, diagnostilised ravimid, mida kasutatakse allergilise reaktsiooni tuvastamiseks tuberkuloosibakteritega nakatunud inimestel. Esmalt sai R. Koch. NSV Liidus toodetakse: vedelat tuberkuliini ehk Kochi alttuberkuliini (ATK), – saadakse tuberkuloosibaktereid kasvatava vedela söötme aurustamisel; kuiv puhastatud tuberkuliin (PPD) - bakterifiltraadile valke sadestavate kemikaalide lisamisega, millele järgneb puhastamine; vedel puhastatud tuberkuliin (PPD-L) - kuiva puhastatud tuberkuliini standardlahjendustega. Kasutatakse (reaktsioon, Pirquet' reaktsioon), mille kaudu tuvastatakse tuberkuloosivastase vaktsineerimise all olevad isikud, varajase diagnoosimise ja tuberkuloosiprotsessi kulgemise hindamise meetodina. Massiuuringuteks NSV Liidus kasutatakse ainult intradermaalset.

Veterinaarias kasutatakse tuberkuliini tuberkuloosi allergiliseks diagnoosimiseks. Ravimit manustatakse subkutaanselt (vahetatakse harva), intradermaalselt ja konjunktiivikotti. Loomi, kes reageerivad positiivselt (põletikuline turse intradermaalse süstiga ja mädane konjunktiviit silmatestiga), loetakse tuberkuloosi põdevaks.
Suur Nõukogude entsüklopeedia

Tuberkuliini klassikalisel kujul leiutas 1890. aastal kuulus Saksa arst Robert Koch, kes avastas ka tuberkuloosi tekitaja – mükobakteri, mis sai tema auks Kochi batsilliks nimetatud. Algul oli tuberkuliin Mycobacterium tuberculosis'e lagunemissaadus, mille aktiivsus kaotas kuumutamisel ja mis sisaldas palju lisandeid: toitekeskkonna jääke, millel baktereid kasvatati, sooli ja muid aineid, mis mõjutasid reaktsiooni puhtust ja muutis proovide tulemuste hindamise keeruliseks.
Alates 20. sajandi 60. aastate lõpust on välja töötatud puhtamaid, lisanditeta tuberkuliinipreparaate, mis sisaldavad tuberkuloosibatsilli valgukomponenti, nn PPD-d (Purified Protein Derivaat). Kõigis endise Nõukogude Liidu vabariikides kasutatakse toitekeskkonna valgufraktsioonidest puhastatud ravimit PPD-L-tuberkuliin, mille sai 1965. aastal Vene teadlane M. A. Linnikova.

Kaasaegne tuberkuliinipreparaat masstuberkuliinidiagnostika jaoks on puhastatud tuberkuloosiallergeen ja sisaldab standardlahjenduses 2 TU (tuberkuliiniühikut) 0,1 ml-s. See on segu tuberkuloosikultuuride (inimeste ja veiste) filtraatidest, mis tapetakse kuumusega, sadestatakse trikloroäädikhappega, töödeldakse etüülalkoholi ja anesteetikumi eetriga, lahustatakse fosfaatpuhverlahuses (mängib stabilisaatori rolli) ja fenooli. (mängib säilitusaine rolli).

Tuberkuliini toimeaineks on allergeen tuberkuloproteiin, mis nakatunud või vaktsineeritud patsientidele intradermaalselt manustatuna kutsub esile spetsiifilise hilist tüüpi ülitundlikkusreaktsiooni, mis väljendub lokaalse reaktsioonina – hüpereemia ja infiltraadid (papulid).

Tuberkuliini kasutamise näidustused

Tuberkuliin on ette nähtud elanikkonna massiliseks tuberkuliinidiagnostikaks, et:
valige kontingent revaktsineerimiseks ja ka enne 2 kuu vanuste ja vanemate laste esimest vaktsineerimist;
diagnoosida, sealhulgas tuvastada väikelaste ja noorukite tuberkuloosi varased ja lokaalsed vormid;
tuvastada Mycobacterium tuberculosis'ega nakatumine.

Tuberkuliini kasutamise vastunäidustused

Tuberkuliini juhiste kohaselt ei saa ravimiga vaktsineerida: levinud nahahaiguste, epilepsia, ägedate, krooniliste nakkus- ja somaatiliste haiguste ägenemise ajal, allergiliste seisundite (reuma ägedas ja alaägedas faasis, bronhiaalastma, idiosünkraatia, mis on ägenemise ajal väljendunud nahailmingud). Testi võib teha kuu aega pärast kõigi kliiniliste sümptomite kadumist või kohe pärast karantiini lõpetamist. Seda ei saa läbi viia lasteasutustes, kus on lasteinfektsioonide karantiiniperiood. Ennetavad vaktsineerimised võivad mõjutada ülitundlikkust tuberkuliini suhtes. Sellega seoses tuleks tuberkuliinidiagnostika planeerida enne erinevate nakkuste vastu ennetavate vaktsineerimiste läbiviimist. Ennetava vaktsineerimise korral tuleks tuberkuliinidiagnostika läbi viia mitte varem kui kuu aega pärast seda. Vastunäidustuste väljaselgitamiseks viib arst või õde tuberkuliinitesti tegemise päeval läbi uuringu ja küsitluse testitavate isikutega.

Tuberkuliini kõrvaltoimed

Reaktsioon manustatud tuberkuliinile sõltub otseselt spetsiifilise reaktsioonivõime tasemest, millel antud organism asub.
Tuberkuliini ülevaadete kohaselt võivad mõnedel patsientidel, kellel on kõrge hilinenud tüüpi ülitundlikkus tuberkuliini suhtes, tekkida lokaalsed reaktsioonid koos lümfadeniidi ja lümfangiidiga. Samuti täheldatakse mõnikord üldist reaktsiooni üldise halb enesetunne, peavalu ja palavik. Terved inimesed, kellel on testreaktsioon

Peaaegu kõik tunnevad tuberkuliini. Peaaegu igaüks meist sai lasteaias või koolis vähemalt korra “nupu”. See ravim on päästnud rohkem kui ühe inimese elu surmavast haigusest, mida nimetatakse tuberkuloosiks. Vaatame, kui tõhus ja ohutu see on. Samuti saame teada, milline on toimepõhimõte ja millised on tuberkuliinidiagnostika analoogid, sealhulgas Diaskintest.

Et paremini mõista, mis on tuberkuliin, süveneme veidi selle loomise ajalukku. Kõik sai alguse sellest, et 1882. aastal sai maailm teada tuberkuloosibatsilli olemasolust, mis on raske haiguse tekitaja. See juhtus tänu Saksa mikrobioloogile Robert Kochile. Tema auks nimetati bakter Kochi batsilliks. Pärast 8 aastat kestnud erinevaid teste leiutas ta 1890. aastal tuberkuliini, millega plaanis haigusega võidelda. Tegelikkuses ei läinud kõik päris nii, nagu plaanitud. Ravim osutus mitte ainult kahjutuks, vaid ka täiesti ebaefektiivseks.
Õnneks hakkas ravimi vastu huvi tundma Austria lastearst Clemens Pirke. Pärast arvukaid uuringuid ja vaatlusi märkas ta, et tervete inimeste reaktsioon erineb haigete inimeste reaktsioonist. 1907. aastal teatas ta ametlikult, et see on omamoodi katalüsaator ja seda saab kasutada diagnostikavahendina.

Paljud on kuulnud Pirqueti testist, mis sai nime ülalmainitud austerlase järgi. Seda tehti subkutaanselt, st tilk ainet hõõruti läbi väikese nahakriimu. Tuntud manustamisviisi pakkus välja juba prantsuse arst Charles Mantoux. Patsiente jälgides jõudis ta järeldusele, et subkutaanne manustamine annab täpsema tulemuse. See meetod võeti kogu maailmas kiiresti kasutusele kui mugavam ja vähem valus. Nii ilmus 1908. aastal samanimeline Mantouxi test. Aja jooksul leiutati Diaskintesti analoog suurema täpsusega, et määrata viirusbakterit organismis.

Koostis ja vabastamisvorm

Tuberkuliini põhikoostis on elutute, inimeste ja veiste tuberkuloosi mikrobakterite filtraat, mis kuumutamisel esialgselt surmatakse. Alles jäävad vaid nende elutähtsa tegevuse saadused. Seejärel puhastatakse need ultrafiltrimise või muul viisil ja sadestatakse trikloroäädikhappega. Seejärel töödeldakse neid etüülalkoholi ja eetriga, mida kasutatakse anesteesiaks, ning lahustatakse stabiliseerivas fosfaatpuhverdatud vedelikus. Lõpuks lisatakse säilitusainena fenool. Seega saadakse peamine toimeaine - allergeen-tuberkuloproteiin. See põhjustab reaktsiooni elusviiruse esinemisel organismis pärast Tuberculini või selle analoogi, näiteks Diaskintesti, manustamist.

Ravim on selge süstelahus ja on pakendatud 0,6 ml, 1 ml või 3 ml klaasampullidesse.

Näidustused kasutamiseks

Ravim ei ole vaktsiin ega ravi. See ei ravi ega kaitse. Selle eesmärk on tuvastada ohtlik haigus varajases staadiumis, kaua enne nähtavate sümptomite ilmnemist.

Iga-aastane tuberkuliinitest viiakse läbi:

• lapsed alates 2 kuud enne BCG paigutamist;
• enne revaktsineerimist;
• tuberkuloosi varajaseks diagnoosimiseks.

Kaks korda aastas:

• kokkupuutel patsientidega;
• tuberkuloosivastase vaktsineerimise puudumisel;
• immuunsust vähendavate haiguste esinemisel: suhkurtõbi, HIV, verehaigused, kortikosteroidraviga üle 1 kuu, peptilised haavandid, onkoloogilised patoloogiad jne;
• sotsiaalsete riskirühmade lapsed.

Ja ka tuberkuloosile iseloomulike sümptomite ilmnemisel, et nakatumist ümber lükata või kinnitada. Seda tehakse sõltumata eelmise testi ajastust ja tulemustest.

Kuidas tuberkuliin toimib?

Ravimi aluseks on elutud tuberkuloosi mükobakterid. Nende elujõulisus on nii nõrk, et nad lihtsalt ei suuda infektsiooni esile kutsuda. Naha alla sattudes lahus kohe ei lahustu, vaid jääb mõneks ajaks ühte kohta seisma. Sellele reageerivad koheselt lähedal asuvad lümfotsüüdid veresoontes. See põhjustab punetust ja induratsiooni, mida nimetatakse papuliks või infiltraadiks. Kui organismis on tuberkuloosseid mükobaktereid, tähendab see, et lümfotsüüdid on seda juba "tundma õppinud". Nende arv suureneb ja nad hakkavad aktiivsemalt töötama. Kui tuttava viiruse uued elemendid ilmuvad, tormavad nad nende poole ja hakkavad ründama. Kuna kõik provokatiivsed osakesed on koondunud paapulisse, toimub reaktsioon just seal. See suurendab oluliselt selle suurust. Ühesõnaga tekib allergia tuberkuliini suhtes.

Proovikalender

Tuberkuliin ja selle analoog Diaskintest on mõeldud tuberkuloosibatsillide esinemise varaseks diagnoosimiseks lastel. Esimene test tehakse mitte varem, kui laps saab 12 kuuseks. Enne seda vanust on immuunsüsteemil oma omadused, mis moonutavad tulemust suuresti. Erandiks on üle 2 kuu vanused beebid, kellele mingil põhjusel anda ei saanud. Sel juhul tuleb neil esmalt kontrollida haigustekitaja olemasolu organismis ja ainult negatiivse reaktsiooni korral vaktsineeritakse. Seda tehakse selleks, et vältida patogeenide täiendava annuse sissetoomist, mis võib olukorda oluliselt halvendada.
Edasine diagnoosimine tuberkuliiniga toimub kord aastas kuni 15-16-aastaseks saamiseni. Lastele, kes elavad tuberkuloosi suhtes ebasoodsa olukorraga piirkonnas või on nakatunud inimesi perekonnas või lähiümbruses, manustatakse ravimit kaks korda aastas, see tähendab iga 6 kuu järel, kuni nakatumisoht möödub. Kui lapsel on tuberkuloos, tehakse tuberkuliinidiagnostikat 3-4 korda aastas, kuni sümptomid täielikult kaovad. Sarnane skeem kehtib ka Diaskintesti puhul.

Tuberkuliini kasutamise juhiste kohaselt toimub õige manustamine järgmiselt: küünarvars jagatakse visuaalselt kolmeks osaks ja vajalik annus süstitakse rangelt subkutaanselt keskosa keskele. Sel juhul moodustub kohe vesine tuberkuloos, mida rahvasuus kutsutakse “nupuks”. 48-72 tunni pärast kontrollitakse reaktsiooni joonlauda kasutades ja sõltuvalt suurusest tehakse järeldused tuberkuloosibatsilli olemasolu või puudumise kohta.

Reeglina mõõdetakse papule suurust läbipaistva joonlauaga. Läbi selle on tihendi servad paremini näha.

Sellele ravimile on kolm peamist reaktsiooni tüüpi:

• negatiivne, mille puhul papule suurus on kuni 1 mm või puudub täielikult;
• kahtlane - 2 kuni 4 mm;
• positiivne – üle 5 mm.

Positiivne reaktsioon tuberkuliinile jaguneb omakorda:

• nõrgalt positiivne (5-9 mm);
• keskmine (10-14 mm), mis avaldub riskirühma kuuluvatel lastel ja kokkupuutel avatud tuberkuloosihaigetega;
• väljendunud (15-16 mm);
• väljendunud või hüperergiline (alates 17 mm);
• visikulonekrootiline, mille puhul täheldatakse kudede nekroosi ja pustulite moodustumist.

Lisaks on valepositiivne reaktsioon. Seda peetakse kahtlaseks ja võib tekkida, kui lapsel on millegi suhtes allergia. Seda põhjustab ka mõni hiljutine nakkushaigus. Sellistel juhtudel on soovitatav jälgida lapse seisundit ja sageli määratakse immuunsust tugevdavaid ravimeid.

Mõnel juhul, eriti lapsel, kellel on kalduvus allergiatele, võib ilmneda üldine halb enesetunne, lümfadeniit ja lümfangiit, süstekoha sügelus ja valu, peavalu ja palavik. Ülitundlikkuse korral ravimi suhtes võivad tekkida külgnevate kudede villid ja nekroos, samuti anafülaktiline šokk.

Kuidas oma proovi eest hoolitseda

Kuni mõõtmiste tegemiseni ei tohi süstekohta vannis käies kriimustada, kreemiga määrida ega pesulapiga hõõruda. Võite proovi märjaks teha, kuid proovige nendel päevadel duši all käia. Samas ei pea seda kleeplindiga kinni keerama ega kilega mähkima, nagu seda tegid meie emad ja vanaemad. Vesi ei mõjuta tulemust kuidagi. See eelarvamus jäi peale Pirquet, kui Tuberkuliini nahale kriimustusse hõõruti. Nüüd on selle ravimi või selle analoogi Diaskintesti süstekoht suletud teatud tüüpi korgiga, mis on valmistatud hüübinud veretilgast. Ainus, mida ei soovitata, on vannis käia ja võimalusel hoiduda avavees ujumisest ja basseini külastamisest.

Vastunäidustused

Protseduuri ei tehta järgmistel juhtudel:

• nakkuslik karantiin lasteasutuses;
• allergia ilming;
• krooniliste või somaatiliste haiguste ägenemine, samuti 30 päeva pärast sümptomite kadumist;
• epilepsia;
• individuaalne talumatus ravimi suhtes;
• nahahaigused;
• bronhiaalastma;

Test on kooskõlastatud, kuna pärast profülaktilise süsti tegemist peab mööduma vähemalt 30 päeva. Enne Tuberculini või selle analoogi Diaskintesti manustamist on soovitatav mitte tarbida uusi tooteid, et välistada allergilise reaktsiooni ja sellest tulenevalt moonutatud tulemuste võimalus. Samal põhjusel proovige paar päeva enne protseduuri lapsele mitte anda neid toite, millel võib ilmselgelt olla negatiivne mõju. See kehtib eriti allergiliste laste kohta.

Alternatiiv tuberkuliinile

Tuberkuliini üks informatiivsemaid analooge on Diaskintest, mida on eespool juba korduvalt mainitud. Seda manustatakse ka subkutaanselt ja see on sama värvitu vedelik. See sisaldab kunstlikult loodud valke ESAT6/CFP10. Just nemad reageerivad Kochi batsilli olemasolule kehas, tuvastavad viiruse 90% täpsusega ja kõrvaldavad peaaegu täielikult valepositiivse reaktsiooni.

Diaskintesti kasutatakse haiguse diagnoosimiseks kõikides vanusekategooriates alates 1. eluaastast.

Selle abiga sõeluuring viiakse läbi tuberkuliini analoogina individuaalse talumatuse korral, samuti järgmistel juhtudel:

• kui patsient on ohus;
• positiivse reaktsiooniga Mantouxi testile, et kinnitada või ümber lükata viiruse olemasolu;
• jälgida ja kohandada tuberkuloosi ravi;
• otsese kontakti kaudu viirusekandjaga.

Diaskintesti ei kasutata patsientide valimiseks esmaseks BCG-ks või revaktsineerimiseks. Seda manustatakse rasedatele ettevaatusega, ainult meditsiinilistel põhjustel ja imetamise ajal on see täielikult lubatud. Muud vastunäidustused on samad tegurid, mis tuberkuliini puhul.

Tuberkuloosi diagnoosimise testi ülitäpseks analoogiks on lisaks Diaskintestile polümeeri ahelreaktsioon, mis võimaldab tuvastada mükobaktereid mis tahes bioloogilises materjalis. Seda meetodit ei kasutata laialdaselt selle kõrge hinna ja tehnilise keerukuse tõttu. Teine analoog on ensüümi immuunanalüüs, mille käigus uuritakse venoosset verd. See meetod on ebaefektiivne piirkondades, kus tuberkuloosinakkus on laialt levinud.

Video

Mida varem haigus avastatakse, seda lihtsam on seda ravida. See kehtib ka sellise ohtliku ja surmava haiguse kohta nagu tuberkuloos. Tänu tuberkuliinidiagnostikale ja Diaskintestile sai võimalikuks see avastada varases staadiumis ja alustada ravi. Vaadake videost, kuidas diagnostiline ravim toimib ja miks on nii oluline sellest protseduurist mitte loobuda.

Kas olete Tuberculini või selle analoogi Diaskintestiga vahetult tuttav? Seejärel ootame teie kommentaare, millest meie külastajad saavad palju kasulikku teavet.

Ühend: kuiv puhastatud tuberkuliini valgu derivaat (PPD). Puhastatud tuberkuliini standard sisaldab 50 000 rahvusvahelist ehk tuberkuliini ühikut (TU) 1 ml lahjendatud preparaadis.

Eesmärk: tuberkuloosi diagnoosimiseks.

Kasutusviis: intradermaalselt küünarvarre sisepinna keskmise kolmandiku piirkonda mahus 0,1 ml. Proov loendatakse 42 tunni pärast. Reaktsioon loetakse positiivseks, kui esineb vähemalt 5 mm läbimõõduga infiltraat.

Säilitustingimused: pimedas ja kuivas kohas +2° - +8°C juures.

Parim enne kuupäev: 5 aastat.

Puhastatud tuberkuliin standardlahjenduses

Ühend: puhastatud tuberkuliini lahus standardlahjenduses aktiivsusega 2,5 või 10 TE 0,1 ml-s koos fenooliga säilitusainena ja Tween-80-ga pesuainena, tagades ravimi bioloogilise aktiivsuse stabiliseerumise.

Eesmärk: tuberkuloosi diagnoosimiseks.

Kasutusviis: intradermaalselt (Mantouxi testi jaoks).

Säilitustingimused: kuivas kohas temperatuuril 0º - +4ºС.

Parim enne kuupäev: 1 aasta.

Leptospiroosi vaktsiini kontsentreeritud inaktiveeritud vedelik

Ühend: nelja seroloogilise rühma Leptospira inaktiveeritud kontsentreeritud kultuuride suspensioon: L. küsitlejad Icterohaemorraghiae copenhageni, L. küsitlejad Grippotyphosa grippotyphosa, L. küsitlejad Pomona mozdoc, L. küsitlejad Sejroe sejroe

Eesmärk: leptospiroosi ennetamiseks.

Kasutusviis: Vaktsiini süstitakse subkutaanselt abaluu alumise nurga piirkonda. Enne manustamist loksutatakse ravimiga ampull põhjalikult. Vaktsineerimine viiakse läbi üks kord annusega 0,5 ml. Revaktsineerimine viiakse läbi 1 aasta pärast ühekordse 0,5 ml annusega.

Säilitustingimused:

Parim enne kuupäev: 1,5 aastat.

Antileptospiroosi immunoglobuliin

Ühend: gamma-globuliini fraktsioon hüperimmuniseeritud härgade verest, mis sisaldab Leptospira antikehi (gripp, pomona, ikterohemorraagiline jt, kokku 6 serorühma).

Eesmärk: leptospiroosi raviks alates 8. eluaastast.

Kasutusviis: intramuskulaarselt annuses 3 kuni 10 ml, sõltuvalt haiguse vanusest ja raskusastmest, pärast keha esialgset desensibiliseerimist subkutaanse 0,1 ml lahjendatud 1:10 ja seejärel 0,1 ml lahjendamata ravimi subkutaanse manustamise teel. Järgmistel päevadel manustatakse 5-10 ml. Ravikuur on 3 päeva.

Säilitustingimused: pimedas ja kuivas kohas +2º - +8ºС.

Parim enne kuupäev: 2 aastat.

Allergeeni toksoplasmiin

Ühend: antigeenne kompleks, mis saadakse toksoplasmaga nakatunud valgete hiirte peritoneaalsest eksudaadist.

Eesmärk: toksoplasmoosi diagnoosimiseks.

Kasutusviis: rangelt intradermaalselt õla külgmise külje piirkonda annuses 0,1 ml; 5-7 dm kaugusele asetatakse kontroll soolalahusega. Reaktsioon registreeritakse 24 tunni pärast, positiivsel juhul 38 tunni pärast selle intensiivsus ei vähene. Hüpereemia ja üle 20 mm läbimõõduga infiltraadi juuresolekul - reaktsioon on järsult positiivne (++++), 15-20 mm - positiivne (+++), 10-14 mm - nõrgalt positiivne (++), läbimõõduga alla 10 mm - reaktsioon on negatiivne. Positiivsete reaktsioonide korral lokaalne muutused nahal kestavad 3-5 päeva.

Säilitustingimused: pimedas ja kuivas kohas +4º - +8ºС.

Parim enne kuupäev: 1 aasta.

BAKTERIAALSED PREPARAADID ENNETAMISEKS JA RAVIKS

Sisukord

FS.3.3.1.0023.15 Puhastatud tuberkuliin (PPD) (puhastatud tuberkuloosi allergeen)

VENEMAA FÖDERATSIOONI TERVISHOIMINISTEERIUM

FARMAKOPOEIA ARTIKKEL

Puhastatud tuberkuliin (PPD) FS.3.3.1.0023.15

(puhastatud tuberkuloosi allergeen) GF X asemel Art. 705,

FS 42-3302-96,

FS 42-3303-96

See farmakopöa monograafia kehtib puhastatud tuberkuliini (puhastatud tuberkuloosi allergeen) kohta, mis on puhastatud tuberkuloproteiin PPD (PPD - puhastatud valgu derivaat), mis on saadud inimese ja veise Mycobacterium tuberculosis (MBT) kultuuride kuumusega inaktiveeritud filtraatidest, mis on puhastatud bakterirakkudest ultrafiltrimise või muu sobiva meetodiga, millele järgneb sadestamine trikloroäädikhappega (TCA). Tuberkuliini intradermaalne manustamine (Mantouxi test) näitab hilist tüüpi ülitundlikkuse esinemist, mis on organismi sensibiliseerimise tagajärg BCG vaktsineerimise ajal või Mycobacterium tuberculosis'ega nakatumise tagajärg. Ravim on ette nähtud tuberkuloosi diagnoosimiseks, populatsiooni nakatumise määramiseks Mycobacterium tuberculosis'ega ning populatsioonide valimiseks vaktsineerimiseks ja tuberkuloosivastaseks revaktsineerimiseks.

TOOTMINE

Tööd mükobakteritega tuleks teha autonoomse sissepuhke- ja väljatõmbeventilatsiooniga varustatud ruumides, mis on eraldatud ruumidest, kus mükobakterite esinemine ei ole lubatud. Enne mükobakterite inokuleerimist tuleb kultuurisöötme steriilsust kontrollida. Volditud kilede kujul vedela sünteetilise söötme pinnal kasvatatud mükobakterikultuurid inaktiveeritakse autoklaavimisel temperatuuril 121 °C vähemalt 30 minutit või voolava auruga temperatuuril 100 °C 1 tund, filtreeritakse ja kontsentreeritakse ultrafiltrimisega.

Tuberkuloproteiini sadestamine viiakse läbi 50% TCA lahusega; setet pestakse väheneva kontsentratsiooniga TCA-ga, töödeldakse alkoholi ja eetriga, kuivatatakse ning kontrollitakse steriilsust ja autentsust. Pärast positiivsete tulemuste saamist ühendatakse need üheks pooltoodete pulbri (aine) seeriaks. Selliste seeriate järgnev koondamine üheks aineseeriaks on üks meetoditest pika säilivusajaga (20 aastat või rohkem) standardravimi saamiseks. Ainet kasutatakse puhastatud tuberkuliini standardlahjenduses (2 TU 0,1 ml-s), mis on ette nähtud tuberkuliini massdiagnostikaks, või puhastatud tuberkuliini lüofilisaadi valmistamiseks, mis on ette nähtud individuaalseks tuberkuliinidiagnostikaks (50 000 TU ampullis).

Varem on testitud ainete seeriat steriilsuse, sensibiliseerivate omaduste puudumise, spetsiifilise ohutuse (elusa mycobacterium tuberculosis'e puudumine), spetsiifilise aktiivsuse - 50 000 TU sisaldava kaalutud annuse määramise. Tuberkuliinide spetsiifilist aktiivsust väljendatakse tuberkuliiniühikutes (TU), mis on samaväärsed rahvusvaheliste tuberkuliiniühikutega (TU).

Anumat pulbrite (aine) seguga hoitakse eksikaatoris pimedas ja kuivas kohas. Iga 5 aasta järel testitakse ainet uuesti steriilsuse ja spetsiifilise aktiivsuse osas loomadel (annuse-kaalu kinnitus).

AINETESTID

Steriilsus

Aine peab olema steriilne. Aine lahustatakse 0,9% naatriumkloriidi lahuses kiirusega 1 mg 1 ml kohta. Määramine toimub vastavalt.

Valgu sisaldus

Peab olema vähemalt 75%. Määramine viiakse läbi kolorimeetrilise meetodi abil vastavalt üldfarmakopöa monograafiale "Üldlämmastiku määramine Nessleri reagendiga immunobioloogilistes ravimites".

Konkreetne tegevus

50 000 TU sisaldava PPD aine kaalutud annuse määramine. Määramine viidi läbi 18 sensibiliseeritud meriseal, võrreldes kaalutud pulbri (aine) lahjenduste aktiivsust PPD standardproovi (RM) aktiivsusega (puhastatud tuberkuliini spetsiifilise bioloogilise aktiivsuse RM). Loomad sensibiliseeritakse intradermaalse süstiga kõhupiirkonda (2–4 kohta) BCG vaktsiini või kuumusega tapetud tuberkuloosi mükobakterite mittetäielikus Freundi adjuvandis (0,5–1 mg mükobaktereid 1 looma kohta).

Kolm kaalutud portsjonit uuritavat ainet PPD, millest igaüks kaalub vähemalt 50 mg, lahustatakse fosfaatpuhverlahuses, pH (7,4 ± 0,05), nii et 1 ml ainet PPD sisaldab 20% vähem ja rohkem kui kaalutud doos. osa CO PPD-st (saa 3 põhilahust). Põhilahuse spetsiifilist aktiivsust võrreldakse CO PPD-ga, testides 6 sensibiliseeritud meriseaga. Selleks valmistatakse põhilahusest lahjendused suhtega 1:40; 1:200 ja 1:1000 ning tiitritud 5 vastu; 25 ja 125 TE CO, süstides 0,1 ml igat lahjendust intradermaalselt sensibiliseeritud merisigadele rühmas juhusliku proovivõtumeetodi abil (näiteks ladina ruudu meetod). Vastuseid võetakse arvesse 24 tunni pärast Statistiline analüüs põhineb asjaolul, et annuse ja toime logaritmiline suhe on lineaarne. Arvutatakse joonte keskmine kalle ja arvutatakse suhtelise aktiivsuse logaritm (log R) – doosi-efekti seose paralleelsete joonte vaheline kaugus. Suhteline aktiivsus (R) peaks olema võrdne (1,0 ± 0,2) usalduspiiridega 75–130% ( R= 0,95). Usalduspiirideks loetakse suhtelise aktiivsuse logaritmi ± 2 standardviga. Kui suuremal katsekogusel on RM PPD-ga võrreldes väiksem väärtus, tuleks portsjoneid suurendada ja tiitrida. Kui reaktsioonid väiksemale osale on suurema ulatusega võrreldes CO PPD-ga, tuleks tiitrimisel kasutada uuritava aine pulbri vähendatud portsjoneid.

Spetsiifiline kahjutus

Elus Mycobacterium tuberculosis'e puudumine määratakse merisigadel, keda peetakse tingimustes, mis välistavad nende saastumise elus Mycobacterium tuberculosis'ega. Aine lahust, mis sisaldab 50 000 TE/ml fosfaatpuhvris ilma säilitusaine ja stabilisaatorita mahus 10 ml, tsentrifuugitakse kiirusel 3000 p/min 30 minutit. Supernatandi vedeliku pealmine kiht (umbes 8 ml) eemaldatakse, sete resuspendeeritakse ja 1 ml süstitakse intraperitoneaalselt kahele 250–300 g kaaluvale meriseale, keda jälgitakse 42 päeva. Loomad peavad jääma terveks. 42 päeva pärast avatakse merisead ning tehakse siseorganite (põrn, kopsud, maks ja lümfisõlmed) makroskoopiline, histoloogiline ja bakterioloogiline uuring. Makroskoopiline ja mikroskoopiline uuring ei tohiks paljastada tuberkuloosiinfektsioonile iseloomulikke patoloogilisi tunnuseid. Bakterioloogiliste (kultuuriliste) uuringute jaoks homogeniseeritakse hoolikalt lümfisõlmed (kõik koos), põrn, ¼ maksast ja üks kops. Homogenisaate töödeldakse 10 minutit 5% väävelhappe lahusega, tsentrifuugitakse 15 minutit kiirusel 3000 p/min, resuspendeeritakse 0,9% naatriumkloriidi lahuses ja inokuleeritakse Lowenstein-Jenseni munasöötmesse (iga elundi kohta vähemalt 5 katsutit). Põllukultuure hoitakse 45 päeva temperatuuril 37 °C. Söötme pinnal ei tohiks olla mükobakterite kolooniate kasvu.

Sensibiliseerivad omadused

Peab olema puudu. Merisigadele (3 isendit), kes kaaluvad 300–350 g, süstitakse intradermaalselt kolm korda 5-päevase intervalliga 125 TU 0,1 ml aine lahjenduses. 15 päeva pärast süstitakse neile ja kolmele tervele meriseale intradermaalselt 500 TU 0,1 ml uuritavas aines. Aine põhilahusest valmistatakse 0,9% naatriumkloriidi lahuse abil lahjendused 125 ja 500 TE. Vastust võetakse arvesse 24 tunni pärast, mõõtes erüteemi 2 üksteisega risti asetsevat diameetrit. Esimese 3 merisea reaktsioonid ei tohiks erineda kontrollloomade reaktsioonidest ( lk> 05). Loomi peetakse tingimustes, mis välistavad mükobakteritega saastumise.

TUBERKULIINI TEST

Kirjeldus

Puhastatud tuberkuliin standardlahjenduses on värvitu läbipaistev vedelik ilma võõrkehadeta. Puhastatud tuberkuliin (lüofilisaat) on hallikasvalge või kreemja värvusega poorne mass või amorfne pulber, mis lahjendatakse testimiseks 1 ml kaasasolevas lahustis.

Autentsus

Põhjused, kui manustatakse intradermaalselt merisigadele, kes on sensibiliseeritud BCG vaktsiiniga, 12–16-päevase BCG kultuuriga või surmatud Mükobakterid tuberkuloos, positiivsed reaktsioonid (nagu on kirjeldatud lõigus “Eritegevus”).

Läbipaistvus

Peab olema läbipaistev. Määramine toimub visuaalselt vastavalt.

Chroma

Peaks olema värvitu. Määramine toimub visuaalselt vastavalt.

pH

7.35-7.45. Määramine toimub potentsiomeetrilise meetodiga vastavalt üldfarmakopöa monograafiale “Ionomeetria”.

Steriilsus

Peab olema steriilne. Määramine toimub otsekülvi või membraanfiltrimise meetodil.

Ebanormaalne toksilisus b

Peab olema mittetoksiline. Määramine toimub vastavalt. Testitav annus mahus 0,5 ml manustatakse intraperitoneaalselt 5 valgele hiirele, kes kaaluvad 17–20 g; subkutaanselt 2 meriseale kaaluga 250–300 g, testannus mahus 1 ml. Loomade vaatlusperiood on 7 päeva.

Konkreetne tegevus

Puhastatud tuberkuliini eriaktiivsuse indeks (I) standardlahjenduses (testitava ravimi reaktsioonide summa ja CO PPD reaktsioonide summa suhe peaks olema vahemikus 0,95 kuni 1,05, kui ei esine olulisi erinevusi keskmised reaktsioonid standard- ja katseproovidele. Katse viidi läbi kuue valgenahalise või albiinoga meriseaga, kes kaaluvad (350 ± 50) g ​​ja olid sensibiliseeritud ülalkirjeldatud viisil, et määrata aine doosi-kaal.Mõlemal küljel , asetatakse 4 proovi (eraldi süstaldesse) 2 TE-ga 0,1 ml katseseerias ja 2 TE SO PPD-ga, vaheldumisi 8 süstalt ravimitega, mis on eelnevalt kodeeritud juhusliku proovivõtu meetodil.Reaktsioonid registreeritakse 24 tunni pärast.

Puhastatud tuberkuliini lüofilisaadi suhteline aktiivsus (R) peaks olema võrdne (1,0 ± 0,2) usalduspiiridega 75–130% ( R= 0,95). Katsesarja põhilahjendusest, mis sisaldab 50 000 TE-d 1 ml-s (ampulli lisatakse 1 ml kaasasolevat lahustit), valmistatakse 3 lahjendust: 5; 25 ja 125 TE 0,1 ml-s, kasutades selleks 0,9% naatriumkloriidi lahust. Määramine toimub vastavalt jaotisele “Eriaktiivsus - kaalutava aine doosi määramine”, kasutades 5; 25 ja 125 TE 0,1 ml CO PPD-s.

Kui testi tulemus on väljaspool vastuvõetavaid piire, korratakse testi. Esimese ja korduva testi tulemused on keskmistatud.

Tootmistüved

Valmistamiseks kasutatakse Mycobacterium tuberculosis'e tuberkulinogeenseid tüvesid. M. mugulculosis Dt/Tüvi ja/või T-3480 ja M. bovis "Vallee" PPA riiklikust kogust. Mükobakterite kasvatamiseks kasutage mitte rohkem kui 2 passaaži tahkel söötmel, mitte rohkem kui 2 passaaži vedelal kartulisöötmel ja mitte rohkem kui 8 passaaži sünteetilisel Linnikova-Mogilevski söötmel.

Puhastatud tuberkuloosi allergeen

Kasutusjuhend.

Puhastatud tuberkuloosi allergeen standardlahjenduses (puhastatud tuberkuliin standardlahjenduses), lahus intradermaalseks manustamiseks.

Puhastatud standardlahjenduses tuberkuliin on inimeste ja veiste mycobacterium tuberculosis kuumusega surmatud kultuuride filtraatide segu, mis on puhastatud ultrafiltrimisega, sadestatud trikloroäädikhappega, töödeldud anesteesia eesmärgil etüülalkoholi ja eetriga, lahustatud stabiliseerivas lahustis. Üks annus (0,1 ml) ravimit sisaldab: toimeainet - allergeen tuberkuloproteiin - 2 TU (tuberkuliiniühikut); abiained - naatriumvesinikfosfaatheptahüdraat - 0,783 mg, naatriumkloriid - 0,457 mg, kaaliumdivesinikfosfaat - 0,063 mg, polüsorbaat - 80 (stabilisaator) - 0,005 mg, fenool (säilitusaine) - 0,25 mg.

Ravim on värvitu läbipaistva vedeliku kujul, mis ei sisalda setet ega võõrlisandeid.

Farmakoterapeutiline rühm.

MIBP on allergeen.

ATX kood. V01AA20.

Bioloogilised ja immunoloogilised omadused.

Ravimi toimeaine, allergeen - tuberkuloproteiin, põhjustab nakatunud või vaktsineeritud isikutel intradermaalse tuberkuliinitesti tegemisel spetsiifilise viivitatud tüüpi ülitundlikkusreaktsiooni lokaalse reaktsiooni kujul - hüpereemia ja infiltraat (papulid).

Eesmärk.

Ravim on ette nähtud tuberkuliini massidiagnostikaks:

• isikute valimine BCG revaktsineerimiseks, samuti enne 2 kuu vanuste või vanemate laste esmast vaktsineerimist;
• tuberkuloosi diagnostika, sh laste ja noorukite tuberkuloosi esmaste ja lokaalsete vormide varaseks avastamiseks;
• Mycobacterium tuberculosis'ega nakatumise määramine.

Kasutusjuhised ja annustamine.

Kasutatakse intradermaalseks Mantouxi testiks. Ravimit manustatakse rangelt intradermaalselt. Mantouxi testi tuleb teha patsientidele istuvas asendis, sest Emotsionaalselt labiilsetel inimestel võib süst põhjustada minestamist. Intradermaalse testi läbiviimiseks kasutatakse ühegrammisi ühekordseid lühikeste õhukeste nõeltega tuberkuliinisüstlaid.

Mantouxi testis on keelatud kasutada aegunud süstlaid ja nõelu või insuliinisüstlaid.

Ampull ravimiga pühitakse põhjalikult 70° etüülalkoholiga niisutatud marli abil, seejärel viilitakse ampulli kael ampullnoaga ja murtakse ära. Nõelaga nr 0845 tõmmatakse süstlasse 0,2 ml, s.o 2 doosi tuberkuliini, sisestatakse õhuke nõel ja lahus lastakse kuni 0,1 ml märgini steriilsesse vatitupsu. Pärast avamist võib ampulli säilitada aseptilistes tingimustes mitte rohkem kui 2 tundi.

Küünarvarre keskmise kolmandiku sisepinnal töödeldakse nahapiirkonda 70° etüülalkoholiga ja kuivatatakse steriilse vatiga. Tervishoiutöötaja vasaku käega fikseerib patsiendi küünarvarre naha altpoolt nii, et see on sisepinnal venitatud. Õhuke nõel, lõigatud ülespoole, sisestatakse naha ülemistesse kihtidesse paralleelselt selle pinnaga - intradermaalselt. Pärast nõela sisestamist nahka süstitakse süstlast 0,1 ml ravimit rangelt vastavalt skaala jaotusele, s.o. 1 annus (2 TE). Õige süstimistehnikaga moodustub nahasse “sidrunikoore” kujul valkjas paapul läbimõõduga 7-10 mm. Iga uuritava inimese jaoks kasutatakse eraldi steriilset süstalt ja nõela.

Mantouxi testi teeb vastavalt arsti ettekirjutusele spetsiaalse väljaõppe saanud õde, kellel on dokument - tuberkuliinidiagnostika läbiviimise luba.

Tulemuste arvestus.

Tuberkuliinitesti tulemusi hindab arst või eriväljaõppe saanud õde. Mantouxi testi tulemust hinnatakse 72 tunni pärast, mõõtes infiltraadi (papulite) suurust millimeetrites. Läbipaistva millimeetrijaotusega joonlaua abil mõõdetakse ja registreeritakse infiltraadi põikisuurus (käsivarre telje suhtes). Hüpereemiat võetakse arvesse ainult infiltratsiooni puudumisel. Arvesse võetakse vastust Mantouxi testile:

• negatiivne - infiltraadi (papulide) ja hüpereemia täieliku puudumisel või torkimisreaktsiooni olemasolul (kuni 1 mm);
• kaheldav - suurusega (2-4 mm) infiltraadiga või ainult mis tahes suurusega hüperemia ilma infiltratsioonita;
• positiivne - 5 mm või suurema läbimõõduga infiltraadi juuresolekul;
• hüperergiline - lastel ja noorukitel reaktsioon infiltraadi läbimõõduga 17 mm või rohkem, täiskasvanutel - 21 mm või rohkem, samuti vesikulonekrootilised reaktsioonid, olenemata infiltraadi suurusest koos lümfangiidiga või ilma.

Reaktsioon tuberkuliini manustamisele.

Hilinenud tüüpi ülitundlikkusreaktsioon (DTH) sõltub organismi spetsiifilise reaktsioonivõime tasemest. Hormoonasendusravi kõrghetk saabub 48–72 tunni pärast, selleks ajaks kaob kohese lokaalse reaktsiooni (hüpereemia) ilming.

Tuberkuliinitesti tegemise vastunäidustused:

Sagedased nahahaigused, ägedad, kroonilised nakkus- ja somaatilised haigused ägenemise ajal; allergilised seisundid (reuma ägedas ja alaägedas faasis, bronhiaalastma, ägenemise ajal väljendunud nahailmingutega idiosünkraatiad), epilepsia. Mantouxi test tehakse 1 kuu pärast kõigi kliiniliste sümptomite kadumist või kohe pärast karantiini lõpetamist. Mantouxi testi ei ole lubatud läbi viia nendes lasterühmades, kus on lasteinfektsioonide karantiin. Ennetavad vaktsineerimised võivad mõjutada tundlikkust tuberkuliini suhtes. Sellest lähtuvalt tuleb planeerida tuberkuliinidiagnostika enne ennetavaid vaktsineerimisi erinevate infektsioonide vastu. Kui on tehtud ennetav vaktsineerimine, tuleks tuberkuliinidiagnostika läbi viia mitte varem kui 1 kuu pärast vaktsineerimist.

Vastunäidustuste väljaselgitamiseks viib arst (õde) tuberkuliini testimise päeval läbi testitavate isikute küsitluse ja läbivaatuse.

Kõrvalmõju.

Mõnikord on halb enesetunne, peavalu ja kehatemperatuuri tõus. Inimestel, kellel on tuberkuliini suhtes kõrge HAR, võib lokaalse reaktsiooniga kaasneda lümfadeniit.

Koostoimed teiste ravimitega.

Tervetel inimestel, kellel on küsitav või positiivne reaktsioon Mantouxi testile, ja lastele, kellel on tuberkuliini suhtes negatiivne reaktsioon, kuid keda ei ole vaktsineeritud BCG-ga, võib kõik ennetavad vaktsineerimised läbi viia kohe pärast Mantouxi testi tulemuste hindamist.