaköha korral on aglutinogeen 1, B. parapertussise puhul - 14, B. bronchiseptica puhul - 12. Lisaks aglutinogeenile 1 on B. pertussis'el teisi aglutinogeene, millest 2 ja 3 Neid aglutinogeene eritavad 4 serovari.

Patogeensus ja patogenees

Virulentsustegurid hõlmavad patogeeni võimet kleepuda hingamisteede epiteelirakkude pilude tõttu. Filamentne hemaglutiniin on seotud piliga, mis liimib B. pertussis'e teiste bakteritega, moodustades erinevatest mikroobidest koosnevaid biokilesid. Moodustab valgutoksiine, mis on tugevalt seotud tsütoplasmaga: hingetoru toksiin (funktsionaalne blokaator), mis põhjustab hingamisteede limaskesta närviretseptorite ärritust, mis põhjustab köhahood. Toksineemia põhjustab väikeste bronhide veresoonte spasme, konvulsiivseid tõmblusi, mis on tingitud selle mõjust hingamisteede ja veresoonte keskustele; lisaks aktiveerib toksiin adenülaattsüklaasi süsteemi ja cAMP akumuleerumist, mis põhjustab vee-soola metabolismi häireid; dermonekrotoksiin, mis mõjub ATPaasi aktiivsuse tõttu müokardi rakkudele. Märgitakse nende toksiinide histamiini sensibiliseerivat ja leukotsütoosi stimuleerivat toimet B. pertussis'e võimet tungida epiteliotsüütidesse, kus nad püsivad pikka aega, samuti mittetäielikku fagotsütoosi, mis on tingitud nende ellujäämisest makrofaagides. Kapselpolüsahhariid kaitseb baktereid fagotsütoosi eest. Kõik patogeensust kontrollivad geenid sisalduvad ühes operonis. Patogeeni toksiline toime põhjustab hingamisteede limaskesta närviretseptorite ärritust, köhimist ja erutab hingamiskeskust, mille tagajärjeks on väikeste bronhide spasm.

Immuunsus

Läkaköha korral tekib humoraalne immuunvastus, millega kaasneb intensiivne humoraalne immuunsus. Relapsi ei täheldatud.

Ökoloogia ja epidemioloogia

Läkaköha ja parapertussis bordetella on ülemiste hingamisteede asukad. B. bronchiseptica elab koerte ja teiste loomade hingamisteedes. Nakkuse allikaks on haiged lapsed ja bakterikandjad. Bordetella sureb kiiresti õhus. Nakatumine toimub õhus olevate tilkade kaudu otsesel kokkupuutel haige lapse või kandjaga.

Läkaköha ja parapertussis

Läkaköha(läkaköha) on Bordetella pertussise põhjustatud äge, valdavalt lapsepõlves esinev nakkushaigus, mida iseloomustavad õhu kaudu leviv ülekandemehhanism, hingamisteede katarraalne põletik ja spasmilised köhahood koos vastumeetmetega. Bordetella parapertussis ja Bordetella bronchiseptica põhjustavad sarnast, kuid kerget läkaköha. Kõik kolm bordetella tüüpi on üksteisega sarnased ja kuuluvad samasse perekonda. Need on väikesed gramnegatiivsed munakujulised pulgad, sageli määrdunud bipolaarsed Patogeenid erituvad koos lima ja rögaga peamiselt katarraalsel ja harvem spasmilisel perioodil. Kustutatud ja ebatüüpiliste vormide olemasolu, sümptomite sarnasuse tõttu on nende diagnoosimisel üliolulised laboratoorsed uurimismeetodid. Mikrobioloogiline analüüs viiakse läbi üheaegselt kõigi kolme patogeeni eraldamiseks.

Testmaterjali võtmine

Lima neelu tagumisest neelupiirkonnast võetakse steriilse neelu tagumise vatitikuga, eelistatavalt köhahoo ajal koos spaatliga. Kasutades tampoone õhukesele (nt nikroom) Drotinzale, võib materjali võtta ka alumiste ninakäikude kaudu Koheseks pookimiseks kasutatakse kuivtampooni. Kui see pole võimalik, niisutatakse tampooni eelnevalt kaltsiumalginaadi lahusega või isotoonilise naatriumkloriidi lahusega, kuna vatt pärsib Bordetella pertussise kasvu. Võetud materjal tuleb toimetada laborisse 2-4 tunni jooksul, kaitstuna alajahtumise eest.Veel parem on materjal patsiendilt ära võtta "köhaplaatide" abil. Selleks tuleb köha ajal avada Petri tass toitainekeskkonnaga ja hoida seda 4-8 cm kaugusel patsiendi suu ja nina ees 6-8 köhašokki.tsoonid Laboratoorse diagnostika peamised meetodid läkaköha puhul on bakterioloogilised ja seroloogilised. Ekspressdiagnostika jaoks, eriti haiguse varases staadiumis, kasutatakse immunofluorestsentsreaktsiooni. Selleks töödeldakse uuritava materjali määrdeid spetsiaalsete fluorestseeruvate seerumitega ja uuritakse fluorestsentsmikroskoobi all. Mõelge 50 vaateväljale. Positiivseks tulemuseks loetakse, kui vaateväljas tuvastatakse 2-3 helendavat bakterirakku.

Bakterioloogiline uuring

Patogeeni isoleerimiseks kasutatakse selliseid traditsioonilisi söötmeid: kartuli-glütserooli agarit küülikuverega (Borde-Jangu), kaubanduslikku selektiivset süsinikuagarit (CVA) või piimavere agarit. Hingamisteede grampositiivse mikrofloora kasvu pärssimiseks soovitatakse söötmele lisada penitsilliini. "Köhaplaatide" meetodil külvamisel kantakse agari pinnale antibiootikumi mahus OD ml (10 RÜ) ja hõõrutakse spaatliga ühtlaselt. Tampooniga külvamisel tehke esmalt tõmme keskraja kujul ja seejärel silmusega löökidega risti läbi selle. Patogeeni isoleerimise sageduse suurendamiseks külvatakse samaaegselt 2 tassi (üks ilma penitsilliinita). Kultiveerimine toimub kolm kuni viis päeva temperatuuril 37 ° C. Söötmel olevaid kolooniaid uuritakse stereoskoopilise mikroskoobi või suurendusklaasiga. Need on väikesed, kumerad, läikivad, hallika värvusega, meenutavad elavhõbeda- või pärlmutrist. Bordet-Gangu söötmel tekib kolooniate ümber väike hemolüüsi tsoon. Bordetella parapertussise kolooniad on mõnevõrra suured pruunid. Kas määrded tehakse tüüpilistest kolooniatest? Grami peits ja mikroskoop. Samal ajal pane klaasile aglutinatsioonireaktsioon läkaköha ja parapertussise seerumiga lahjenduses 1:10. Positiivse tulemusega eraldatakse bordetella puhaskultuur ja see tuvastatakse mitmete tunnuste järgi.Bordetella ei käärita süsivesikuid, ei moodusta indooli, ainult Bordetella bronchiseptica taastab nitraate. Identifitseerimisel on esmatähtsad kasvuomadused ja aglutinatsioonireaktsioonid adsorbeerimata ja võimalusel antigeenidele 1, 12, 14 adsorbeeritud monoretseptori seerumitega.

Seroloogiline uuring

Seroloogiline uuring viiakse läbi peamiselt retrospektiivseks diagnoosimiseks või juhtudel, kui bordetella kultuuri ei eraldata. Patogeenide vastased antikehad tekivad kolmandal haigusnädalal ja hiljem. Nende tuvastamiseks kasutatakse aglutinatsioonireaktsioone, komplemendi sidumist ja eriti kaudset hemaglutinatsiooni. Seoses laste massilise läkaköhavastase vaktsineerimisega tuleb kõik seroloogilised reaktsioonid läbi viia paariseerumi meetodil. Diagnoosi kinnitab ainult antikehade tiitri 4-kordne tõus aja jooksul. Esimese kahe eluaasta lastel on seroloogilised reaktsioonid sageli negatiivsed.

Allergilised testid

Massi epidemioloogiliste uuringute käigus tehakse sagedamini allergiateste 0,1 ml aglutinogeeni (10 RÜ) intradermaalse süstimisega.

Ennetamine ja ravi

Vaktsinaalseks profülaktikaks kasutatakse DPT (adsorbed pertussis-diphtheria-teetanus) trivaktsiini, mis sisaldab tapetud läkaköha baktereid 1. faasis (S-vorm). Raviks kasutatakse läkaköhavastast immunoglobuliini ja antibiootikume: tetratsükliine, makroliide (erütromütsiini).