Artikli sisu
Stafülokokk
Avastas L. Pasteur 1880. Perekonda Staphylococcus kuulub 19 liiki, millest ainult 3 liiki on ökoloogiliselt seotud inimkehaga: S. aureus - Staphylococcus aureus, S. epidermidis - Staphylococcus epidermidis ja S. saprophyticus - Staphylococcus saprophytic. Haigusi, mida iseloomustavad mitmesugused kliinilised ilmingud, põhjustavad aureus, harvem epidermaalne ja veelgi harvem saprofüütne stafülokokk.Morfoloogia ja füsioloogia
Üksikud stafülokokkide rakud, millel on tavalise palli kuju, moodustavad paljunemisel klastreid viinamarjakobarate kujul (staphyle - viinamarjakobar). Patoloogilisest materjalist, eriti mädast, valmistatud preparaatides paiknevad stafülokokid paarikaupa või väikestes kobarates. Staphylococcus aureus moodustab mikrokapsli. Stafülokokid on oksüdatiivset ja fermentatiivset tüüpi ainevahetusega kemoorganotroofid. Nad lagundavad palju süsivesikuid aeroobsetes ja anaeroobsetes tingimustes. Diagnostilise tähtsusega on võime kääritada glükoosi ja mannitooli anaeroobsetes tingimustes. Stafülokokk- fakultatiivsed anaeroobid, kuid arenevad paremini aeroobsetes tingimustes. Tiheda toitainekeskkonna pinnal moodustavad nad ümmargused, kumerad, pigmenteerunud (kuldsed, kollakad, sidrunkollased, valged) siledate servadega kolooniad; vedelas keskkonnas annavad ühtlase hägususe. Laborites kasutavad nad stafülokokkide võimet paljuneda keskkondades, kus on palju (6-10%) naatriumkloriidi. Teised bakterid ei talu sellist soola kontsentratsiooni, mille tulemusena on soolakeskkond stafülokokkide suhtes selektiivne. Hemolüsiine tootvad Staphylococcus aureus'e tüved annavad vereagaril kolooniad, mida ümbritseb hemolüüsi tsoon (joonis 20.2 siseküljel). Stafülokokid toodavad ensüüme, mis fermenteerivad paljusid süsivesikuid. Glükoosi kääritamise katsel anaeroobsetes tingimustes on diferentsiaaldiagnostiline tähtsus.Antigeenid
Stafülokokkidel on mitmesuguseid antigeene, mis paiknevad peamiselt rakuseinas, S. aureusel on ka kapsli antigeen. Rakuseina komponentidest on antigeenideks peptidoglükaan, valk A, mis paikneb peptidoglükaani välisküljel. Valgu A olemasolu on iseloomulik S. aureusele. See valk on võimeline mittespetsiifiliselt kombineerima IgG Fc-fragmentidega ja seetõttu on valku A sisaldavad stafülokokid võimelised aglutineerima normaalse inimese seerumiga ja andma mittespetsiifilise sära, kui neid töödeldakse heteroloogsete fluorestseeruvate seerumitega. S. aureuse kapsli antigeenil on keeruline keemiline struktuur. See koosneb uroonhapetest, monosahhariididest ja aminohapetest. Tüübispetsiifilisi antigeene on kirjeldatud ka stafülokokkide puhul.Patogeensus
Stafülokokkide, eriti S. aureuse virulentsusfaktorid on seotud nende kleepumisega tundlike rakkude retseptoritega, koloniseerimise ja agressiivsete omadustega, mis väljenduvad fagotsütoosi pärssimises. Stafülokokkide kleepuvusvõime väljendub erinevate kudede rakkude ja rakkudevaheliste ainetega (epiteel, fibronektiin, kollageen, fibrinogeen jne). Sellisel juhul toimub stafülokokkide adhesioon erinevatele rakkudele ja substraatidele teatud adhesiinide tõttu. Seega vastutavad teikhoiinhapped epiteelirakkude adhesiooni eest. Stafülokokid ei kleepu trombide külge, kui need on kaetud mädaga, kuna need blokeerivad fibronektiini retseptoreid. Kapselpolüsahhariidid soodustavad ka adhesiooni, eriti endoproteeside külge. Nende kõige olulisem omadus on suure hulga immunotsütokiinide indutseerimine, mis põhjustab põletikukoldeid ja abstsesside teket. Kapsli polüsahhariidid pärsivad fagotsüütiliste rakkude aktiivsust. A-valgul, mis sisaldub Staphylococcus aureuse rakuseinas, on antifagotsüütilised omadused. See seondub fibronektiiniga, kleepuva glükoproteiiniga, mis katab rakkude pinda ja mida leidub alusmembraanides, sidekoe põhiaines, ning ringleb ka veres. Sellel ei ole väljendunud toksilist toimet. Seega on valk A seotud adhesiooniga ja sellel on agressiivne toime. Peamiselt S. aureus'e poolt toodetud eksoensüümidest mängivad haiguste patogeneesis olulist rolli plasmakoagulaas, hüaluronidaas, letsitinaas, fibrinolüsiin ja DNAas.Plasmokoagulaas põhjustab vereplasma hüübimist. Seda ensüümi tootvad stafülokokid on kaetud fibriini ümbrisega, mis kaitseb neid fagotsütoosi eest. Koagulaasi suured kontsentratsioonid, mis ringlevad patsiendi kehas, põhjustavad vere hüübimise vähenemist, hemodünaamika halvenemist ja kudede progresseeruvat hapnikupuudust.
Hüaluronidaas, mille substraadiks on hüaluroonhape, soodustab stafülokokkide levikut kudedes nende läbilaskvuse rikkumise tõttu.
Letsitinaas hävitab letsitiini leukotsüütide ja teiste rakkude rakumembraanides, mis aitab kaasa leukopeenia tekkele. Fibrinolüsiin lahustab fibriini, mis piirab lokaalset põletikulist fookust, mis viib infektsiooni üldistamiseni. Teiste stafülokoki ensüümide (nukleaasid, lipaasid, proteinaasid, fosfataasid), mis sageli kaasnevad koagulaasi aktiivsusega, patogeneetilised omadused ei ole selgelt määratletud. Stafülokoki infektsioonide patogeneesis osalevatest ensüümidest on S. aureusele iseloomulikud vaid koagulaas ja osaliselt DNAaas. Teised ensüümid on muutlikud.
Toksiinid
Stafülokokid eritavad mitmeid toksiine, mis erinevad üksteisest oma toimemehhanismi poolest. Nende hulka kuuluvad membraani kahjustavad toksiinid või membraanitoksiinid. Nad moodustavad kanaleid erütrotsüütide, leukotsüütide ja teiste rakkude tsütoplasmaatilises membraanis, mis põhjustab osmootse rõhu häireid ja vastavate rakkude lüüsi. Varem nimetati neid hemolüsiinideks, uskudes, et need lüüsivad ainult punaseid vereliblesid. Membranotoksiinid erinevad üksteisest antigeensete omaduste, sihtmärgi ja muude omaduste poolest, β-toksiinil on ka dermonekrootiline ja kardiotoksiline toime. See on valk, millel on väljendunud immunogeensed omadused. Sellest saadakse toksoid, mida kasutatakse stafülokokihaiguste raviks ja profülaktikaks, β-toksiin pärsib koos membraani kahjustava toimega erütrotsüütidele ja sidekoerakkudele polümorfonukleaarsete leukotsüütide kemotaksist, x-toksiin hävitab erütrotsüüte, leukotsüüdid ja sidekoe rakud.Staphylococcus aureus võib toota histotoksiine, sealhulgas enterotoksiine, mis põhjustavad toidumürgitust. Tuntud on 6 enterotoksiini (A, B, C, D, E, F), mis erinevad antigeensete omaduste poolest. Mõned stafülokokid toodavad eksotoksiini, mis põhjustab toksilise šoki sündroomi. Enamasti on need stafülokokid naiste kuseteede elanikud. Selle toksiini toimemehhanismiks on monotsüütide ja makrofaagide hüperaktiveerimine, millele järgneb IL-1, TNF (kasvaja nekrotiseeriv faktor) hüperproduktsioon. Seega on sellel toksiinil kõik superantigeenidele omased omadused. See on valk, mille moodustumist kodeerivad bakterikromosoomis paiknevad kromosomaalsed ja plasmiidsed geenid (profaag). Lisaks kaudsele mõjule avaldab see eksotoksiin otsest mõju vere kapillaaridele, suurendades nende läbilaskvust. Haigus lõpeb sageli surmaga.
Patogenees
Staphylococcus aureus on inimese patoloogias esmatähtis. See võib inimkehasse siseneda mitmel viisil. Stafülokokkidel on mitme elundi tropism, mis on seotud nende võimega kleepuda erinevate inimkudede ja -organite rakuretseptoritele. Nende pantroopsus väljendub võimes põhjustada mädaseid-põletikulisi protsesse nahas, nahaaluskoes, lümfisõlmedes (keetmised, karbunklid, mastiit, abstsessid jne), hingamisteedes (bronhiit, kopsupõletik, pleuriit), ENT organites (kõrvapõletik, kurguvalu, sinusiit, tonsilliit jne), nägemisorganid (konjunktiviit, sarvkesta haavandid), sapiteed (koletsüstiit, kolangiit jne), urogenitaalorganid (glomerulonefriit, uretriit, prostatiit jne), luu-lihassüsteem (osteomüeliit). artriit, müosiit) ja ka toidumürgitus. Igasuguse lokaalse protsessi üldistamine võib põhjustada sepsise või septikopeemia. Ägedaid soolehaigusi (AID) põhjustavad vastsündinutel stafülokokid. Stafülokokid võivad põhjustada ägedate hingamisteede haiguste raskeid vorme, samuti väikelastel meningiiti.Immuunsus
Terve inimese kehal on märkimisväärne resistentsus stafülokokkide suhtes. Stafülokoki infektsiooni järel ilmuvad verre antitoksiinid. Antitoksiini tuvastamine näitab stafülokokkide immuunsuse intensiivsust. A-antitoksiini esinemine inimese veres tiitris üle 2 RÜ viitab hiljutisele stafülokoki etioloogiaga haigusele.Kokkupuutel keskkonnas laialt levinud stafülokokkidega, samuti minevikuhaiguste tagajärjel indutseeritakse humoraalne immuunvastus, mille tulemusena moodustuvad antikehad mikroobirakkude antigeenide, toksiinide ja ensüümide vastu. Rakuline immuunvastus väljendub fagotsütoosi pärssimises. S. aureuse virulentsete tüvede resistentsust fagotsütoosi suhtes võib seostada nende võimega moodustada in vivo kapsel, samuti koagulaasi tootmisega, mis moodustab bakterite ümber fibriini. Valk A häirib fagotsütoosi, seondudes IgG Fc piirkondadega. Mõnel juhul täheldatakse organismide spetsiifilist sensibiliseerimist. Sekretoorne IgA, mis tagab limaskestade lokaalse immuunsuse, on eriti oluline stafülokoki infektsioonide korral. Ökoloogia ja epidemioloogia. Stafülokokid on looduses laialt levinud. Neid leidub inimeste nahal ja limaskestadel ning loomadel. Iga stafülokoki tüüp jaguneb ökoloogilisteks variantideks (ökovarid). Liik S. aureus sisaldab 6 ökovari: A, B, C, D, E ja F. Nende ökovaride peamised peremehed on vastavalt inimesed, sead, kodulinnud, veised, lambad, jänesed, koerad ja tuvid. Staphylococcus aureuse reservuaariks on terved kandjad ja erinevate stafülokoki kahjustustega patsiendid. Suurimat ohtu stafülokokkide leviku osas esindavad bakterikandjad, kelle patogeensed stafülokokid leitakse ülemiste hingamisteede limaskestadel, eriti ninakanalite eesmistel osadel, samuti nahakahjustustega haiged inimesed. Stafülokokid on keskkonnategurite suhtes üsna vastupidavad. Nad taluvad hästi kuivamist ja püsivad tolmus kaua elujõulised.
Stafülokoki infektsioonid
Perekonda Staphylococcus kuuluvad sfäärilised, mitteliikuvad, asporogeensed, grampositiivsed, fakultatiivsed anaeroobsed bakterid, mis kuuluvad sugukonda Mycosocococae. D. Bergi bakterite määraja annab 29 tüüpi stafülokokkide erinevad omadused. Need on jagatud kahte rühma - koagulaaspositiivsed ja koagulaasnegatiivsed. Esimesse rühma kuuluvad S. aureus, S. intermedius ja S. hyicus. nende roll nakkuspatoloogias on samaväärne. Sagedamini põhjustab erinevaid haigusi inimestel ja loomadel S. aureus, harvemini - S. hyicus. S. intermedius on patogeenne ainult loomadele. Aastaid peeti koagulaasnegatiivseid stafülokokke mittepatogeenseteks. Kuid nüüd on see vaatenurk muutunud. Seoses keskkonnaolukorra halvenemisega enamikus riikides ja sellega seotud loomuliku immuunsuse vähenemisega on sagenenud kudede ja elundite mädased-septilised kahjustused, mida põhjustavad inimese nahal ja limaskestadel leiduvad koagulaasnegatiivsed liigid (S. epidermidis). , S. auricularis, S. capitis, S.cohnii, S.haemolyticus, S.hominis, S.lentus, S.saprophyticus, S.schleiferi, S.simulans, S.wameri, S.xylosus ma in.).Epidemioloogide, mikrobioloogide ja arstide seas on üsna laialt levinud arvamus, et mittepatogeenseid stafülokokke tänapäeval ei eksisteeri. Üha sagedasemad on juhtumid, kus verest, kudedest ja elunditest eraldatakse stafülokoki kultuurid ilma patogeensuse markeriteta. Kui need aga organismist väljutatakse, kaovad kõik haigusnähud. Seda kõike tuleb stafülokoki infektsioonide laboratoorse diagnostika läbiviimisel arvesse võtta. Kahjuks on meie riigis tavapärastes bakterioloogilistes laborites endiselt võimalik tuvastada ainult S. aureus, S. epidermidis ja S. saprophyticus.
Stafülokokid mõjutavad kõige sagedamini nahka, selle lisandeid ja nahaalust kude. Need põhjustavad paise, karbunkleid, kurjategijaid, paronühhiat, abstsesse, flegmoone, mastiiti, lümfadeniiti, haavade, sealhulgas operatsioonitubade, mädanemist. Lastel on stafülokokid stafülodermia, epideemiliste pustulite ja impetiigo põhjustajad. neid eraldatakse pleuriidi, bronhiidi, kopsupõletiku, peritoniidi korral. Need võivad põhjustada tonsilliiti, tonsilliiti, põskkoopapõletikku, kõrvapõletikku, konjunktiviiti ja mõnevõrra harvemini meningiiti, ajuabstsesse, müokardiiti, endokardiiti, artriiti ja vaskulaarsete proteeside infektsioone. Väga ohtlikud toidumürgistuse infektsioonid, enterokoliit, koletsüstiit, põiepõletik, püeliit, püelonefriit. Verre või luuüdi tungimisel põhjustavad nad sepsist, osteomüeliiti ja toksilise šoki sündroomi. Kuid kõiki stafülokoki etioloogiaga haigusi ei peeta väga nakkavateks.
Materjali võtmine uurimistööks
Stafülokoki infektsioonide puhul uuritakse mäda, verd (sepsise korral), limaskestade eritist, röga, põletikulist eksudaati, tserebrospinaalvedelikku, haava sisu, pleuraefusiooni, sappi, uriini. Toksilise infektsiooni kahtluse korral - oksendamine, maoloputus, väljaheited, toidujäägid (eriti kodujuust, piim, saiakesed, pirukad, kreemid, jäätis jne) Sanitaar- ja bakterioloogilise kontrolli käigus käte, laua ja muude esemete pesemine uuritakse. Bakterikandjate puhul võetakse materjal tampooniga neelust ja ninakäikudest eraldi.Lahtiste mädasete kahjustuste korral võetakse pärast haavaplaadi eemaldamist materjal steriilse vatitikuga, mis võib sisaldada saprofüütilist mikrofloorat õhust, nahast jne. Suletud abstsesside korral tehakse süstlaga punktsioon. Orofarünksi ja ninaneelu lima võetakse steriilse tampooniga. Röga ja uriin kogutakse steriilsetesse katsutitesse ja purkidesse. Küünarliigese veenist võetud veri (10 ml) ja seljaaju kanali punktsiooni ajal tserebrospinaalvedelik külvatakse aseptiliselt patsiendi voodi kõrvale 100 ml suhkrupuljongisse. Soovitatav on lisada veri (enne hüübimist) kiiresti otse süstlast puljongipudelisse, segada hoolikalt, vältides trombi teket. Vereproove ei tohi külmutada. 25% stafülokoki sepsise juhtudest võib bakterite arv veres (CFU) olla alla 1/ml. Sellise olukorra kahtluse korral tuleks külvata 25-30 ml verd.
Bakterioskoopiline uuring
Peaaegu kõikidest uuritavatest materjalidest (sõnnik, haava sisu, eksudaat, röga, uriinisete jne) tehakse bakterioloogilise lingiga määrded, värvitakse Gramiga ja uuritakse mikroskoobiga. Ainult verest ja tampooniproovidest määrdeid ei tehta, kuna need sisaldavad vähe mikroorganisme. Tüüpilistel juhtudel on stafülokokid sfäärilised, lillat värvi ja paiknevad asümmeetrilistes kobarates, kuid on ka üksikuid rakke, paare või märkmikke.Viimasel ajal on antibiootikumide laialdase kasutamise tõttu muutunud stafülokokkide morfoloogia ja nende tüüpilist asukohta mädaplekkides sageli ei täheldata. Sellega seoses on sageli praktiliselt võimatu eristada stafülokokke streptokokkidest nende morfoloogia ja suhtelise asukoha järgi. Seetõttu on vaja puhaskultuur külvata, isoleerida ja identifitseerida. Kuid esmase mikroskoopia abil saab anda ka esialgse vastuse, kui tuvastatakse tüüpilised korrapärase ümmarguse kujuga grampositiivsed kookid, mis paiknevad kobarates ja vaateväljas on palju baktereid. Samuti võimaldab see valida külviks vajalikke selektiivsöötmeid ja vahetult määrata sõnniku mikrofloora tundlikkust antibiootikumide suhtes juba enne puhaskultuuri eraldamist.
Bakterioloogiline uuring
Patsientidelt ja bakterikandjatelt saadud materjal nakatatakse kohe või mitte hiljem kui 3-4 tundi pärast kogumist, eeldusel, et seda hoitakse külmas.Esimesel päeval nakatatakse silmuse, spaatliga või otse tampooniga vereagarile ja stafülokokkide suhtes selektiivne sööde (kollane-sool (YSA) või piima-kollane-soolagar (MLSA). Inokulatsiooniga nõusid inkubeeritakse 37 °C juures 48 tundi või 24 tundi termostaadis ja veel 24 tundi toatemperatuuril hea valgus.Kui uuritavas materjalis on vähe baktereid (mikroskoopia andmed),võta rikastamiseks,tehakse ka tioglükolaadisöötmes.Teisel päeval inokuleeritakse suhkrupuljongist määratud selektiivsöötmele,massiivsus kasvu ja kolooniate olemust uuritakse pärast muude materjalide inokuleerimist.Vereagaril moodustavad stafülokokid läbipaistmatud, kergelt kumerad keskmise suurusega kolooniad, millel on sile, läikiv, nagu poleeritud pind, selgelt piiritletud serv, õline konsistents.Tekivad patogeensed tüved. läbipaistvad hemolüüsi tsoonid kolooniate ümber. Selektiiv-diferentsiaalsel söötmel kasvavad reeglina ainult stafülokoki kolooniad. Eelkõige moodustavad nad munakollase-soolagaril kolooniaid, mille ümber on hägune tsoon ja perifeeriasse iseloomulik sillerdav halo (letsitovilaasi reaktsioon). Piima-kollase-soola agar paljastab pigmendi olemasolu, mis võib olla kuldne, kollakas, valge, kollane, oranž jne.Igat tüüpi kolooniatest valmistatakse äigepreparaadid, värvitakse Gramiga ja uuritakse mikroskoobiga, paljastades tüüpilised grampositiivsed stafülokokid. Vähemalt kaks tüüpilist või kahtlast stafülokokkide kolooniat kultiveeritakse agari kaldpindadele. Kõigepealt sõelutakse välja hemolüüsiga kolooniad ja need, mis andsid positiivse letsitotelaasi reaktsiooni. Selliste kolooniate puudumisel uuritakse vähemalt kahte pigmenteerunud kolooniat, mille mikroskoopias leiti tüüpilised stafülokokid. Kultuuridega katseklaasid asetatakse 18-20 tunniks termostaadi temperatuurile 37 °C.
Järgmistel päevadel tehakse kindlaks isoleeritud puhaskultuurid, mille puhul kontrollitakse nende morfoloogilisi ja tinctoriaalseid omadusi (Gram-värv), plasmakoagulandi aktiivsust ja muid stafülokokkidele iseloomulikke teste.
Plasmokoagulaas
Plasmokoagulaas tuvastatakse, lisades eraldatud kultuuri tsitreeritud küüliku plasmat sisaldavasse katseklaasi. Seda saab valmistada igas laboris. Küüliku südamest võetakse 8 ml verd, asetatakse katseklaasi 2 ml 5% naatriumtsitraadiga ja asetatakse külmkappi. Pärast moodustunud elementide täielikku sadestamist aspireeritakse plasma steriilsesse torusse. Külmkapis säilib 8-10 päeva. Enne kasutamist lahjendatakse 1:5 (1 ml plasmat ja 4 ml isotoonilist naatriumkloriidi lahust) ja valatakse 0,5 ml steriilsetesse aglutinatsioonitorudesse. Stafülokoki kultuuri täielik silmus emulgeeritakse plasmas ja asetatakse 3 tunniks termostaadi, seejärel jäetakse 18-20 tunniks toatemperatuurile. Plasma koagulatsiooni esialgne hindamine viiakse läbi 3 tunni pärast, viimane - teisel päeval. Väga mugav on kasutada standardset kuiva tsitraatküüliku plasmat. Enne kasutamist lisage ampulli 1 ml isotoonilist naatriumkloriidi lahust ja pärast täielikku lahustumist lahjendatakse see 1:5. Inimese plasma ei sobi plasmakoagulatsioonireaktsiooni määramiseks, kuna see võib sisaldada säilitusaineid, ravimeid ja antikehi, mis võivad pärssida plasmakoagulaasi moodustumist.Kui isoleeritud külv põhjustab hemolüüsi, koaguleerib plasma ja annab positiivse letsitovilaasi reaktsiooni, võib juba kolmandal päeval anda tulemuse S. aureus'e esinemise kohta. Kui kultuuril on ainult plasmakoagulaasi või ainult vitelaasi aktiivsus, on stafülokoki tüübi lõplikuks kindlakstegemiseks vaja kindlaks määrata täiendavad patogeensuse kriteeriumid: mannitooli fermentatsioon anaeroobsetes tingimustes, DNaasi aktiivsus, lüsosüümi, fosfataasi tootmine ja ka tundlikkus novobiotsiini suhtes. .
Mannitooli kääritamine
Mannitooli fermentatsiooni anaeroobsetes tingimustes saab määrata standardse kuivsöötme abil koos mannitooli ja BP indikaatoriga. Pärast selle valmistamist ja regenereerimist lisatakse katseklaasidesse 1 ml steriilset vaseliiniõli ja kultuur inokuleeritakse kolonni. Põllukultuurid termostaadis 5 päeva. Mannitooli lagunemisel muutub sööde siniseks.See test on positiivne 94-96% S.aureus'e tüvedest.DNAaasi määramine
DNA proov lisatakse kuivale toitaineagarile kiirusega 2 mg 1 ml söötme kohta, seejärel steriliseeritakse jooksva auruga 3 minutit. Seda saab hoida külmkapis 2 kuud. Enne kasutamist agar sulatatakse ja lisatakse kaltsiumkloriid (0,8 mg 1 ml kohta). Ühes tassis võib kuivatatud söötmetele ribadena külvata kuni 16-20 kultuuri. Pärast põllukultuuride 18-20-tunnist inkubeerimist täidetakse need 5 ml IN HC1-ga. 7-10 minuti pärast hape kurnatakse ja võetakse arvesse. Vesinikkloriidhape reageerib DNA-ga, moodustades läbipaistmatu valge sademe. Kui kultuur toodab DNaasi, siis viimane depolümeriseerib DNA ja vesinikkloriidhappe lisamisel tekib kultuuriribade ümber selge tsoon, mis näitab DNaasi ensüümi olemasolu.Hüaluronidaasi aktiivsus
Hüaluronidaasi aktiivsus määratakse, lisades 0,5 ml nabanöörist saadud hüaluroonhapet 0,5 ml stafülokoki puljongikultuurile. Segu inkubeeritakse 30 minutit temperatuuril 37 °C ja 10 minutit temperatuuril 4 °C. Katseklaasi lisatakse 4 tilka 15% äädikhapet, loksutatakse ja märgitakse tulemused 5 minuti pärast. Trombi puudumine näitab hüaluronidaasi olemasolu, trombi olemasolu näitab selle puudumist. Hüaluroonhappe tootmiseks purustatakse vastsündinute värske nabanöör ja täidetakse kahekordse koguse destilleeritud veega. Segu hoitakse 24 tundi külmkapis, seejärel kuumutatakse ja keedetakse, kuni nabanöörijupid hüübivad. Saadud hüaluronaat filtreeritakse läbi puuvillase marli filtri ja kontrollitakse trombide moodustumist.Lüsosüümi aktiivsus
Stafülokokkide lüsosüümne aktiivsus määratakse isoleeritud kultuuride inokuleerimisega naastude kujul tihedale toitaineagarile, millele lisatakse Micrococcus luteuse kultuuri paks suspensioon. Lüsosüümi vabanemisel tekivad naastude ümber lüüsitsoonid (agari puhastamine).Fosfataasi määramine
Fosfataasi määramiseks külvatakse kultuurid toitaineagarile, millele lisatakse eelnevalt paranitrofenüülfosfaat (0,5 mg 1 ml söötme kohta) Inkubeeritakse 18-20 tundi temperatuuril 37 ° C. Ümberringi ilmub intensiivne kollane värvus põllukultuurid näitavad fosfataasi vabanemist.Resistentsus novobiotsiini suhtes
Resistentsus novobiotsiini suhtes määratakse kultuuri külvamisel novobiotsiiniga (1,6 μg/ml) lihapeptoonagarile. Selle antibiootikumi suhtes on tundlikud Staphylococcus aureus ja Staphylococcus epidermidis ning resistentsed S.saprophyticus.Voges-Proskaueri reaktsioon
Eraldatud puhaskultuur külvatakse Clarki glükoosi-fosfaadi puljongisse. Pärast kolmepäevast inkubeerimist 37 °C juures lisatakse 1 ml kultuurile 0,6 ml alfa-naftooli ja 0,2 ml KOH ning loksutatakse. Kui reaktsioon on positiivne, ilmub 3-5 minuti pärast roosa värv.Bioloogilised uuringud
Toidu kaudu levivaid haigusi põhjustavad patogeensed stafülokokid eraldatakse ja tuvastatakse samamoodi nagu stafülokokid üldiselt. Neid eristab võime toota enterotoksiine A, B, CI, C2, C3, D, E, F, mida iseloomustab termostabiilsus ja antigeeni spetsiifilisus. Levinumad tüübid on A ja D. Need toksiinid saadakse kultuuri külvamisel spetsiaalsesse poolvedelasse söötmesse ja inkubeerides 3-4 päeva 37 °C juures eksikaatoris 20% CO2-ga. Toksiini sisaldav sööde juhitakse läbi membraanfiltrite nr 3 ja 4. Saadud filtraati kuumutatakse 100 °C juures 30 minutit ja manustatakse põrsaste kassipoegadele kõhukelmesiseselt või sondi kaudu makku. 30-60 minuti pärast kogevad loomad oksendamist, hiljem kõhulahtisust ja üldist kummardust. Toksilist infektsiooni põhjustavate enterotoksiinide tuvastamiseks toiduainetes antakse kassipoegadele toitu. Hiljuti on enterotoksiinide identifitseerimine ja tüpiseerimine läbi viidud immunosadestamise reaktsiooni abil agargeelis. See on kõige lihtsam ja tundlikum meetod enterotoksiinide tuvastamiseks.Seroloogiline uuring
Stafülokokkide infektsioonide seroloogiline uuring viiakse läbi ainult siis, kui patogeeni ei saa isoleerida, näiteks krooniliste protsesside korral (osteomüeliit, septikopeemia), eriti kui neid ravitakse pikka aega antibiootikumidega. Kaasaegsetest seroloogilistest reaktsioonidest kasutatakse sageli RNGA-d ja ELISA-d, eelkõige ribitikoiinhappe või muude liigispetsiifiliste antigeenide vastaste antikehade määramiseks. Kuid teikhoehapete vastaste antikehade tuvastamine ei ole määrav ja tulemused on sageli vastuolulised. Lisaks ei ole nende määramiseks kasutatavad reaktiivid veel kergesti kättesaadavad.Bakterikandja test
Meditsiinitöötajate seas kontrollitakse bakterite kandumist kaks korda aastas. Tavaliste bakterioloogiliste uuringute käigus tuleb uurida nina lima. Orofarünksi lima uuringud viiakse läbi selektiivselt, neelu põletikuliste protsesside juuresolekul. Materjal võetakse nina eesmistest osadest steriilse vatitupsuga ja seda kasutatakse FNA inokuleerimiseks hiljemalt 2 tundi pärast kogumist. S. aureus'e isoleerimine ja identifitseerimine toimub samamoodi nagu teiste materjalide uurimisel.Nina limaskesta stafülokoki saastumise ulatuse määramisel asetatakse uuritava lima tampoon 0,5 ml steriilse isotoonilise naatriumkloriidi lahusega katseklaasi, loputatakse 10 minuti jooksul loksutades vedelikus, surutakse vastu seinu. ja eemaldati. Vedelikku segatakse korduvalt pipetiga. Kandke pipetiga JSA-ga tassile eraldi pipetiga 0,1 ml pesuainet ja hõõruge hoolikalt spaatliga. Inokuleeritud plaate inkubeeritakse 37 °C juures 48 tundi, misjärel loendatakse kolooniate arv. Kui 50 kasvatatud S. aureuse kolooniast on kaks määratud samasse fagotüüpi, on õigustatud eeldada, et kõik teised kolooniad, mis on morfoloogia ja pigmendi poolest identsed, kuuluvad sarnase fagotüübiga S. aureusesse.
Näide arvutamiseks: pärast 0,1 ml väljapesemise inokuleerimist kasvas 50 S.aureuse kolooniat. Seega on 0,5 ml-s 50 * 5 = 250 kolooniat või 2,5 * 10B2. Stafülokoki saastumise massiivsus, mida väljendatakse 102 mikroobiraku arvuga, on mõõdukas ja patogeen keskkonda ei eraldu. Kui eraldatakse >10×3 bakterirakku, määratletakse saastatuse tase kõrgena, mille juures haigusetekitaja satub väliskeskkonda mitte ainult köhimisel ja aevastamisel, vaid vaiksel hingamisel. Sellistel juhtudel on hädavajalik desinfitseerida bakterikandjad.
Stafülokoki infektsioonide ennetamine ja ravi
Stafülokokkide põhjustatud haiguste ennetamine hõlmab mitmeid valdkondi. Nende hulka kuuluvad meetmed nakkuse allika vastu võitlemiseks, milleks on mäda-põletikuliste protsesside all kannatavad inimesed ja bakterikandjad, mille ravi tekitab teatud raskusi. Ennetusmeetmete kompleksis on eriti oluline stafülokokihaiguste ennetamine meditsiiniasutustes. See on eelkõige haiglaosakondade tööaja korraldus. Osakondi, kus on avatud mäda-põletikuliste protsessidega patsiente, peavad teenindama eraldi personal. Stafülokokihaiguste esinemise vältimiseks vigastus- või nakkusohus inimestel on soovitatav kasutada immuniseerimismeetodit sorbeeritud toksoidiga või immunoglobuliini sisseviimist.
Eriline probleem- stafülokokihaiguste ennetamine vastsündinutel. Isegi tänapäevani on stafülokokk üks peamisi nakkuse tekitajaid. Sel juhul hõlmab ennetus emade immuniseerimist stafülokoki toksoidiga, samuti emapiima saastumise kvantitatiivset ja kvalitatiivset analüüsi, et läheneda rangemalt vastsündinu üleviimisele keedetud rinnapiimaga toitmisele. Tavaliselt sisaldab inimese piim kolme klassi immunoglobuliine – IgG, IgM ja IgA, mis keetmisel hävivad.
Stafülokoki infektsioonide raviks kasutatakse antibiootikume, mille valiku määrab isoleeritud kultuuri tundlikkus teatud ravimite suhtes. Nendest on suurima tähtsusega p-laktaamravimid (oksütsilliin, metitsilliin jt). Viimastel aastatel on tekkinud metitsilliiniresistentsed tüved. Nende resistentsust, erinevalt teistest tüvedest, ei kontrolli R-plasmiidid, vaid see on seletatav kromosomaalsete mutatsioonidega. Selliste patsientide raviks kasutatakse vankomütsiini ja fluorokinoloone, lisaks kasutatakse stafülokoki infektsioonide raviks 1. ja 2. põlvkonna tsefalosporiine ning harvem tetratsükliine. Sepsise korral manustatakse stafülokokivastast Ig-d koos antibiootikumidega. Krooniliste stafülokokkide infektsioonide (krooniline sepsis, furunkuloos jt) raviks kasutatakse toksoidi ja autovaktsiini, mis stimuleerivad antitoksiliste ja antimikroobsete antikehade sünteesi.
1. Stafülokokid, nende omadused. Stafülokokkide klassifikatsioon, patogeensustegurid. Stafülokokkide põhjustatud haigused. Stafülokokkide haiglatüvede epidemioloogia ja omadused. Laboratoorsed diagnostikad, spetsiifiline ennetus ja ravi .
Kõige kuulsam:
Staphylococcus aureus on inimestele kõige patogeensem. Nimetatud tänu oma võimele moodustada kuldset pigmenti. Inimestel võib see põhjustada mädaseid põletikulisi protsesse peaaegu kõigis elundites ja kudedes.
Staphylococcus epidermidis – esineb sageli inimese nahal ja limaskestadel, võib põhjustada sepsist, endokardiiti, konjunktiviiti, mädaseid haavapõletikke ja mädaseid kuseteede põletikke.
Saprofüütne stafülokokk (Staphylococcus saprophyticus) - võib põhjustada ägedat põiepõletikku ja uretriiti.
Taksonoomia: kuuluvad osakonda Firmicutes, perekond Micrococcacae, perekond Staphylococcus. Sellesse perekonda kuulub 3 liiki: S.aureus, S.epidermidis ja S.saprophyticus.
Morfoloogilised omadused: Igat tüüpi stafülokokid on ümmargused rakud. Määrdudes paiknevad nad asümmeetrilistes klastrites. Rakusein sisaldab suures koguses peptidoglükaani, sellega seotud teikhoehappeid ja valku A. Need on grampositiivsed. Nad ei moodusta eoseid ja neil puuduvad lipud. Mõne tüve puhul võib leida kapsli. Võib moodustada L-vorme.
Kultuurilised omadused: Stafülokokid on fakultatiivsed anaeroobid. Kasvab hästi lihtsal kandjal. Tihedas keskkonnas moodustavad nad siledad, kumerad kolooniad erinevate pigmentidega, millel puudub taksonoomiline tähtsus. Võib kasvada kõrge NaCl sisaldusega agaril. Neil on sahharolüütiline toime
kimi ja proteolüütilised ensüümid. Stafülokokid võivad toota hemolüsiine, fibrinolüsiini, fosfataasi, laktamaasi, bakteriotsiine, enterotoksiine ja koagulaasi.
Stafülokokid on paindlikud ja muutuvad kiiresti antibakteriaalsete ravimite suhtes resistentseks. Selles mängivad olulist rolli plasmiidid, mis edastatakse faagide ühest rakust teise ülekandmise abil. R-plasmiidid määravad β-laktamaasi tootmise kaudu resistentsuse ühe või mitme antibiootikumi suhtes.
Antigeenne struktuur. Umbes 30 antigeeni, milleks on valgud, polüsahhariidid ja teikhoiinhapped. Stafülokoki rakusein sisaldab valku A, mis suudab tihedalt seonduda immunoglobuliini molekuli Fc fragmendiga, samas kui Fab fragment jääb vabaks ja võib seostuda spetsiifilise antigeeniga. Tundlikkus bakteriofaagide suhtes (fagotüüp) on tingitud pinnaretseptoritest. Paljud stafülokoki tüved on lüsogeensed (mõnede toksiinide moodustumine toimub profaagi osalusel).
Patogeensuse tegurid: Tinglikult patogeenne. Mikrokapsel kaitseb fagotsütoosi eest ja soodustab mikroobide adhesiooni; rakuseina komponendid – stimuleerivad põletikuliste protsesside arengut. Agressiivsusensüümid: katalaas – kaitseb baktereid fagotsüütide toime eest, β-laktamaas – hävitab antibiootikumide molekule.
Vastupidavus. Tavaline on vastupidavus keskkonnale ja tundlikkus desinfektsioonivahendite suhtes.
Patogenees. Stafülokoki infektsiooni allikaks on inimesed ja mõned loomaliigid (patsiendid või kandjad). Ülekandemehhanismid: hingamine, kodune kontakt, toitumine.
Immuunsus: P osinfektsioosne – raku-humoraalne, ebastabiilne, laenguta.
Kliinik. Umbes 120 kliinilist avaldumisvormi, mis on lokaalsed, süsteemsed või üldistatud. Nende hulka kuuluvad naha ja pehmete kudede mädased-põletikulised haigused (paised, paised), silmade, kõrva, ninaneelu, urogenitaaltrakti ja seedesüsteemi kahjustused (mürgitus).
Mikrobioloogiline diagnostika . Uurimismaterjal - mäda, veri, uriin, röga, väljaheited.
Bakterioskoopiline meetod: Testmaterjalist (va veri) valmistatakse äigepreparaadid ja värvitakse Gramiga. Klastrite kujul paiknevate grammide “+” klastrikujuliste kokkide olemasolu.
Bakterioloogiline meetod: Materjal inokuleeritakse silmusena vere- ja munakollase-soolagariplaatidele, et saada isoleeritud kolooniad. Põllukultuure inkubeeritakse 37 °C juures 24 tundi. Järgmisel päeval uuritakse kasvanud kolooniaid mõlemal söötmel. Hemolüüsi olemasolu või puudumine märgitakse vereagaril. FSA-l moodustab S. aureus kuldsed, ümmargused, kumerad, läbipaistmatud kolooniad. Letsitinaasi aktiivsusega stafülokokkide kolooniate ümber moodustuvad pärlmuttervärvi hägususe tsoonid. Stafülokoki tüübi lõplikuks kindlakstegemiseks subkultuuritakse 2–3 kolooniat kaldus toitaineagariga katseklaasidesse, et saada puhaskultuurid, millele järgneb nende diferentsiaalsete omaduste määramine. S.aureus – “+”: plasmakoagulaasi, letisinaasi moodustumine. Käärimine: glk, minnita, a-toksiini moodustumine.
Haiglainfektsiooni allika kindlakstegemiseks eraldatakse patsientidest ja bakterikandjatest stafülokokkide puhaskultuurid, misjärel need faagitüübistatakse, kasutades standardsete stafülofaagide komplekti. Faagid lahjendatakse etiketil näidatud tiitrini. Kõik uuritud kultuurid inokuleeritakse muruplatsiga Petri tassis toitaineagarile, kuivatatakse ja seejärel kantakse tilk vastavat faagi silmusena ruutudele (vastavalt komplektis olevate faagide arvule), mis on eelnevalt märgistatud. pliiatsiga Petri tassi põhjale. Põllukultuure inkubeeritakse temperatuuril 37 °C. Tulemusi hinnatakse järgmisel päeval kultuuri lüüsi olemasolu põhjal.
Seroloogiline meetod: kroonilise infektsiooni korral määratakse anti-a-toksiini tiiter patsientide vereseerumis. Määratakse riboeikoehappe (rakuseina komponent) antikeha tiiter.
Ravi ja ennetamine. Laia toimespektriga antibiootikumid (beetalaktamaasiresistentsed penitsilliinid). Raskete stafülokoki infektsioonide korral, mida ei saa antibiootikumidega ravida, võib kasutada antitoksilist antistafülokoki plasmat või immunoglobuliini, mis on immuniseeritud adsorbeeritud stafülokoki toksoidiga. Patsientide tuvastamine ja ravi; meditsiinitöötajate rutiinse läbivaatuse läbiviimine, vaktsineerimine stafülokoki toksoidiga. Stafülokoki toksoid: saadakse natiivsest toksoidist trikloroäädikhappega sadestamisel ja adsorptsioonil alumiiniumoksiidhüdraadil.
Stafülokoki vaktsiin: koagulaas-positiivsete stafülokokkide suspensioon, mis on inaktiveeritud kuumuse toimel. Kasutatakse pikaajaliste haiguste raviks.
Inimese antistafülokoki immunoglobuliin : vereseerumi gammaglobuliini fraktsioon, sisaldab stafülokoki toksoidi. Valmistatud inimesest veri, kõrge antikehade sisaldusega. Kasutatakse spetsiifiliseks raviks.
Stafülokokid. üldised omadused
Stafülokokk tavaliselt leidub kobarates, mis meenutavad viinamarjakobarat. Üksikud, umbes 1 μm läbimõõduga kookid kipuvad ühinema klastriteks, kuna nende jagunemine toimub kolmel üksteisega risti asetseval tasapinnal ja tütarrakud säilitavad omapärase ruumilise rühma paigutuse. Eritingimustel saab neid paigutada üksikult, paarikaupa või lühikeste kettidena. Nad on grampositiivsed, mitteliikuvad, ei moodusta eoseid ja kasvavad aktiivselt peaaegu kõigil tehissöötmetel, moodustades tavaliselt läbipaistmatud, siledad, läikivad kolooniad.
Kuna stafülokokid toodavad katalaasi, vesinikperoksiid, mis aeroobsetes tingimustes tekib metaboliidina, ei ole neile mürgine ja enamasti kasvavad nad paremini hapniku juuresolekul. Kuid nad taluvad kergesti hapniku puudumist ja mõned neist on isegi ranged anaeroobid. Nad kasvavad kõige paremini temperatuuril 25–35 °C, kuid võivad kasvada ka 8 °C ja üle 48 °C juures.
Aeroobsetes tingimustes vereagaril kasvatamisel tekivad pigmendid - kuldsest sidrunkollase ja valgeni. Kuldne pigment andis nime ühele stafülokoki tüübile - Staphylococcus aureus. Kuid samal ajal võivad mõned Staphylococcus aureus'e tüved toota ka valget pigmenti.
Stafülokokk vastupidavam kuumusele, valgusele, kuivamisele, äärmuslikele temperatuuridele ja keemilistele mõjuritele kui teised bakterid. Nad taluvad 60°C tund aega ja mõned tüved taluvad isegi 80°C 30 minutit, kuigi enamik bakterite vegetatiivseid vorme sureb 30 minuti jooksul 60°C juures.
Tänu oma kuivamiskindlusele stafülokokid võib kanda tolmuosakestega, kuivanud mäda või röga sees võib püsida nädalaid ja kuid. Stafülokokkide teine tunnus on nende stabiilsus soolakeskkonnas (naCl kontsentratsioonil kuni 15% nad ei sure). Sellega seoses saab neid konservides (konservides) säilitada. Soolamise teel konserveeritud toiduainetes stafülokokid võib kasvada ja toota enterotoksiini.
Need mikroobid on vastupidavad fenoolile ja enamikule muudele desinfektsioonivahenditele ning on tundlikud põhivärvide suhtes. Nad kipuvad arendama resistentsust sulfoonamiidide ja antibiootikumide suhtes. Umbes 80% Staphylococcus aureuse tüvedest on penitsilliini suhtes resistentsed.
Perekonda Staphylococcus esindab kolm liiki:
1. Staphylococcus aureus;
2. Staphylococcus epidermidis;
3. Staphylococcus saprophyticus.
Liigid erinevad peamiselt biokeemiliste omaduste ja toodetavate ensüümide poolest. Staphylococcus aureus kääritab mannitooli anaeroobsetes tingimustes ja toodab koagulaasi, samas kui ülejäänud kahel liigil need omadused puuduvad.
Staphylococcus saprophyticus on peamiselt saprofüütne, nagu näitab tema nimi. See näib olevat potentsiaalselt patogeenne ja selle invasiivsus on piiratud. Võib põhjustada kuseteede infektsiooni.
Stafülokokid. Mürgised tooted
Stafülokokk toota palju tooteid, millel on selgelt väljendunud toksilised omadused. Tõenäoliselt ei tooda neid sellises koguses ükski teine mikroob. Nende hulgas on ekstratsellulaarsed toksiinid, hemolüsiinid (stafülolüsiinid), ensüümid. Kõik need määravad ühel või teisel määral mikroobi patogeensuse ja virulentsuse. Ükski tüvi ei ole võimeline tootma kõiki mürgiseid tooteid korraga.
Hemolüsiinid- need on eksotoksiinid, mis toimivad otse rakumembraanile, mille tulemusena toimub punaste vereliblede, leukotsüütide, makrofaagide trombotsüütide lüüs ja paljude kudede kahjustus. Tõenäoliselt seletab hemolüsiini toime paljude stafülokokkide infektsioonijuhtumite surmaga lõppevat tulemust.
Kui stafülokoki kultuur kasvab vereagaril, avaldub hemolüüs puhastustsooni kujul (p-hemolüüs). Erinevalt streptokokkidest ei põhjusta stafülokokk osalist hemolüüsi (a-hemolüüsi). Tuleb märkida, et kreeka tähti kasutatakse immunoloogiliselt erinevat tüüpi stafülokokkide hemolüsiinide tähistamiseks, samas kui streptokokkide puhul tähistavad need tähed hemolüüsi tüüpi - täielik või mittetäielik. Näiteks hemolüsiin, mida stafülokokkides nimetatakse a-hemolüsiiniks (a-lüsiin, a-toksiin), tähendab heleda tsooni olemasolu vereagaril kolooniate ümber.
Tsütotoksiin- üks olulisemaid stafülokokkide virulentsustegureid, põhjustab trombotsüütide agregatsiooni ja toimib selektiivselt väikeste veenide silelihastele.
Leukotsidiin- mittehemolüütiline eksotoksiin, mis hävitab valgeid vereliblesid. See põhjustab polümorfonukleaarsete neutrofiilide leukotsüütide ja makrofaagide degranulatsiooni.
Enterotoksiin- rakuväline toksiin, mida toodab umbes 50% koagulaas-positiivsetest tüvedest ja mis põhjustab enamikul juhtudel toidumürgitusi. Toksiin mõjub otse kesknärvisüsteemi oksendamiskeskusele. Toksiini tootmine on tingitud faagi muundamisest. Mürke on 5 tüüpi – A, B, C, D, E. Enterotoksiini kogunemine saastunud toidu sisse toob kaasa toidumürgituse koos gastroenteriidi sündroomiga, mis ei ole infektsioon selle mõiste tavatähenduses, pigem on tegemist toksoosiga. Toksiini olemasolu kahtlustatavas toidus saab määrata immunoloogiliselt, näiteks sadestamisreaktsioonis.
Koorimine(eksfoliatiivne toksiin) on toksiin, mille produktsiooni määrab plasmiid. Kahjustab valikuliselt teatud naharakke nii, et suured nahapiirkonnad võivad täielikult maha kooruda. Eriti tundlikud on vastsündinud ja väikelapsed toksiini mõjude suhtes. Seda kahjustust nimetatakse "põletatud naha sündroomiks".
Koagulaas, oluline rakuväline ensüüm, mida toodavad ainult mõned stafülokokid (koagulaaspositiivsed), põhjustab vereplasma trombi moodustumist. Laboris kasutatakse koagulaasi määramist ainsa usaldusväärse tõendina isoleeritud tüve patogeensuse kohta. Mittevirulentsete tüvede puhul lõppevad koagulaasi tuvastamise katsed tavaliselt ebaõnnestumisega. Neid tüvesid nimetatakse koagulaasnegatiivseteks. Selle ensüümi juuresolekul ja selle toime avaldumisel kaetakse üksikud kookid fibriinikihiga ja seega on nad fagotsüütide rünnaku eest usaldusväärselt kaitstud.
Koagulaasi tootmise võime korreleerub teiste mürgiste produktide esinemisega nendes tüvedes. Koagulaas + stafülokokk võib omada ka adhesiivset faktorit – see on rakuga seotud, kuid antigeenselt erinev koagulaasi vorm, mis põhjustab plasmatilgas emulgeeritud rakkude kiiret adhesiooni.
Stafülokoki lipaasid- egoensüümid, mis hävitavad rakustruktuuride lipiide ja vere lipoproteiine. Stafülokokid kasutavad ära nahastruktuuride metaboliite ja on seetõttu võimelised naha pinda intensiivselt koloniseerima (asustama). Lipaasi moodustumine annab sellele mikroobile võimaluse tungida tervesse nahka ja nahaaluskoesse koos lokaalsete abstsesside moodustumisega. Lipaasita tüvesid seostatakse sagedamini generaliseerunud infektsiooniga.
Hüaluronidaas(jaotusfaktor, invasioon), mida toodab üle 90% patogeensetest stafülokokkidest, suurendab kudede läbilaskvust kokkide ja nende toksiliste ainete suhtes. Põhjustab koerakke ühendava hüaluroonhappe lagunemist.
Nukleaas, mis esineb 90-96% S.aureus'est, lagundab DNA ja RNA. S. aureus'e nukleaas on termostabiilne, koagulaasnegatiivsete stafülokokkide nukleaas on termolabiilne.
Stafülokinaas lahustab fibriini trombe ja vastavalt soodustab lokaalse, esialgu piiratud infektsiooni levikut.
Stafülokokid. Patogeensus.
Mõned stafülokokid mittepatogeensed, teised (S. aureus) põhjustavad tõsiseid infektsioone, S. epidermidis, kuigi mõnikord põhjustab kergeid, piiratud kahjustusi, peetakse üldiselt mittepatogeenseks, välja arvatud mõnes ebatavalises meditsiinilises olukorras, näiteks kui see viiakse kehasse meditsiinilistel eesmärkidel kehakudedele võõrad tehnilised seadmed. Üldiselt on S. epidermidis tavaline endokardiidi põhjus, mis areneb südameklapi asendamisel ja infektsioonide korral, mis komplitseerivad ortopeedilist asendamist või neurokirurgilist möödaviiguoperatsiooni.
Hästi tuntud stafülokokk naha ja keha pindmiste kudede infektsioonid, nagu püoderma, keeb, abstsessid, karbunklid, paronühhia, impetiigo contagiosa ja kirurgiliste haavade nakkuslikud tüsistused. Nahainfektsiooni kliiniline pilt sõltub patsiendi vanusest. Näiteks on väikelastel täheldatud "põletatud naha sündroomi".
Stafülokokk võivad põhjustada ka tervete süsteemide haigusi ning mõjutada peaaegu kõiki elundeid ja kudesid. Need võivad olla üheks kopsupõletiku, mädase pleuriidi, endokardiidi, meningiidi, ajuabstsessi, sünnitusjärgse palaviku, flebiidi, põiepõletiku ja püelonefriidi üheks põhjuseks. Stafülokokk kopsupõletik on epideemilise gripi surmav tüsistus. Stafülokokk on osteomüeliidi kõige levinum põhjus. Stafülokokk haigusi esineb sageli haiglates, eriti juba raskelt haigetel patsientidel. Näiteks, stafülokoki kopsupõletik on superinfektsioon, mis ähvardab suuri antibiootikumide annuseid võtnud patsiente.
Stafülokoki septitseemia esineb kahel kujul. Esimene on fulminantne sügav tokseemia, mis mõne päeva pärast põhjustab surma. Teine, levinum vorm kestab kauem, sellega kaasneb metastaatiliste abstsesside teke erinevates kehaosades, kuid see ei ole pöördumatu.
Stafülokoki septitseemia võib olla esmane, kuid sagedamini on see mikroorganismide sekundaarse tungimise tagajärg lokaalsest nakkusallikast vereringesse. Sageli saab protsess alguse triviaalsest karvanääpsu põletikust.Mikroob võib vereringesse sattuda nii nakatunud haavast, kopsupõletiku allikast kui ka nakatunud veenisisesest kateetrist. Tõsise infektsiooni ohu tõttu ei tohi kateetrit veeni jätta kauemaks kui 3-4 päevaks. Pindmised haavandid; paise nina ja huulte ümber komplitseerib kergesti septitseemia, seega on parem vältida nende vigastamist.
nn "ohtlik kolmnurk"- See on näo kolmnurkne ala suunurkadest, ülahuulest ja nina ülaosast. Sellest piirkonnast võib infektsioon levida otse koljuõõnde, mis võib olla eluohtlik. See tüsistus on seotud selle kehaosa anatoomilise struktuuri iseärasustega: usaldusväärsete mehaaniliste tõkete puudumine, veenid, millel puuduvad ventiilid, mis takistaksid vere tagasivoolu, pidevalt liikuvate lihaste olemasolu.
Isegi selliste manipulatsioonide korral nagu kõrvaaugustamine (kosmeetilisel eesmärgil), mis tehakse ilma vajalikku steriilsust säilitamata, on oht sekundaarsete tekkeks. stafülokokk infektsioon, mis avatud haavast võib tungida vereringesse ja mõnikord viia sepsise tekkeni.
Stafülokokk võib põhjustada enteriiti ja enterokoliiti, raskendades antibiootikumravi. Need on kõige levinum toidumürgituse põhjus, kuna toksiin võib toiduga koguneda suurtes kogustes.
Stafülokokk võib mõnikord põhjustada mädaseid-põletikulisi protsesse lehmadel ja hobustel. Mastiidi tekkimisel võib mikroob piima sattuda. Piimatüdrukute käte nahal võivad tekkida pustuloossed kahjustused. Võimalik on teiste karja loomade nakatumine.
Stafülokokid. Haigla infektsioon
Inimene on lähedalt seotud üldlevinud stafülokokkidega (üldlevinud mikroorganism) ja seetõttu stafülokoki infektsioon kujutab endast ohtu igal pool ja igal ajal. Selle näiteks on haiglas omandatud infektsioon, mis on juba aastaid olnud tõsine probleem haiglatele üle maailma.
Selle probleemiga on seotud mitmeid küsimusi, mis nõuavad arutelu. Esiteks, stafülokoki haigla infektsioon on antibiootikumide laialdase kasutamise tüsistus. Neid olulisi antimikroobseid aineid kirjutatakse väga laialdaselt ja vabalt välja, kuid nende toime on valdavalt pigem bakteriostaatiline kui bakteritsiidne. Stafülokokk on hea kohanemisvõimega ja nende hulgas tekivad antibiootikumiresistentsed tüved. Teiseks aitavad ravikindlustuse ja raviteenuste omadused kaasa haiguse varajasele avastamisele ja suurema hulga patsientide varajasele hospitaliseerimisele. Kolmandaks, kirurgiliste sekkumiste ulatuse ja arvu laiendamine. Keerukad kirurgilised tehnikad võimaldavad kude kauem lahti hoida. Neljandaks võib teatud tüüpi ravi põhjustada immuunsüsteemi pärssimist (immunosupressioon). Näiteks kudede ja elundite siirdamine äratõukereaktsioonivastaste ravimite väljakirjutamise taustal. Sellistel juhtudel väheneb vastupanuvõime infektsioonidele.
Haigla stafülokoki infektsioonide korral täheldatakse kõige sagedamini järgmisi kahjustusi:
1. Püoderma on termin, mis tähistab naha ja nahaaluste kudede mädaseid kahjustusi. Sagedamini vastsündinutel. Võimalikud on ohtlikud tüsistused, nagu kopsupõletik ja septitseemia. Vastsündinu võib nakatada ema, kellel tekib rinnanäärme abstsess – mastiit.
2. Haavainfektsioon, eriti kirurgiline haav.
3. Sekundaarne stafülokoki infektsioon eakatel ja isikutel, kes ei ole suutelised järgima hügieenistandardeid.
4. Gastroenteriit pärsitud (näiteks antibiootikumide) soole mikroflooraga inimestel.
Stafülokokid. Patoloogiline anatoomia
Kõige märgatavam ilming stafülokoki infektsioon - abstsess, peamine kahjustuse tüüp. Abstsessi moodustumine põhineb stafülokoki püogeensel aktiivsusel ja selle üsna piiratud levimisvõimel,
Kuna mikroob elab pidevalt nahal, mõjutab see seda kõige sagedamini. Keetmine on naha abstsess. Abstsessi moodustumise määrab leviku asukoht ja tase. Stafülokokk kopsupõletik on mitu abstsessi kopsudes. Pie-lonefriit- need on neerude eritussüsteemi mitmed abstsessid. Stafülokokk septitseemia - mitmete abstsesside moodustumine kogu kehas. Sel juhul on sobivam termin pye-mia, mis tähendab sõna-sõnalt "mäda veres". Millal stafülokokid Nakata haav, need põhjustavad selles mäda teket. Stafülokokk on haavainfektsiooni kõige olulisem põhjus. Üldiselt põhjustavad need inimestel kuni 80% kõigist mädasetest protsessidest.
Stafülokokid. Epidemioloogia
Stafülokokk Tavaliselt elavad nad inimese nahal, aga ka suu, neelu ja nina limaskestadel. Nad võivad siin olla pidevalt, kuni ühel päeval ületavad naha- või limaskestabarjääri ja põhjustavad haiguse arengut. Teisel juhul tungivad nad läbi terve naha karvanääpsudesse ja rasunäärmete kanalitesse.
Tavaliselt on stafülokoki sissetungimisvõime ja peremeesorganismi resistentsus hästi tasakaalus, mistõttu nakatumine ei arene enne, kui tekib olukord, kus puututakse kokku ülivirulentse mikroobi või vähenenud resistentsusega makroorganismiga.
Reeglina areneb lokaalne protsess - abstsess või furunkel, ilma nakkuse levikuta. Kuid mõnel juhul läheb mikroob kohalikust infektsioonist kaugemale, siseneb vereringesse ja mõjutab keha erinevaid kudesid ja organeid.
Nakkuse edasikandumise mehhanism on valdavalt kontakt. Näiteks haigla personali käe läbi. Sel juhul on töötajatel oht saada vedajateks stafülokokk võivad jääda nende nina limaskestale pikaks ajaks. Kandjad võivad saada nakkuse allikateks.
Stafülokokid. Bakterioloogiline diagnostika
Bakterioloogiline diagnoos stafülokokk nakatumine ei ole eriti keeruline, kui uuritakse verd ja muid kehavedelikke, mis on tavaliselt steriilsed. Valitud kultuur stafülokokk tuleb tuvastada patogeensena, erinevalt tavalisest nahal elavast mikroobist. Selleks kasutatakse mitmeid teste. Värskelt isoleeritud põllukultuurid stafülokokk patogeenset iseloomustavad sellised omadused nagu kollase pigmendi, hemolüsiini, mannitooli fermentatsioon, DNAaasi ja koagulaasi tootmine.
Fagotüüpimine. Bakteriofaagid on viirused, mis nakatavad baktereid ja põhjustavad mõnel juhul nende lüüsi. Faagide toime on spetsiifiline. Ainult üks faag või faagirühm nakatab konkreetset bakteritüve, mis võimaldab kasutada faage bakterite tüpiseerimiseks (faagide tüpiseerimine). Sel eesmärgil lisatakse tassile teadaoleva faagi suspensioon koos tüübitava mikroobi värske kultuuriga. Kui see mikroob on selle faagi toime suhtes tundlik, siis see lüüsitakse ega kasva söötmel. Plaadile ilmuvad läbipaistvad tsoonid, niinimetatud “naastud” või “negatiivsed kolooniad”.
Eraldi mainimist väärib stafülokokkide fagotüpiseerimine. Leiti, et spetsiifilised bakteriofaagid (stafülofaagid, tabel 1) reageerivad 60% koagulaas+stafülokokkidega. Koagulaas-stafülokokid ei ole nii tundlikud. Kuna see protsess on spetsiifiline, kasutatakse seda isoleeritud stafülokokkide faagiproduktide määramiseks. Mugavuse huvides omistatakse bakteriofaagidele kindlad numbrid ja konkreetse faagi poolt lüüsitud stafülokoki tüvedel on selle faagi number ja neid nimetatakse vastavaks faagiks. See kehtib ainult S. aureus'e tüvede kohta. Enamik teisi stafülokokke ei ole tüüpilised.
Stafülokokkide faagitüüpi määramise rahvusvahelise allkomitee otsusega tehti ettepanek koostada S. aureus'e faagide rahvusvaheline klassifikatsioon (tabel 1).
Tabel 1. S. aureus faagide rahvusvaheline klassifikatsioon
|
Rühmad |
Üksikud faagid |
Tavalised faagid S.aureus |
|
29, 52, 52A, 79, 80 |
29,52/52A; 52/52A/80/81; 80 |
|
|
3A, 3B, 3C, 55,71 |
3A/3B/3C; 3С/55 |
|
|
6, 7, 42E, 47, 53, 54, 75 |
6/7/47/53/54/75/77 |
|
|
Segatud |
Faagi tüpiseerimist kasutatakse epidemioloogilistel eesmärkidel nakkusallika tuvastamiseks, kuna faagide tüpiseerimine on väga spetsiifiline protsess. Näiteks haiglanakkuste korral võib meetod täpselt määrata patogeense tüve (sama faagiprodukti) kandja.
Stafülokokid. Immuunsus infektsioonide vastu
Inimestel on märkimisväärne loomulik immuunsus stafülokoki suhtes. Spetsiifilisi antikehi leidub enamiku inimeste vereseerumis. Nende välimus on seotud varasemate niinimetatud "väiksemate" naha ja limaskestade stafülokokkide infektsioonidega. Omandatud immuunsus võib täita teatud kaitsefunktsiooni, kuid praktiliselt ei saa olla tõsine kaitse stafülokoki infektsiooni eest. Erilise riskirühma moodustavad inimesed, kellel on vähenenud kaitsereaktsioonid, näiteks diabeedi või viirusnakkuste tõttu.
Stafülokokid. Infektsioonide ennetamine ja kontroll
Stafülokoki infektsioonide kontrolli all hoidmise aluseks haiglates (ja mujalgi) on hügieenistandardite hoolikas järgimine ja aseptiliste tehnikate range järgimine. Ringlevad patogeensed stafülokoki tüved on desinfektsioonivahendite suhtes sama tundlikud kui tavalised mittepatogeensed tüved.
Oluline tegevus on patogeense stafülokoki (nina limaskestal) kandjate tuvastamine töötajate hulgas, eriti vastsündinute osakonnas.
Koagulaas+ stafülokokkide fagotüpiseerimine aitab haiglanakkuste korral tuvastada allika
Järeldus
1. Stafülokokk , streptokokid ja pneumokokid on peamised grampositiivsed kokid, mis kuuluvad kahte perekonda: Staphylococcus ja Streptococcus. Formaalselt nimetatakse pneumokokki praegu Streptococcus pneumoniae'ks.
2. Stafülokokk - aeroobsed kokid, kasvavad hästi kõigil toitainetel, mõned sordid toodavad katalaasi. Stafülokokid toodavad vereagaril pigmente, mis võivad olla kuldsed, sidrunikollased või valged. Stafülokokkidel on märkimisväärne resistentsus füüsikaliste ja keemiliste mõjurite suhtes. Nad arendavad kiiresti resistentsust antibiootikumide suhtes; umbes 80% tüvedest on penitsilliini suhtes resistentsed.
3. Staphylococcus'e tüvede patogeensuse kõige usaldusväärsem märk on nende võime toota koagulaasi.
4. Stafülokokkide olulisemad toksilised ainevahetusproduktid on hemolüsiinid, enterotoksiin, lipaasid ja nukleaas. Mõned tüved toodavad koagulaasi.
5. Stafülokoki infektsiooni peamine ilming on abstsess.
6. Fagotüpiseerimine on väärtuslik epidemioloogiline tehnika, mis võimaldab määrata patogeense stafülokoki allika, mis on eriti oluline haiglanakkuste korral.
7. Peamised meetmed stafülokoki infektsiooni haiglasisese leviku tõkestamiseks on hügieenistandardite hoolikas järgimine, range kontroll aseptilise tehnika üle, stafülokoki kandmise tuvastamine vastsündinute osakondade ja kirurgiliste haiglate töötajate seas, alaliste kandjate eemaldamine "riskitsoonist" patsientide jaoks.
Staphylococcus aureus bakterid on patogeenid nii inimesele kui ka teistele imetajatele. Need on grampositiivsed bakterid, mis on väikese ümmarguse kujuga (kokid) ja esinevad kobaratena, mis elektronmikroskoopias paistavad välja nagu viinamarjakobar.
Stafülokoki mikrobioloogia:
Koagulaasi reaktsioon
Stafülokokid jagati varem kahte rühma, lähtudes nende vereplasma hüübimise võimest. Koagulaaspositiivsed stafülokokid on kõige patogeensemad liigid S aureus. Koagulaasnegatiivsed stafülokokid (CNS) hõlmavad nüüd teadaolevalt üle 30 muu liigi. See on kesknärvisüsteem, mis esineb nahal kahjutute bakteritena, kuid mõned neist võivad põhjustada ka infektsioone.
Tänapäeval ei kasutata S.aureuse klassifitseerimiseks enam koagulaasi reaktsiooni. Seda seetõttu, et koagulaas on marker S aureus kuid puuduvad otsesed tõendid selle kohta, et see on virulentsusfaktor. Kuid see termin on kliiniliste mikrobioloogide seas endiselt laialt levinud.
Valgud ja virulentsus
S. aureus avaldab oma pinnal teatud valke ja polüsahhariide. See on korrelatsioonis virulentsusega. Virulentsus on paljude nakatumise ajal väljendunud tegurite mõju. Bakterid toodavad ka teatud toksiine. Organismis neutraliseerivad antikehad stafülokoki toksiine ja ensüüme.
Taksonoomia ja nimetamisviisid
Biokeemilise analüüsiga on tuvastatud vähemalt 30 stafülokokiliiki. See kehtib eriti DNA-DNA hübridisatsiooni puhul. Neist 11 leidub inimestel kahjutute bakteritena nahal, ninas ja kurgus. Need võivad teatud olukordades põhjustada haigusi ja infektsioone.
Identifitseerimine mikroskoobi all
Need bakterid on umbes 0,5–1,0 μm läbimõõduga grampositiivsed kookid. Need esinevad viinamarjalaadsete kobaratena. Need võivad esineda ka paarikaupa ja aeg-ajalt lühikeste ahelatena. Klastrid tekivad seetõttu, et stafülokokid jagunevad kaheks tasapinnaks. See rühmitus aitab eristada stafülokokke streptokokkidest, mis tavaliselt kasvavad ahelatena.
S. aureus'e tahkel keskmisel kolooniatel kasvades paistavad need kuldsete tükkidena.
Katalaasi test
See test aitab eristada streptokokke (mis on katalaasnegatiivne) ja stafülokokke (mis on katalaaspositiivne). Bakterite agar- või puljongikultuurile kantakse mitu tilka 3% vesinikperoksiidi. Katalaaspositiivsed kultuurid mullitavad korraga. Seda ei saa teha vereagariga, kuna veri ise tekitab mullid.
S.aureuse identifitseerimine
Pärast kahjustustest proovide võtmist saab neid värvida Grami peitsiga. S. aureus on grampositiivne. Verekultuurist või mädast saadud kliinilisest proovist saadud organism kantakse seejärel triibud üle tahke söötme, nagu vereagar, trüptiline sojaagar või südameinfusioonagar. Kui proov on saastunud, kantakse see mannitoolisoolagarile, mis sisaldab 7,5% naatriumkloriidi.
Teine test on termostabiilse desoksüribonukleaasi tootmine. S aureus saab kinnitada, testides kolooniaid aglutinatsiooni suhtes immunoglobuliin G ja fibrinogeeniga kaetud lateksiosakestega, mis seovad vastavalt valku A ja klombumisfaktorit.
Mikroskoopiliselt esinevad rakud üksikult ja paarikaupa, lühikeste ahelatena ja viinamarjalaadsete klastritena. Bakterite rakusein sisaldab teikhoiinhapet. Ribitoolteikohape (polüsahhariid A) sisaldub selles Staphylococcus aureus. Proteiin A katab ühtlaselt pinna S. aureus ja on tavaliselt oksüdaasnegatiivne.
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus- fakultatiivsed anaeroobsed grampositiivsed kokid, mitteliikuvad, katalaas- ja koagulaaspositiivsed. Mõned tüved S. aureus toodavad stafülokoki enterotoksiine (SE), mis põhjustavad toidumürgitust. Stafülokokid esinevad õhus, tolmus, heitvees, vees, piimas, toidus, aga ka toidutootmise seadmetel, erinevatel pindadel keskkonnas, inimeste ja loomade nahal. Inimesed ja loomad on peamised nakkusallikad. Stafülokokid esinevad vähemalt 50% tervete inimeste nina- ja kurguõõnes, samuti juustel ja nahal. Staphylococcus aureus võimeline kasvama laias temperatuurivahemikus 7–48,5 °C (optimaalne 30–37 °C); pH 4,2 - 9,3 (optimaalne pH 7,0-7,5) ja kõrge naatriumkloriidi kontsentratsiooniga (kuni 15% NaCl). Need omadused võimaldavad bakteritel asustada mitmesuguseid toiduaineid. Kõige sagedamini põhjustavad stafülokoki toidumürgitust liha ja lihatooted, linnuliha, munad, salatid (sisaldavad muna, tuunikala, kana, kartulit, pastat), kondiitritooted (näiteks koorepirukad, šokolaadiekleerid), võileivatäidised, piim ja Piimatooted. Seega võivad tooted, mida valmistamisprotsessis märkimisväärse aja jooksul käsitsi töödeldakse ja seejärel soojas säilitatakse, olla tõeliseks stafülokoki toidumürgituse allikaks.
Stafülokoki infektsioonist tingitud mürgistus
Haiguse põhjus on toodetud Staphylococcus aureus toksiine, mistõttu haigust iseloomustab väga lühike peiteaeg – tavaliselt 0,5–6 tundi. Patsiendi vastuvõtlikkus toksiinidele määratakse patsiendi seisundi, toksiini kontsentratsiooni ja söödud saastunud toidu koguse järgi. Nakkuslik annus võib olla alla 1,0 μg, mis vastab ligikaudu 100 000 CFU/g toote kohta. Haiguse kõige levinumad sümptomid on iiveldus, oksendamine, vastumeelsus toidule, kõhukrambid ja kõhulahtisus. Rehabilitatsiooniperiood kestab tavaliselt 1-3 päeva, kuid rasketel juhtudel võib täielik taastumine võtta kauem aega. Haigus ei levi teistele, patsiendid peavad võtma palju vedelikku.
Patogeensus, haiguse ulatus
Koaguloospositiivsed stafülokokid on grampositiivsed katalaaspositiivsed mikroorganismid, mis moodustavad tüüpilisi kolooniaid selektiivsel diagnostilisel toitekeskkonnal, andes positiivse reaktsiooni koagulaasile (S. aureus; S. aureus spp. anaerobius) või agaril küüliku plasmale spetsiifilise reaktsiooni. standardmeetodil määramisel küüliku plasma ja fibrinogeeniga. Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) on koaguloospositiivne stafülokokk, mis moodustub atsetoiin ja maltoosi kääritamine aeroobsetes tingimustes nende biokeemiliste testide määramise ajal standardmeetodit kasutades.
Hiljutiste arenenud riikides tehtud uuringute kohaselt viib kõigist teadaolevatest infektsioonidest kõige sagedamini surma üks kuulsamaid "tavalisi" baktereid - Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus; kõiki koagulaasi tootvaid stafülokoki tüvesid nimetatakse nn. kuldne). See oportunistlik mikroorganism on isoleeritud 15–30% tervetest inimestest ja enamikul neist on kandmine piiratud mitme kuuga. Kui patsiendil on puudulik immuunsus, põhjustab patogeen arvukalt eluohtlikke zoonootilisi infektsioone. Kõige tavalisem toksiline stafülokokkhaigus on toidumürgitus. Paljud Staphylococcus aureus'e tüved toodavad enterotoksiin. See mürk põhjustab kõhulahtisust, oksendamist, valu ja kõhukrampe. Uus-Meremaa uuringu kohaselt suri 8,6% Staphylococcus aureuse põhjustatud sepsisega haiglasse sattunud lastest. Paljude riikide dermatoveneroloogid on mures stafülokoki infektsioonide ja stafülokokist põhjustatud surmajuhtumite arvu suurenemise pärast. Bakterid põhjustavad toidu, sealhulgas nn mitteriknevate toiduainete riknemist. Kui bakterid paljunevad näiteks kõvas juustus ja salaamis, toodavad nad toksiine. Need on tõsise toidumürgituse kõige levinumad põhjused. Küpsetamise ajal stafülokokk sureb, kuid selle kuumuskindlad toksiinid ei hävi. Stafülokokid on paljude inimeste haiguste, sealhulgas südamehaiguste (endokardiit ja perikardiit) ning luu- ja lihaskonna haiguste (osteomüeliit ja nakkuslik artriit) põhjustajad. Nahal ja pehmetel kudedel põhjustab stafülokokk nn ketendava naha sündroom Ja tselluliit, mis on kõige levinumad nakkuslikud nahahaigused. WHO andmetel on Staphylococcus aureus kõige sagedamini meditsiiniasutustes nakatunud bakterite nimekirjas. Intravenoossete kateetrite ja muude meditsiiniseadmete kasutamisel, mis puutuvad kokku keha sisekeskkonnaga, on suur stafülokoki infektsiooni oht. Riskifaktoriks on ka kunstlik ventilatsioon. Stafülokoki infektsioonid võivad tekkida ka siis, kui haigla tavalisi hügieenitavasid ei järgita. Kokku moodustab S. aureus umbes 30% kõigist "haiglainfektsioonidest". Pideva desinfektsioonivahendite ja antibiootikumide kasutamise tingimustes ellujäävad stafülokokid on personalile tõsine riskitegur ja haiglanakkuste aluseks.
Taksonoomia
Stafülokokid on sfääriliste, mitteliikuvate, asporogeensete, grampositiivsete, kemoorganotroofsete, fakultatiivsete anaeroobsete või aeroobsete bakterite perekond Micrococcaceae perekonnast. Perekonda Staphylococcus kuulub umbes 30 liiki, millest 14 leidub inimese nahal ja limaskestadel, sealhulgas S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus. Liikide tuvastamiseks kasutatakse peamiselt 3 testi: plasmakoagulaasi tootmine, mannitooli ja glükoosi anaeroobne fermentatsioon. Bakteri antigeenne struktuur on keeruline, liigispetsiifilised antigeenid on teikhoiinhapped.
Bakterite ja kolooniate morfoloogia
Bakterirakud läbimõõduga 0,5-1,5 mikronit jagunevad asümmeetriliselt mitmel tasapinnal, moodustades viinamarjakobaraid meenutavaid kobaraid. Seal on üksikud rakud, paarid ja tetrad. Rakusein sisaldab peptidoglükaani ja glütseriinhapet. Stafülokokid moodustavad siledaid kolooniaid, mis on karotenoidide mõjul kollaseks või oranžiks värvunud. Pigmentatsioon ei ole aga liigiomane. Kollane-soolagaril kasvatamisel moodustuvad hägused, ümarad siledad kreemika, kollase või oranži värvi kolooniad. Vedelas keskkonnas kasvatamisel põhjustavad bakterid nende ühtlase hägususe ja seejärel lahtise sette moodustumise, mis muutub viskoosseks massiks.
Füsioloogilised ja biokeemilised omadused
Stafülokokid on fakultatiivsed anaeroobid, kuid kasvavad hapniku juuresolekul kiiresti ja rikkalikult. Oksüdatiivse ja ensümaatilise metabolismiga kemoorganotroofid. Biokeemiliselt väga aktiivne. Nad toodavad katalaasi; anaeroobsetes tingimustes glükoosiga söötmes moodustavad enamik tüvesid atsetoiini (positiivne Voges-Proskaueri reaktsioon). Nad eraldavad argeniinipuljongil kasvades ammoniaaki, redutseerivad nitraadid nitrititeks või molekulaarseks lämmastikuks, hüdrolüüsivad aktiivselt valke ning aeroobsetes tingimustes lagundavad paljud süsivesikud äädikhappeks ja süsihappegaasiks. Üldine tunnus on glükoosi kääritamine anaeroobsetes tingimustes, mis eristab stafülokokke mikrokokkidest. Bakterid kasvavad aluselises söötmes temperatuuril 37°C (optimaalne 35-40°C), kuid võivad kasvada ka laiemas temperatuurivahemikus (6,5÷46°C). Optimaalset kasvu täheldati pH 7,0-7,5 juures, kuid kasv on võimalik vahemikus pH=4,2÷9,3. Nad taluvad hästi kõrget osmootset rõhku, nii et nende jaoks on valikuliseks substraadiks kõrge naatriumkloriidi kontsentratsiooniga sööde - munakollane sool või piimasoola agar. Stafülokokid taluvad hästi kuivatamist, säilitades samal ajal virulentsuse; surevad 10-12 tunni jooksul otsese päikesevalguse käes. Üsna kuumuskindel: 70-80 o C juures surevad 20-30 minutiga, 150 o C juures - 10 minutiga; kuiv kuumus tapab nad 2 tunniga. Bakterid on vastupidavad madalatele temperatuuridele, korduv külmutamine ja sulatamine ei tapa neid. Stafülokokid on vähem vastupidavad desinfektsioonivahendite (vesinikperoksiid jne) toimele, kuid vastupidavad puhta etanooli toimele. Aeroobsetes tingimustes kasvatades vajavad bakterid aminohappeid ja vitamiine, anaeroobsetes tingimustes kasvatades vajavad nad täiendavat uratsiili ja täiendavaid süsinikuallikaid. Vereagaril võib tekkida mitut tüüpi hemolüsiinid- ained, mis kahjustavad punaseid vereliblesid, leukotsüüte ja teisi rakke. Nad toodavad ka fibrinolüsiini, fosfataasi ja bakteriotsiine; üksikud tüved toodavad koagulaasi, DNAaasi, H 2 S ja enterotoksiine (kuni 10 liiki, mida iseloomustab letaalne, hemolüütiline või nekrootiline toime). Mõned süsivesikud kääritatakse, vabastades happe ilma gaasita. Resistentne lüsosüümile, tundlik erinevate antibiootikumide suhtes. Inimestele patogeensetel liikidel on üks neljast toksilisuse faktorist, näiteks: 1) eksotoksiin, 2) enterotoksiin, 3) leukotsidiin, 4) koagulaas (patogeensuse ensüüm). Antibiootikumide ristresistentsust kontrollib R-plasmiid. See resistentsuse tegur edastatakse transduktsiooni teel teistele prokarüootidele.
Nakkuse edasikandumise allikad ja tegurid
Stafülokokid on tinglikult patogeensed mikroobid. Nad on inimeste ja loomade normaalse mikrofloora esindajad - nad koloniseerivad tihedalt erinevaid keha biotoope (nahk, nina ja neelu limaskest, kõhuõõne ja kaenlaalused). Stafülokokid sisenevad kehasse läbi naha ja limaskestade õhus lendlevate tilkade ja õhutolmuga. Nakkuse mehhanism on tavaliselt seotud patogeeni ülekandumisega koloniseerimiskohtadest traumeeritud pinnale (näiteks nahale). Olulist rolli mängivad ka tihedad kontaktid kandjate ja stafülokokkide kahjustuste all kannatavate inimestega. Stafülokokk on vastupidav paljudele välismõjudele, seetõttu leidub teda väliskeskkonnas – õhus (tolm), pinnases ja majapidamistarvetel. Stafülokoki infektsiooni edasikandumise allikaid ja tegureid on palju. Peamised allikad on stafülokoki infektsiooni kustutatud vormide või kandjatega patsiendid, harvemini haiged loomad, näiteks (toidu stafülokoki mürgistuse ja enterokoliidi korral) mastiidiga lehmad. Suurimat epidemioloogilist ohtu kujutavad meditsiinitöötajad, kes võivad olla haigla stafülokoki tüvede kandjad. Stafülokoki infektsiooni iseloomustab mehhanismide, radade ja ülekandetegurite paljusus. Bakterid võivad edasi kanduda kontakti mittesteriilse meditsiiniinstrumendi kaudu meditsiinitöötajate käte kaudu, toitumisalane piimatoodetega ja kondiitritoodetega, aerogeensed ja parenteraalselt(süstide jaoks).
 |
Patogenees
Vastuvõtlikkus stafülokokkide suhtes on normaalse immuunstaatusega inimestel väga madal ja immuunpuudulikkusega peremeesorganismidel suurenenud. Väga sageli areneb stafülokoki infektsioon sekundaarse immuunpuudulikkuse taustal. Patogeeni patogeensusteguriteks on mikrokapsel, rakuseina komponendid, agressiooniensüümid ja toksiinid. Mikrokapsel kaitseb baktereid fagotsütoosi eest, soodustab mikroobide adhesiooni ja nende levikut kudedes. Kasvamisel sisse vitro seda ei moodustata. Rakuseina komponendid stimuleerivad põletikuliste reaktsioonide teket ja neutraliseerivad immunoglobuliine, immobiliseerivad fagotsüüte. Teichoiinhapped käivitavad kaskaadi kompliment(immunoloogiliste reaktsioonide komponent) alternatiivse raja kaudu. Stafülokoki agressiooniensüümi koagulaas eksisteerib kolmes antigeenses vormis ja põhjustab vereseerumi hüübimist. Paljude keha patoloogiliste seisundite korral lahkuvad stafülokokid oma tavalistest biotoopidest, ületavad koebarjääre ja viiakse vereringega keha sisemisse steriilsesse keskkonda. Seal tekitavad nad tüüpilise patoloogilise reaktsiooni – põletiku. See avaldub erineva lokaliseerimise ja raskusastmega mädaste-põletikuliste protsessidena kuni sepsise ja septikopeemiani. Stafülokokid on haiguste etioloogiline tegur, millest valdav enamus on mäda-põletikulised. Bakterid võivad nakatada peaaegu kõiki kehakudesid. S. aureus'e põhjustatud infektsioonid on mitmekesised ja hõlmavad enam kui 100 nosoloogilist vormi, sealhulgas haigused: 1) nahk ja nahaalune kude(abtsessid, kurjategijad, furunkuloos jne), 2) hingamiselundid(stenokardia, pleuriit, kopsupõletik jne), 3) närvisüsteem Ja meeleelundid(meningiit, kõrvapõletik, konjunktiviit jne), 4) seedeorganid(stomatiit, peritoniit, enteriit, enterokoliit, toidumürgitus jne), 5) lihasluukonna süsteem Ja sidekoe(artriit, osteomüeliit), 6) vereringe(endokardiit, flebiit jne), 7) urogenitaalorganid(tsüstiit, mastiit jne), 8) stafülokoki sepsis. Need haigused võivad olla ägedad või kroonilised. Toidumürgitus avaldub kliiniliselt oksendamise ja vesise kõhulahtisusena 2-6 tunni jooksul pärast nakatunud toiduainete – kreemjas maiustuse, konservi, liha- ja juurviljasalatite jms – söömist.
Tuvastamismeetodid
Reeglina kasvavad selektiivsel diferentsiaalsöötmel ainult stafülokokkide kolooniad. Stafülokoki isoleerimine puhaskultuuris võimaldab eeldada haiguse stafülokoki etioloogiat. Uurimiseks mõeldud biomaterjal valitakse sõltuvalt haiguse kliinilisest pildist. Toidustafülokoki mürgistuse käigus isoleeritud S. aureus tüvedes määratakse enterotoksiinide esinemine bioloogiliste ja immunoloogiliste testidega. Traditsiooniliste meetoditega saab esialgsed tulemused stafülokoki infektsiooni tuvastamiseks saada 1-2 päeva pärast.
Klassikaline meetod
S. aureus'e tuvastamise meetod põhineb toote proovi ja/või selle proovi lahjenduste külvamisel vedelasse selektiivsöötmesse, põllukultuuride inkubeerimisel, kultiveerimisvedeliku uuesti külvamisel agar-selektiivse diagnostilise söötme pinnale ja kinnitamisel biokeemilised omadused, et isoleeritud tüüpilised ja/või ebatüüpilised kolooniad kuuluvad S. aureusesse.