Анализ крови на напряженность иммунитета является одним из эффективных показателей при диагностике заболеваний, связанных с нарушением иммунитета. Состояние, когда значительно ослаблен иммунитет, называют иммунодефицитом. Такое состояние может быть первичным, то есть врожденным, и вторичным. Первичный иммунодефицит появляется по причине наличия генетического дефекта при развитии иммунной системы. В большинстве случаев его определяют достаточно быстро. Дети со слабым от рождения иммунитетом обычно не живут дольше 6 лет.
Вторичный иммунодефицит – следствие негативных изменений в нормальной от рождения иммунной системе. Причина ослабления иммунитета может заключаться в неполноценном питании, если человек не употребляет продукты, важные для нормального функционирования организма, иммуноглобулину не из чего будет формироваться. Эта причина наиболее часто обнаруживается у вегетарианцев и детей.
Выявить изменения в иммунной системе можно, сделав анализ крови на напряженность иммунитета. Заболевания печени – самая частая причина развития иммунодефицита у взрослых. Именно в печени формируются антитела с названием «иммуноглобулины». Например, при поражении печени из-за употребления алкоголя или при вирусном гепатите данная функция осуществляется с нарушениями.
Когда нужно проверять состояние иммунитета?
Иммунодефицит всегда проявляется каким-либо образом. Если человек очень часто болеет ОРВИ, которые нередко протекают с осложнениями, или у него слишком часто обостряется герпес, формируются фурункулы, слизистые поражаются молочницей, стоит проверить состояние иммунной системы. О снижении иммунитета могут свидетельствовать и венерические заболевания, которые трудно лечатся. Чтобы понять, в каком состоянии находится иммунитет, нужно обратиться к иммунологу и пройти обследование.
Для исследования иммунитета применяется иммунограмма. Это анализ, отображающий то состояние, в котором пребывает иммунная система человека.
В настоящее время данная система человеческого организма изучена недостаточно, известно, что она выполняет такую важную задачу, как устранение агентов, проникших в организм (химические вещества, бактерии, вирусы).
Выделяют два вида иммунитета, которые считаются основными:
- гуморальный, реагирующий на проникновение чужеродных организмов, уничтожение которых осуществляется специальными белками – иммуноглобулинами;
- клеточный, обеспечивающий защиту организма лейкоцитами.
Прежде чем проверять напряженность иммунитета, необходимо изучить возможности, предоставленные иммунограммой. Показатели, полученные в результате проведения такого анализа, позволяют диагностировать оба иммунитета.
Вернуться к оглавлению
Что такое иммунограмма?
Анализ, с помощью которого осуществляется проверка на напряженность иммунитета, предоставляет возможность оценить количество лейкоцитов, как общее, так и по подвидам (лимфоциты, гранулоциты, моноциты). Учитываются и отдельные субпопуляции лимфоцитов, такие как CD-клетки.
Иммунограмма – метод определения фагоцитарной активности лейкоцитов.
Под такой активностью понимают способность защитных клеток (лимфоцитов) уничтожать бактерии. Взятый биоматериал исследуют с целью получения информации о числе иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов.
Кровь берут на напряженность иммунитета в определенных случаях. Иммунограмму проводят при выявлении следующих состояний:
- инфекций, протекающих с рецидивами;
- онкологии;
- аутоиммунных заболеваний;
- болезней аллергического характера;
- заболеваний, которые характеризуются как затяжные и имеют хроническую форму;
- подозрения на наличие СПИДА.
Необходимость в ее проведении существует в период исследования пациентов, которые пережили пересадку органа, и которым предстоит эта операция. Данная процедура также требуется для контроля состояния человека во время приема цитостатитков, иммуномодуляторов, иммунодепрессантов. Процесс определения иммунного статуса состоит из двух этапов. Сначала делаются общий анализ крови, общеклинические анализы, которые при посещении врача назначаются всем, независимо от их проблемы.
При обнаружении половой инфекции иммунограмма не относится к обязательным процедурам, т. к. эти пациенты обычно не имеют нарушений в работе иммунной системы. Половой инфекцией может заразиться абсолютно здоровый человек. Но некоторые врачи считают, что проверка защитных сил организма – основа для составления правильной схемы лечения.
Вернуться к оглавлению
Кому стоит пройти исследование, как оно проводится?
Анализ на напряженность иммунитета назначают людям, подверженным простудным заболеваниям, в тех случаях, когда присутствуют высокая частота их появления и длительное течение. После обнаружения уровня, где случилось нарушение, назначается грамотная коррекция того состояния, в котором находится пациент, направленная на укрепление здоровья и повышение качества жизни.
Материал для исследования – кровь, взятая из вены. Ее забор предусматривает отказ от курения, исключение сильных нагрузок и тренировок за день до процедуры. Перед сдачей анализа не едят, его сдают утром при условии, что после последнего приема пищи прошло более восьми часов. Запрещено даже пить не только чай или кофе, но и обычную воду.
Ребенку иммунитет проверяют только, если для этого существуют соответствующие показания. Не следует забывать, что иммунная система формируется не сразу, ее завершение происходит в пять лет.
Пациенты с хроническими заболеваниями проходят более тщательное исследование, требующее большего количества времени. В ходе его проведения отображаются определенные параметры иммунитета. В таком исследовании есть необходимость при часто повторяющейся пневмонии, синусите и бронхите. Гнойничковые кожные заболевания и инфекции, вызванные грибками, тоже являются показаниями для выполнения процедуры.
Иммунограмма может отображать показатели, свидетельствующие об определенных отклонениях. У детей раннего возраста такие изменения не считаются патологией. Часто появляющиеся инфекции, вызванные вирусами, для ребенка являются больше нормой, чем патологией. Ведь организм сначала должен узнать вирусы, научиться бороться с ними. И вмешиваться в работу иммунной системы в таких ситуациях не стоит, поскольку можно нанести вред здоровью.
Результаты анализа оценивает специалист. Иммунолог обладает знаниями, которые позволяют ему правильно интерпретировать данные, полученные на основании взятого для исследования материала. Цифровые значения он оценивает с учетом общего состояния здоровья пациента и присутствующей клинической картины.
3.1. ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ
ОРГАНИЗАЦИЯ И ПРОВЕДЕНИЕ СЕРОЛОГИЧЕСКОГО
МОНИТОРИНГА СОСТОЯНИЯ КОЛЛЕКТИВНОГО
ИММУНИТЕТА ПРОТИВ УПРАВЛЯЕМЫХ ИНФЕКЦИЙ
(ДИФТЕРИЯ, СТОЛБНЯК, КОРЬ, КРАСНУХА,
ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПАРОТИТ, ПОЛИОМИЕЛИТ)
здравоохранения Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
Дата введения: с момента утверждения
1 . Область применения
1.1. В методических указаниях изложены основные принципы организации и осуществления серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета против управляемых инфекций (дифтерия, столбняк, корь, краснуха, эпидемический паротит, полиомиелит).
1.2. Настоящие методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений государственной санитарно-эпидемиологической службы, а также могут быть использованы специалистами лечебно-профилактических учреждений.
2 . Общие положения
Серологический мониторинг состояния коллективного иммунитета населения страны является обязательным элементом эпидемиологического надзора за дифтерией, столбняком, корью, краснухой, эпидемическим паротитом и полиомиелитом. Его роль представляется чрезвычайно важной, поскольку эпидемическое благополучие в отношении указанных инфекций определяется состоянием поствакцинального иммунитета. Мониторинг осуществляется путем серологических исследований сывороток крови привитых людей.
Серологический мониторинг включает:
Подбор индикаторных групп населения, характеризующих состояние специфического иммунитета, что позволяет экстраполировать полученные результаты на население обследуемой территории в целом;
Оценку эффективности проведенной иммунизации.
Целью серологического мониторинга является оценка состояния индивидуального, коллективного иммунитета на конкретной территории, уровня фактической защищенности от инфекций в отдельных возрастных группах населения, а также оценка качества прививочной работы.
Серологический мониторинг состояния коллективного иммунитета населения осуществляется учреждениями государственной санитарно-эпидемиологической службы и лечебно-профилактическими учреждениями.
Проведение серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета оформляется совместным приказом лечебно-профилактического учреждения и центра государственного санитарно-эпидемиологического надзора, в котором определяются территории, время (график), контингенты и численность групп населения, подлежащих обследованию, а также лица, ответственные за организацию и проведение этой работы.
3 . Материалы и методы
Материалом для исследования служит сыворотка крови, которая является источником комплексной информации о наличии спектра антител к возбудителям указанных заболеваний.
Применяемые при мониторинге методы исследования сывороток должны быть безвредными, специфичными, чувствительными, стандартными и доступными для массовых обследований. Такими в настоящее время в Российской Федерации являются:
1) реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) - для выявления антител к дифтерийному и столбнячному анатоксину;
2) иммуноферментный анализ (ИФА) - для выявления антител к вирусам кори, краснухи и эпидемического паротита;
3) реакция нейтрализации цитопатического действия вируса в культуре клеток ткани (макро- и микрометод) для выявления антител к вирусу полиомиелита.
Для оценки фактической привитости детей и взрослых против дифтерии и столбняка сыворотку крови исследуют параллельно с дифтерийным и столбнячным антигенными диагностикумами, т.к. прививки проводят ассоциированными препаратами. При дифтерии и столбняке защищенными от этих инфекций являются лица, в сыворотке крови которых определяются антитоксические антитела в титре 1:20 и выше.
Серопозитивными к вирусам кори, краснухи и эпидемического паротита являются лица, в сыворотке крови которых определяются специфические IgG антитела.
Для исключения ошибки метода и выявления истинно серонегативных результатов повторно исследуют сыворотки крови, в которых не обнаружены специфические антитела к возбудителям дифтерии, столбняка, кори, краснухи, эпидемического паротита.
О напряженности коллективного иммунитета к полиомиелиту и качестве вакцинопрофилактики можно судить на основании трех показателей.
Процент лиц с антителами к вирусу полиомиелита типов 1, 2 и 3.
Серопозитивными считаются сыворотки, у которых титр антител равен или выше 1:8. Процент таких сывороток рассчитывается отдельно для каждого серотипа вируса полиомиелита.
Процент трижды серонегативных лиц.
Серонегативными считаются сыворотки, в которых в разведении 1:8 отсутствуют антитела ко всем трем типам вируса полиомиелита. Рассчитывается их процент во всей группе обследованных сывороток.
Средняя геометрическая величина титра антител, которая рассчитывается только для группы сывороток, имеющих антитела к соответствующему серотипу полиовируса в титре 1:8 и выше. Титры антител переводят в логарифмы с основанием 2, суммируют и делят на число сывороток с антителами (см. прилож. 1).
Результаты серологического обследования контингентов вносятся в рабочие журналы лабораторий, где регистрируется наименование населенного пункта, учреждения, фамилия, инициалы, возраст обследуемого и титр антител. Результаты также вносятся в учетные формы (историю развития ребенка, амбулаторную карту больного).
4 . Методические подходы к отбору групп населения
При формировании групп населения, подлежащих серологическому обследованию, следует придерживаться следующих принципов.
Единство места получения прививки (лечебно-профилактические, детские образовательные учреждения, школы и т.д., где проводили прививки).
Этот принцип формирования групп позволяет выявить учреждения с низким качеством организации прививочной работы, а при последующем тщательном расследовании определить конкретные ее дефекты (нарушение правил хранения, транспортирования вакцин, фальсификация прививок, их соответствие срокам и схемам существующего календаря профилактических прививок, технические дефекты и другие причины).
Единство прививочного анамнеза.
Обследуемая группа населения должна представлять собой однородную статистическую совокупность, для чего необходим отбор лиц с одинаковым числом прививок и сроком от момента проведения последней прививки.
Сходство эпидемиологической ситуации, в условиях которой формируются обследуемые группы.
Для осуществления требований этого принципа формирование групп проводится из коллективов, в которых в течение одного года не регистрировались случаи заболеваний дифтерией, столбняком, корью, краснухой, эпидемическим паротитом. Выборка контингентов для обследования начинается с определения территорий, на которых планируется обследование.
Границы территории определяются сферой обслуживания того или иного лечебно-профилактического учреждения. Это может быть отдельный организованный коллектив детей и взрослых, врачебный участок, населенные пункты, приписанные к ФАП, территория обслуживания одной поликлиники.
Серологический мониторинг целесообразно проводить на крупных территориях в субъектах Российской Федерации (городах, районных центрах) ежегодно (каждый год в обследование включаются разные районы и поликлиники города, районного центра), а на территории районов субъекта Российской Федерации - по графику, один раз в 6 - 7 лет.
Для обследования следует выбрать 4 коллектива одной возрастной группы (по 2 коллектива от двух лечебно-профилактических учреждений), не менее 25 человек в каждом коллективе, т.е. не менее 100 человек в каждой индикаторной группе.
В детских коллективах перед серологическим обследованием медицинские работники должны провести разъяснительную работу с родителями о необходимости профилактики указанных инфекций и определения напряженности поствакцинального иммунитета к ним.
Сыворотки крови взрослых для исследования можно брать на станциях переливания крови без учета прививочного анамнеза доноров.
5 . Индикаторные группы населения, подлежащие серологическому обследованию на наличие специфических антител
Серологический мониторинг состояния коллективного иммунитета предусматривает многоцелевое серологическое обследование на каждой территории «индикаторных» групп населения. Дети должны иметь документально подтвержденные сведения о прививочном анамнезе. При этом срок, прошедший от последней прививки до обследования на наличие дифтерийных и столбнячных антител, антител к вирусам кори, краснухи, эпидемического паротита, полиомиелита, должен составлять не менее 3 месяцев.
В индикаторные группы нельзя включать переболевших дифтерией, столбняком, корью, краснухой, эпидемическим паротитом и полиомиелитом; детей, у которых отсутствуют сведения о прививках; непривитых против этих инфекций; перенесших какое-либо заболевание за 1 - 1,5 месяца до обследования, т.к. некоторые болезни могут привести к временному снижению титра специфических антител.
Состояние иммунитета к дифтерии, столбняку, к вирусам кори, краснухи, эпидемического паротита, полиомиелита у взрослых определяется без учета данных о прививках.
Введение «индикаторных» групп позволяет унифицировать формы и методы анализа прививочной работы. В настоящее время целесообразно выделять следующие индикаторные группы (табл. 1).
Дифтерия и столбняк
По результатам серологического обследования детей в возрасте 3 - 4 лет можно судить о формировании базисного иммунитета, в возрасте 16 - 17 лет - о качестве прививок, проводимых в школе и средних учебных заведениях; у взрослых - о фактическом уровне защищенности от дифтерии и столбняка.
Корь, паротит, краснуха
По результатам серологического обследования детей в возрасте 3 - 4 лет и 9 - 10 лет судят об уровне и напряженности противокоревого, противопаротитного и противокраснушного иммунитета в ближайшие сроки после вакцинации и ревакцинации.
Серологическое обследование детей в возрасте 16 - 17 лет позволяет оценить результативность ревакцинации в отдаленные сроки, а также уровень иммунной прослойки к этим инфекциям во вновь формирующихся коллективах средних и высших учебных заведений.
Результаты обследования взрослых в возрасте 23 - 25 лет характеризуют состояние специфического иммунитета среди молодого взрослого населения, в т.ч. при краснухе - женщин детородного возраста.
Полиомиелит
По результатам серологического обследования детей в возрасте 1 - 2, 3 - 4, 14 лет судят об уровне и напряженности иммунитета к полиомиелиту в ближайшие сроки после вакцинации и ревакцинации живой полиомиелитной вакциной, у взрослых - о фактическом состоянии иммунитета к полиомиелиту.
По усмотрению эпидемиологов серологическое обследование при рассматриваемых инфекциях может быть проведено и в других возрастных группах.
6 . Оценка эффективности и качества проведенных прививок
Оценка состояния специфического иммунитета населения к дифтерии, столбняку, кори, краснухе, эпидемическому паротиту и полиомиелиту осуществляется по результатам серологического обследования индикаторных групп населения.
Выявление в каждой обследуемой группе не более 10 % лиц с титром дифтерийных и столбнячных антител менее 1:20 и взрослых не более 20 % лиц с отсутствием защитных титров дифтерийных и столбнячных антител служит показателем достаточной защищенности от дифтерии и столбняка.
Критериями эпидемического благополучия при кори принято считать выявление в каждой индикаторной группе не более 7 % серонегативных лиц.
Среди привитых против паротита доля серонегативных не должна превышать 15 % - у однократно и 10 % - у двукратно привитых, а доля серонегативных среди привитых против краснухи должна составлять не более 4 %.
Выявление в каждой обследуемой группе не более 20 %, серонегативных к каждому из трех серотипов вируса полиомиелита, служит показателем достаточной защищенности от полиомиелита.
При выявлении в какой-либо индикаторной группе более:
10 % лиц с титром дифтерийных и столбнячных антител ниже защитного уровня или
7 % лиц серонегативных к вирусу кори, или
15 % лиц, однократно привитых против паротита, и более 10 % - двукратно, или
20 % лиц, серонегативных к каждому из трех серотипов вируса полиомиелита, следует осуществить нижеперечисленные мероприятия.
1. Выявить причины низкого уровня иммунитета:
Провести анализ прививочных документов на выявленных серонегативных лиц для установления факта наличия прививки - сопоставить сведения о прививках во всех учетных формах (карта профилактических прививок, история развития ребенка, амбулаторная карта больного, рабочие журналы и прочие);
Оценить условия хранения и транспортирования вакцин, порядок проведения иммунизации.
2. Дополнительно проверить состояние иммунитета к этим инфекциям у лиц того же возраста в количестве не менее 100 человек, но в двух других учреждениях (детских дошкольных, школах, домах ребенка и т.д.) того же лечебно-профилактического учреждения, где выявлен высокий процент серонегативных лиц.
Если после дополнительного обследования количество незащищенных к дифтерии, столбняку, кори, краснухе, эпидемическому паротиту и полиомиелиту будет превышать приведенные критерии, следует решать вопрос о тактике иммунопрофилактики в данных коллективах.
Для этого необходимо обследовать лиц других возрастных групп по усмотрению эпидемиолога. Если доля серонегативных к соответствующим возбудителям среди этих лиц не будет превышать вышеприведенные показатели, то дополнительным прививкам в обследуемых коллективах подлежат лица того возраста, где выявлен высокий процент серонегативных к вирусам кори, краснухи, эпидемического паротита, полиомиелита, и лица с титром дифтерийных и столбнячных антител ниже защитного уровня.
Если процент серонегативных среди обследованных окажется значительно выше приведенных критериев, то следует решать вопрос о дополнительных прививках всем лицам, медицинское обслуживание которых осуществляется данным лечебно-профилактическим учреждением.
Если выявлены коллективы с высоким процентом серонегативных лиц, относящиеся к двум лечебно-профилактическим учреждениям, то для оценки прививочной работы в данном районе необходимо провести серологическое обследование индикаторных групп в других учреждениях (детских дошкольных, школах и т.д.) этого района. Вопрос расширения профилактических мероприятий в территории необходимо согласовать с Департаментом Госсанэпиднадзора Минздрава России.
Данные о низкой защищенности от дифтерии подтверждаются результатами исследования иммунитета к столбняку. Так, высокий процент привитых против дифтерии и столбняка в учетных документах в сочетании с высоким процентом лиц с титром антител менее 1:20 не только к дифтерии, но и к столбняку свидетельствуют о недостоверности записей о прививках.
Высокий процент лиц, защищенных от дифтерии, в сочетании с низким уровнем иммунитета к столбняку не является результатом проведения профилактических прививок, а свидетельствует об их инфицировании возбудителем дифтерии (больные или носители). Отсутствие при этом регистрируемой заболеваемости дифтерией может быть обусловлено плохой работой по выявлению больных, особенно легкими формами заболевания (недостаточный объем бактериологических обследований больных с диагнозом ангина, нарушение правил взятия и доставки материала для бактериологического исследования; некачественная работа бактериологической лаборатории - отсутствие высеваемости даже нетоксигенных коринебактерий дифтерии и др.).
Если при обследовании взрослых в одной из возрастных групп число серонегативных к дифтерии превышает 20 %, необходимо увеличить число обследованных в той же возрастной группе. Если число серонегативных вновь превышает 20 %, необходимо провести анализ прививочной работы с целью выявления непривитых и провести их иммунизацию.
Материалы серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета обобщаются по учреждениям разного типа, поликлиникам, району и субъекту Российской Федерации в целом (табл. 2). Далее по каждой инфекции результаты серологического обследования сопоставляют с показателями заболеваемости и уровнем охвата прививками, что позволяет подтвердить официальные данные об иммунизации населения или выявить различия в охвате прививками и уровнем заболеваемости.
Динамическое слежение за состоянием иммунитета населения к управляемым инфекциям позволяет своевременно установить признаки эпидемического неблагополучия. Прогноз эпидемиологической ситуации по каждой из наблюдаемых инфекций считается неудовлетворительным, если выявляется тенденция к увеличению доли серонегативных.
При выявлении на какой-либо территории первых прогностических признаков, свидетельствующих о приближении ухудшения эпидемиологической ситуации по любой из рассматриваемых инфекций, принимаются управленческие решения, направленные на увеличение уровня иммунной прослойки среди населения.
Таблица 1
«Индикаторные» группы для серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета к инфекциям, управляемым средствами специфической профилактики
Таблица 2
Отчет о результатах проведения мониторинга состояния коллективного иммунитета против дифтерии, столбняка, кори, краснухи, эпидемического паротита и полиомиелита
|
Инфекции |
Индикаторные группы (лет) |
||||||||||||||||||||
|
30 и старше |
|||||||||||||||||||||
|
всего обслед. |
число серонег. |
% серонег. |
всего обслед. |
число серонег. |
% серонег. |
всего обслед. |
число серонег. |
% серонег. |
всего обслед. |
число серонег. |
% серонег. |
всего обслед. |
число серонег. |
% серонег. |
всего обслед. |
число серонег. |
% серонег. |
всего обслед. |
число серонег. |
% серонег. |
|
|
Дифтерия |
|||||||||||||||||||||
|
Столбняк |
|||||||||||||||||||||
|
Красну ха |
|||||||||||||||||||||
|
Эпид. паротит |
|||||||||||||||||||||
|
Полиомиелит |
|||||||||||||||||||||
Для полиомиелита следует указать процент трижды серонегативных (к 1, 2, 3 типам полиовирусов) и к каждому в отдельности.
Приложение 1
Расчет средней
геометрической величины титра антител
к вирусам полиомиелита
Например: среди 20 обследованных сывороток 18 имели антитела к полиовирусу типа 1, среди них 3 имели титр 1:8; 5 - титр 1:16; 5 - титр 1:32 и 5 - титр 1:64.
Переведя абсолютные значения титров в логарифмы с основанием 2, получим следующую величину средней геометрической титра антител:
вернувшись к абсолютным цифрам, средняя геометрическая титра антител будет 1:26.
Приложение 2
Правила сбора, транспортирования и хранения сыворотки крови
1 . Техника взятия и первичная обработка крови
Капиллярную кровь берут из пальца в асептических условиях. Перед взятием крови кисть руки пациента согревают горячей водой, затем насухо вытирают чистым полотенцем. Палец, протерев 70°-ным спиртом, прокалывают стерильным скарификатором одноразового пользования. Кровь в объеме 1,0 - 1,5 мл собирают непосредственно через край стерильной одноразовой центрифужной пробирки с пробкой (или в специальные микропробирки для взятия капиллярной крови). После взятия крови место укола смазывают 5 %-ным раствором йода.
На пробирку с кровью следует наклеить этикетку (лучше пользоваться полоской лейкопластыря) с указанием регистрационного номера, фамилии, имени, для взрослых - инициалов, даты взятия крови.
Вместе со списком обследованных лиц, в котором указывается город (район), № детского дошкольного учреждения, группы, школы, класса, № среднего специального учреждения, группы, название вуза, факультета, группы, регистрационный номер, фамилия, имя пациента, дата рождения, даты прививок против дифтерии, столбняка, кори, краснухи, эпидемического паротита и полиомиелита, дата взятия крови, подпись ответственного лица, пробы крови направляются в лабораторию территориального ЦГСЭН в день взятия крови.
В лаборатории для получения сыворотки пробирку с кровью оставляют в наклонном (под углом 10 - 20°) положении при комнатной температуре на 30 мин для образования сгустка; после чего пробирку с кровью встряхивают для отделения сгустка от стенки пробирки и оставляют на ночь в холодильнике при температуре 4 - 8 °С.
После отделения сыворотки от сгустка (пробирки обводят по внутренней поверхности пастеровской пипеткой), ее центрифугируют при 1000 - 1200 об./мин в течение 15 - 20 мин. Затем сыворотку осторожно переливают или отсасывают пипеткой с грушей в стерильные центрифужные (пластиковые) пробирки или эппиндорфы с обязательным переносом на них этикетки с соответствующей пробирки.
Поступающие в лабораторию сыворотки (без сгустка) можно хранить до исследования в бытовых холодильниках при температуре 4 °С в течение 7 дней. При более длительном хранении сыворотка должна быть заморожена при -20 ?С. Собрав необходимое количество сывороток, их отправляют в лабораторию ЦГСЭН на исследование.
2 . Транспортирование образцов сыворотки (крови).
Перед транспортированием собранного материала из района обследования очень важно принять меры предосторожности: проверить наличие собранной информации, прочно закрыть пробирки пробкой, расположить пробы согласно их номерам и пр. На месте сбора следует хранить списки обследованных лиц. Для транспортирования крови (сыворотки) используют термоконтейнеры (сумки-холодильннки).
При пересылке проб железнодорожным или воздушным транспортом лаборатории необходимо известить (по телефону, телеграммой) о номере поезда (рейса), дате и времени отправки и прибытия, количестве проб и пр. При транспортировании в зимнее время года и хранении крови не допускается ее замораживание.
Данное заболевание долго считалось разновидностью паралича, но оказалось результатом заражения ЦНС безопасным для взрослых, зато иногда смертельным для детей вирусом. Когда развивается паралитический (самый опасный) полиомиелит, иммунитет не может противопоставить ему ничего «серьезного».
Полиовирус размножается в нейронах спинного мозга – одного из 2 основных отделов центральной нервной системы. А они защищены от проникновения большинства защитных тел крови. Зато предотвратить заражение им возможно в любом возрасте, поскольку вирус попадает в спинной мозг через кишечник.
Как взаимосвязаны полиомиелит и иммунитет?
Науке пока известны 3 типа возбудителя заболевания. Наибольшую активность проявляет I-й, особенно в теплое время года. Полиовирус попадает в почву, воду, воздух с испражнениями и слюной больных, его могут переносить мухи.
Он интересен быстрой гибелью при нагреве и хлорировании в сочетании со спартанской устойчивостью к перевариванию желудком и кишечником, заморозке, обработке . А еще тем, что его целевыми тканями выступают вовсе не нейроны ЦНС, а ближайшие к месту попадания в организм слизистые оболочки и лимфоузлы – глоточные или кишечные.
В подавляющем большинстве случаев дальше них инфекция не заходит, поскольку иммунитет к ней формируется раньше. У пациента повышается температура, появляются боль в горле, иногда – с насморком. Если инфицирован и кишечник, «гриппозная» симптоматика сочетается с диареей.
Пациент обычно даже не догадывается, что переболел полиомиелитом, приняв его за или . Отличить легкую форму от ОРЗ, мононуклеоза и других инфекций позволяют анализы крови, кала, смывов из носоглотки. Паралитический полиомиелит подтверждают пробы спинномозговой жидкости.
Поражение возбудителем нейронов спинного и головного мозга – явление редкое (по отношению к общему числу заражений полиовирусом оно не превышает 1%). В результате его деятельности нейроны гибнут, возникает паралич.
Смертельный исход чаще всего наблюдается при инфицировании дыхательного центра головного мозга или путей, управляющих легочной диафрагмой, сердечным ритмом. Но иммунитет после полиомиелита, протекавшего в паралитической форме, вырабатывается такой же устойчивый, как и при не паралитической.
Остановить прогресс паралитической формы система защиты не может (нервные ткани и крупные отделы ЦНС обладают иммунной привилегией). Именно слабая противовирусная защита становится причиной поражений ЦНС у детей (у них она еще не работает в полную силу) и взрослых (налицо иммунодефицит). Дети более восприимчивы к заражению им, но – только после достижения 3-месячного возраста, так как с рождения их защищают антитела, полученные от матери.
Поддержка организма во время лечения
Специфической терапии полиомиелита не существует. Очаг первичного размножения возбудителя вскрывают и обкалывают дополнительными порциями иммуноглобулинов – противовирусных и антибактериальных защитных белков крови, ответственных за долгосрочный иммунитет. В остальном лечение назначают паллиативное:
- ограничение активности;
- анальгетики;
- успокоительные;
- горячие компрессы на парализованные мышцы.
При нарушении функции дыхания больных переводят в отделение интенсивной терапии. Попытки восстановить тонус и подвижность парализованных мышц с помощью , физиотерапии и начинают с 4-6 недели, когда становится ясно, какие из них пострадали, и в какой степени.
Иммунитет против полиомиелита в паралитической форме важен не так сильно, как борьба за каждый уцелевший нейрон. Инструменты защиты внутри ЦНС все равно не работают, а сходит он на «нет» самостоятельно, просто потому, что нервная ткань не является оптимальной для полиовируса средой обитания. В качестве поддерживающей терапии больному можно назначить:
- группы В – для облегчения нервной симптоматики и увеличения шансов на восстановление функций задетых мышц после болезни. От 4 до 7 данной группы присутствуют почти во всех съедобных растениях. Но всего их 20, потому принимать лучше препараты – «В-50» от компании «Now Foods» (11 витаминов группы В за 1415-1500 руб. при 100 таб. в упаковке), «Благомакс» (7 компонентов по цене от 193 руб. за 90 таб.), «Нейровитан» (5 представителей группы при стоимости от 830 руб. за 30 таб.);
- витамин С – для «подстегивания» острой иммунной реакции с целью скорейшей выработки собственных иммуноглобулинов со специфическими антигенами к вирусу. Его можно есть с цитрусовыми (не больше 300 г фруктов в день) или в составе « » из аптеки (до 20 руб. за 10 таб.);
- введение сторонних иммуноглобулинов – в случае их вялой выработки в организме больного. При полиомиелите используются только внутримышечные или внутривенные инъекции. Детям с 3 мес. дозируют 3-6 мл препарата однократно, как можно скорее после подозрительного контакта или появления тревожных признаков. Взрослым вводят от 4,5 до 6 мл при тех же условиях. Купить 10 ампул иммуноглобулина человеческого нормального можно примерно за 900 руб. и дороже.
Популярные сейчас с интерферонами иногда назначают через 3-4 мес. после перенесенного полиомиелита. Но на течение заболевания они не влияют, в острой стадии не назначаются.
Как поднять иммунитет после перенесенного полиомиелита?
Курс интерферонов помогает поднять резистентность к вирусам, так как эти белки синтезируют все клетки, включая нервные. Проще всего вводить их ректально, а не внутривенно – как «Виферон» (280-535 руб. за 10 шт., в зависимости от концентрации действующего вещества).
Возможно и их локальное впрыскивание/закапывание в нос и горло – как предусматривает «Гриппферон» (от 370 руб. за спрей, около 130 руб. – за при одинаковом объеме 10 мл). Курс интерферонов не стоит растягивать больше, чем на 2 недели, но его можно повторять раз в 4-6 мес.
Как формируется иммунитет к заболеванию?
Путей его приобретения существует 2 – переболеть или сделать прививку. Напряженность иммунитета к полиомиелиту в обоих случаях отсутствует, поскольку возбудитель погибает, не оставляя очагов. Зато есть разница в последствиях и результативности применения вакцин того или иного типа.
- ОПВ – вакцина на основе живого, ослабленного полиовируса, произведенная по методу А. Сэйбина. Она требует трехкратного введения и дает по его итогам почти 100% защиту от всех штаммов возбудителя до конца жизни (однократная вакцинация ею дает не больше 50% гарантий). Привитые ею становятся полностью невосприимчивы к вирусу. Основная «загвоздка» с нею – весьма энергичное размножение введенного вируса в слизистой кишечника (там же и по той же схеме, где селятся его обычные «собратья»), что делает привитого ребенка/взрослого заразным, как в острой стадии заболевания. Считается, что ослабленный штамм ОПВ не может поражать ЦНС людей – самого привитого или зараженных им. Но за время ее применения наблюдались и такие случаи (единичные, обычно при 2-3 введении и у пациентов с ВИЧ).
- ИПВ – вакцина с убитыми формалином возбудителями изобретения Дж. Солка. Ее тоже вводят 2-3 раза (каждая инъекция вырабатывает пожизненный к одному из 3 штаммов), получая на выходе 99% эффективность. Осложнения от нее в виде даже исключительных случаев полиомиелита у привитого пациента, заражений им окружающих не наблюдались. Однако она полностью и навсегда гарантирует только от паралитической формы. А легкой формой можно снова заболеть уже через 5 лет после вакцинации.
Если у пациента уже диагностировали полиомиелит, иммунитет после прививки формируется быстрее, независимо от формы перенесенного заболевания. Такому больному часто хватает однократного применения.
|
Патогенез полиомиелита | ||
|
полиовирус | ||
|
слизистая оболочка: носоглотки (входные ворота) | ||
|
эпителиальные клетки слизистой оболочки
лимфатические узлы глоточного кольца тонкой кишки (пейеровые бляшки) (первичная репродукция) |
выделение полиовируса: из глотки (начиная с инкубационного периода и до появление первых симптомов) - инфицирование людей воздушно-капельным путём в эпидемических очагах с фекалиями (1 г содержит 1 млн инфекционных доз) - основной путь передачи инфекции |
|
|
(стадия вирусемии продолжается от нескольких часов до нескольких дней) | ||
|
образование иммунных комплексов | ||
|
повышение проницаемости гематоэнцефалического барьера | ||
|
проникновение полиовируса (через аксоны периферических нервов) в нейроны: спинного мозга головного мозга |
В случае накопления в крови вируснейтрализующих антител, блокирующих проникновение полиовируса в ЦНС, поражения ЦНС не наблюдается |
|
|
репродукция полиовируса (вторичные органы-мишени): двигательные нейроны передних рогов спинного мозга нейроны большого мозга нейроны продолговатого мозга | ||
|
глубокие (нередко - необратимые) дегенеративные изменения в цитоплазме - кристаллоподобные скопления вирионов | ||
|
вялые атрофические парезы и параличи |
Различают четыре клинические формы полиомиелита:
паралитическую (1% случаев), её чаще вызывает поливирус серотипа I
менингиальную (1% случаев - асептический менингит, без развития параличей)
абортивную или «малая болезнь» (легкая форма, протекающая без поражения ЦНС)
инаппарантная (скрытая).
Полиомиелит нередко протекает в два этапа: после легкой формы и наступившего значительного улучшения развивается тяжелая форма болезни.
Иммунитет при полиомиелите
Активный постинфекционный - гуморальный (протективными свойствами обладают вируснейтрализующие антитела - поэтому постинфекционный иммунитет типоспецифический, - которые появляются еще до появления параличей, достигают максимальных титров через 1 - 2 месяца и сохраняются в течение многих лет, обеспечивая практически пожизненный иммунитет).
Пассивный (материнский) сохраняется в течение 4 - 5 нед жизни ребенка.
Необходимо отметить, что высокая концентрация антител в сыворотке не предотврощает развития параличей после того, как полиовирус проник в ЦНС.
Диагностика полиомиелита
Выделение вируса из организма больного (из смывов носоглотки, крови, фекалий - в зависимости от периода заболевания, посмертно - кусочки мозговой ткани и лимфатических узлов)
метод культивирования - в культурах клеток
индикация - ЦПД
идентификация - РН
Необходимо заметить, что выделение вируса, особенно из фекалий, не является абсолютным основанием для постановки диагноза, учитывая широкое распространение бессимптомного носительства.
В условиях массовой вакцинации живой вакциной необходима внутритиповая дифференциация «диких» (вирулентных) и вакцинных вариантов полиовируса:
Серологическая диагностика в парных сыворотках (первые дни болезни и на 2 - 3 неделе после начала заболевания, диагностическое значение имеет нарастание титра не менее чем в 4 раза), антитела выявляют также и в ликворе:
Для обоих методов можно использовать также РПГ и цветную пробу.
Иммунопрофилактика полиомиелита
Инактивированная вакцина. Получена Дж.Солком (1953, США) путём обработки вируса раствором формалина. Обеспечивает напряженный типоспецифический гуморальный иммунитет.
Преимущества:
лишена возможности мутаций, способных приводить к увеличению вирулентности
менее реактогенна (может использоваться для профиактики лиц с иммунодефицитом и ослабленных детей)
Недостатки:
необходимость трехкратного введения парентеральным путём
не обеспечивает надёжного местного иммунитета кишечника, в связи с чем не предотвращает циркуляцию полиовирусов среди населения.
Аттенуированная вакцина. Получена А.Сэбиным (1956, США). Вакцинные штаммы генетически стабильны, не реверсируют к «дикому типу» при пассажах через кишечник людей и не репродуцируются в клетках ЦНС.
В 1958 г. А.А.Смородинцев и М.П.Чумаков на основе штаммов Сэбина разработали пероральную вакцину (в настоящее время выпускается в жидком виде). Эта вакцина входит в число обязательных прививок.
Перимущества:
обеспечивает не только общий гуморальный, но - и местный иммунитет кишечника (за счёт синтеза IgAS)
в результате интерференции вакцинных вирусов с «дикими» типами в эпителиальных клетках слизистой оболочки тонкого кишечника происходит элиминация последних из кишечника
вводится перорально, что значительно облегчает её применение
Недостатки:
необходимость постоянного контроля за генетической стабильностью вакцинного штамма
менее надёжна в тропических странах
нельзя использовать для вакцинации лиц с иммунодефицитом и ослабленных детей (опасность развития параличей)
Пассивная иммунопрофилактика
Используется человеческий иммуноглобулин (для предупреждения развития паралитических форм), хотя его применение весьма ограниченно.
Роль в патологии человека вирусов Коксаки и ЭКХО .
Эти вирусы вызывают у человека полиомиелитоподобные заболевания, поражения внутренних органов, ОРЗ, ОКИ, поражения ЦНС.
Афтовирус и патогенность для человека вируса ящура .
Вирус ящура, вызывающий высококонтагиозное заболевание парнокопытных домашних животных, выделен в отдельный род семейства пикорнавирусов.
Источником инфекции являются больные животные.
Человек заражается:
контактным путём (при уходе за больными животными) - основной путь заражения
алиментарным путём (при употреблении в пищу заражённых молока и мяса без достаточной термической обработки) - более редкий способ заражения.
Клинически ящур у человека проявляется везикулярными высыпаниями на слизистых оболочках рта, гортани и на коже. Поражения внутренних органов редки.
Риновирусы, эпидемиология, патогенез иммунитет и диагностика острого заразного насморка .
Риновирусы
Вирионы риновирусов имеют сферическую форму, диаметр 20 - 30 нм.
В отличие от энтеровирусов теряют свои инфекционные свойства в кислой среде.
Культивируются в культурах клеток, вызывая в них ЦПД.
Выделено 115 серотипов риновирусов, многие из которых имеют идентичные антигены, ответственные за перекрёстные реакции.
Эпидемиология
Распространение риновирусов происходит воздушно-капельным путём.
Риновирусы - основные возбудителя простудных заболеваний у человека.
Патогенез
Иммунитет
После заболевания сохраняется непродолжительный (2 года) типоспецифический иммунитет, который определяется главным образом IgAS.
Диагностика
Общие признаки и состав экологической группы арбовирусов. Тогавирусы: классификация, структура, роль в патологии человека. Понятие о филовирусах.
Общие признаки и экологической группы арбовирусов .
Arthropod borne – передающиеся членистоногими.
Членистоногие являются и переносчиками и хозяевами.
Синдромы:
Лихорадки недифференцированного типа
Геморрагические лихорадки
Энцефалиты
2 и 3 – высокая летальность
Определение – вирусы, вызывающие природно-очаговые заболевания, как правило, передающиеся членистоногими и вызывающие 1 – 3.
См. также с. 281-283.
Состав экологической группы арбовирусов .
Преимущественно вирусы семейств:
См. также с. 281-281.
Тогавирусы: классификация, структура, роль в патологии человека .
Патогенные для человека тогавирусы относятся к родам Alfavirus (относятся к арбовирам) и Rubivirus (возбудитель краснухи, к арбовирусам не относится).
Сложные вирусы диаметром 45-75 нм, имеющие кубический тип симметрии и одноцепочечную РНК.
Альфавирусы поражают ЦНС, кожные покровы (геморрагическая сыпь – геморрагические лихорадки), мышцы и внутренние органы.
Понятие о филовирусах .
Имеют нитевидный вид, откуда и название (filum – нить). Включают два вируса: вирус Марбург и вирус Эбола, которые вызывают одноименные тяжелые (с летальностью до 50%) геморрагические лихорадки, отличающиеся массивными кровотечениями с поверхности всех слизистых оболочек и некротическими поражениями внутренних органов.
Флавивирусы: общая характеристика семейства; эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика и иммунопрофилактика клещевого энцефалита; другие заболевания, вызываемые флавивирусами.
Общая характеристика семейства Flaviviridae
Сложные, одноцепочечные РНК содержащие вирусы диаметром 40-50 нм. Типичный вирус – вирус желтой лихорадки (отсюда название: flavus – желтый).
Содержит более 50 вирусов, объединенных в четыре антигенные группы:
группа клещевого энцефалита
группа японского энцефалита
группа лихорадки денге
группа желтой лихорадки
Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика и иммунопрофилактика клещевого энцефалита.
Эпидемиология
Заболевание распространено на огромной территории от Дальнего Востока до Центральной Европы (вирус клещевого энцефалита – типичный арбовирус умеренного пояса) и регистрируется преимущественно в весенне-летний период.
Выделено два антигенных варианта вируса клещевого энцефалита:
передающийся клещами Ixodes persulcatus, который вызывает тяжелую форму инфекции на Дальнем Востоке;
передающийся клещами Ixodes ricinus, который вызывает более легкую форму инфекции.
Вирус сохраняется в организме клещей на всех стадиях их развития и передается трансовариально потомству. Поэтому клещи рассматриваются не только как переносчики, но и как основной резервуар вируса клещевого энцефалита (дополнительным резервуаром служат прокормители клещей – грызуны, птицы, дикие и домашние животные).
Клещи передают вирус (трансмиссивным путем) сельскохозяйственным животным, у которых развивается бессимптомная инфекция с вирусемией (у коров и коз вирус при этом проникает в молоко).
Патогенез
Вирус передается человеку через укус инфицированного клеща, а также алиментарным путем – через сырое коровье и козье молоко. Инкубационный период варьирует от 1 суток до месяца.
На первой стадии вирус попадает в кровь и первично репродуцируется в лимфоцитах, гепатоцитах, клетках селезенки и эндотелии сосудов (экстраневральное размножение), после чего распространяется гематогенным и лимфогенным путями, проникая в мозг, где поражает двигательные нейроны передних рогов шейного сегмента спинного мозга, мозжечок и мягкую оболочку головного мозга.
Иммунитет
После перенесенного заболевания формируется напряженный гуморальный иммунитет. Через неделю после заражения появляютсяя антигемагглютинины, к концу второй недели – комплементсвязывающие антитела, а через месяц – вируснейтрализующие.
Диагностика
Вирус выделяют из крови и ликвора больных. Наиболее универсальный способ – внутримозговое заражение 1-3-дневных мышат-сосунков; после появления признаков болезни их мозг пассируют 3-4 последовательными заражениями, после чего вирус достигает в мозговой ткани высокого титра и его можно использовать для приготовления антигена и идентифицировать в РСК и РТГА с набором иммунных сывороток. Окончательную идентификацию проводят в РН (наиболее специфичной реакции).
Следует помнить, что работа с патологическим материалом представляет большую опасность в плане ингаляционного заражения и должна производиться в специализированных лабораториях.
Экспресс-диагностика основана на обнаружении вирусного антигена в крови с помощью РНГА, ИФА или участков генома вируса с помощью ПЦР.
Антитела обнаруживают в парных сыворотках (см. выше динамику их появления).
Иммунопрофилактика
Для специфической профилактики используют инактивированную формалином вакцину (обязательной вакцинации подлежат лица, работающие в природных очагах).
В качестве пассивной иммунопрофилактики при укусе клеща вводят специфический иммуноглобулин (донорский или гетерологичный).
Как определить, нужна ли прививка или нет
С прививками ситуация очень простая: если ее можно не делать, то ее лучше не делать, ибо последствия могут быть самыми разнообразными...
С другой стороны, если прививку нужно сделать, то ее лучше сделать, поскольку часто бывает так, что прививку сделали, а антитела не выработались, иммунитет не образовался или со временем ослаб.
Перед прививкой против кори желательно проведение анализа крови на антитела (напряженность иммунитета против кори)
Всё логично: если анализ показывает достаточное количество антител к кори - прививка не делается (потому что антитела «говорят», что защита против кори в организме есть). Почти у всех людей естественный титр антител достаточно высокий и прививки делаются буквально 9-15% от всего количества.
Почему повторная РЕвакцинация очень опасна
- В 7% случаях после прививки от кори возникает сильнейшая аллергическая реакция. Столкновение иммунитетов - это ужасно!.
- Прививка это, по сути, заражение организма. Изначально она ослабляет организм и в этот момент он становится уязвим для других болезней.
Зачем нужен анализ на наличие антител, если вы уже делали прививку ранее или переболели уже болезнью?
- У10-12% людей иммунитет на корь не вырабатывается даже после прививки
- У 20-30% людей иммунитет на корь пропадает со временем в результате употребления антибиотиков, иммунодепрессантов и т.д.
- Многие люди не помнят или не знают, делали ли они прививку, болели ли данной болезнью.
- Все эти факторы обостряют вероятность непредвиденного заражения, например, взрослого при контакте с больным ребенком.
Абсолютно такая же ситуация и с остальными вирусами заболеваний данной группы: краснуха, паротит
Немножко теории
Еще «на заре» вакцинации было известно, что ПРИВИВАТЬ НАДО ТЕХ, у кого НЕ выработался специфический (против конкретного заболевания) иммунитет ЕСТЕСТВЕННЫМ путем.
Делать прививки тем, у кого уже есть естественный иммунитет против заболевания, противопоказано!
Часто здоровый человек имеет высокий собственный уровень титров антител к инфекции.
Перед любой прививкой необходимо сдать анализы на наличие антител (анализ на напряженность иммунитета)
Наличие внутреннего иммунитета к инфекции может быть обусловлено тем фактом, что выработка иммунитета (антител) происходит не только благодаря прививкам (этот метод кстати весьма агрессивен и вызывает массу споров), но и более мягкими способами - через случайные кратковременные контакты с больными людьми.
Любой врач подтвердит, что далеко НЕ ВСЕ заболевают при контакте с больным, даже самым контагиозным (заразным) заболеванием! Почему? Да потому что иммунитет против инфекционных заболеваний может выработаться и незаметно (та же «прививка», но без искусственных вакцин!). Титры антител как раз и показывают, что встреча с инфекцией произошла, и что защита - есть (это как раз и называется «специфическим иммунитетом»).
Повторюсь. Антитела МОГУТ вырабатываться:
а) при остром течении инфекции;
б) когда здоровый человек встретился с инфекцией и «переболел» ею «незаметно» - т.е. произошла «естественная прививка».
в) после введения вакцины (прививки). Главное - выработка антител (тогда как говорят, «прививка состоялась»). Сколько вырабатывается антител и как долго они сохраняются - это сугубо индивидуально.
Бывает, что человек трижды за жизнь ярко переболевает коклюшем (т.е. достаточный иммунитет не вырабатывается даже после болезни), а бывает, что «незаметно выработанный иммунитет» (или после прививки, или без прививки) защищает от того же коклюша на всю жизнь.