Helicobacteri väljaheidete uurimine, milline meetod on parem. Helicobacter pylori infektsiooni diagnoosimine

Kaasaegsed diagnostikameetodid võimaldavad meil palju õppida inimese tervisliku seisundi kohta tema bioloogilistest vedelikest: verest, uriinist, väljaheitest.

Väljaheiteid uurides saate teada, kas see on organismis settinud, võib põhjustada gastriiti ja provotseerida onkopatoloogiat.

Selle mikroobi olemasolu või puudumise väljaheiteid saab uurida kolmel viisil: kultuuriline, immunoloogiline ning kõige usaldusväärsem ja levinum polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) meetod.

Bakter ise on oma tavapärases S-kujulises tervikuna väljaheites üliharuldane. Jämesool ja väljaheited ei ole mikroorganismile soodne keskkond, seetõttu võib see neisse sattudes omandada ümara kooki kuju, esinedes aeg-ajalt sellisel kujul väljaheites.

Kultiveerimismeetod eeldab uuritava materjali osa külvamist toitainekeskkonnale, milles bakter tunneb end hästi ja hakkab paljunema.

Sellel viisil:

Kasvavad kolooniad, mida analüüsitakse, värvitakse spetsiaalsete reagentidega ja uuritakse mikroskoobi all. Sel viisil kasvatatakse patogeenseid mikroobe nende edasise uurimise eesmärgil.

Lisaks bakteri enda tuvastamisele võimaldab meetod kindlaks teha patogeeni tundlikkuse konkreetse antibiootikumi suhtes. Kui koloonia kasv säilib ravimi lisamisel - H. pylori on antibakteriaalsele ainele resistentne ja mikroorganismid surevad - on otstarbekas määrata see ravim patsiendile ravi ja likvideerimise eesmärgil, bakterid. on selle suhtes tundlikud.

Kultiveerimismeetod on väga usaldusväärne, kuid ainult siis, kui võetud bioloogilisest materjalist leitakse mikroobi S-vorm. Sellel meetodil on oma puudused ja seetõttu pole see väga levinud:

• Uuringu kestus on 6 kuni 12 päeva
• Kallis Helicobacter plating sööde
• Spetsiifilised tingimused kolooniate kasvusöötme jaoks, mida on laboris raske paljundada
• Bakteri S-kujuliste vormide harv esinemine väljaheites, mis sobivad kasvuks toitainete tingimustes (kokkide vorme ei uurita)

Helicobacter pylori antigeeni määramine väljaheites immunoloogilise meetodiga

Patsiendi väljaheiteid saab läbi viia immunoloogilise uuringuga, mis võimaldab tuvastada mitte mikroorganismi ennast, vaid selle osi - antigeene.

Selle jaoks:

Võõrantigeeni – bakteri osade, selle ainevahetusproduktide, geneetilise materjali – tuvastamiseks kasutatakse spetsiaalseid antikehi.

Võõrainega suhtlemisel moodustavad antikehad spetsiifilise kompleksi, mis määratakse ensüümi immuunanalüüsiga.

Seda väljaheidete uurimise meetodit kasutatakse Venemaal harva, paljud laborid ei ole varustatud vajalike reaktiivide ja vajalike testidega.

Kuid tulevikus on võimalik lisada see Helicobacter pylori tuvastamise meetod skriiningtestidena: suurte elanikkonnarühmade uuringud bakteriga nakatumise tuvastamiseks.

PCR väljaheite analüüs Helicobacter pylori jaoks

See on kõige levinum meetod selle bakteri väljaheidete suure täpsusega uurimiseks.

Meetodi olemus on järgmine:

Patsiendi bioloogilisest materjalist eraldatakse osa bakteri DNA-st, mida seejärel spetsiaalsel aparaadil kunstlikult palju kordi dubleeritakse, nii taastatakse H.pylori geneetiline kood.

Kui mikroobi genoomne fragment saavutab piisava suuruse, võrreldakse seda referentsiga ja tehakse järeldus uuritava mikroorganismi kohta: kas tegu on helikobakteri või mõne muu patogeeniga.

Positiivne PCR analüüs tähendab Helicobacter pylori infektsiooni esinemist inimkehas: bakter on maos, selle DNA fragmendid leiti väljaheitest ja ühtisid võrdluseks olevatega.

PCR-meetodi eelised:

• Kõrge täpsus: isegi väikesest kogusest geneetilisest materjalist piisab uuringuks, mille kõrge kindlusprotsent läheneb 99%.
• Uurimiskiirus. Analüüsiks piisab 2 päevast, kuid on olemas kiirmeetodid, mis võimaldavad teil diagnoosi panna mõne tunniga.
• Valutumatus. Meetod on atraumaatiline, mitteinvasiivne. Võimaldab uurida väikelapsi, eakaid, nõrgestatud patsiente, kellel on vastunäidustatud EGD biopsia ja muude endoskoopiliste manipulatsioonidega.
• Täpse tulemuse saamiseks ei ole vaja tuvastada täpselt S või spiraalikujulisi DNA fragmente, analüüsimiseks sobivad ka kooki mikroobide osad (enim leitakse väljaheites).

PCR diagnostikal on palju rohkem plusse kui miinuseid. Puuduste hulka kuuluvad:

• Analüüsi suhteliselt kõrge hind.
• Mikroobsete DNA fragmentide säilitamine väljaheites ja pärast likvideerimist. Isegi kui ravi on edukalt lõppenud ja bakter organismis puudub, leitakse mõne aja pärast bioloogilisest materjalist DNA fragmente ja Helicobacter pylori väljaheite test võib anda positiivse tulemuse. Seetõttu on ravi kontrolli all hoidmiseks soovitatav PCR-diagnostika teha mitte varem kui 1 kuu pärast ravi lõppu.
• Spetsiaalsed kallid kõrgtehnoloogilised seadmed, mille tööks on vaja koolitatud ja koolitatud personali.

Väljaheidete analüüs antigeeni Helicobacter pylori suhtes in vitro

Kõik patsiendi väljaheitega läbi viidud diagnostilised uuringud viitavad in vitro manipulatsioonidele - "in vitro", "klaasis", väljaspool inimkeha.

Neil on piisavalt kõrge täpsus ja teabesisu, kui nad taotlevad mikroobi tuvastamise eesmärki.

Kuid mitte kõiki inimkehas "in vivo" toimuvaid protsesse ei saa sama usaldusväärsusega "in vitro" uuesti luua. Näiteks kultuurimeetodil analüüsitud tundlikkuse määramine antibiootikumide suhtes.

Uurides mikroobikolooniate antibakteriaalset tundlikkust toitekultuuridel, selgus, et in vitro bakteritele sobivaimad preparaadid "ei toiminud", osutusid patsiendi ravimisel ebaefektiivseks.

In vitro antibiootikumide tundlikkuse uuringute tulemused ei ole alati täpsed.

Kuidas läbida Helicobacter pylori väljaheite testi

Helicobacteri väljaheidete analüüsi usaldusväärsus

PCR - väljaheidete diagnoos on kõigist kolmest ülaltoodud meetodist kõige usaldusväärsem, see on mingil määral halvem ainult biopsia endoskoopilisele uuringule.

Väljaheidete PCR-analüüs annab harva valepositiivseid tulemusi, on kõrge spetsiifilisusega, võimaldab teil uurida Helicobacter pylori levinumate kookivormide DNA-materjali väljaheites.

Kultuuri- ja immunoloogilise meetodi usaldusväärsus on madalam kui PCR. Need meetodid "patutavad" valepositiivsete tulemuste ilmnemisega, kuid koos teiste Helicobacter pylori tuvastamise meetoditega on need suurepärane vahend diagnoosimiseks.

H. pylori antigeen väljaheites

Kui väljaheites leitakse Helicobacter pylori antigeen või uuritava mikroorganismi DNA fragment, tähendab see, et:

• Inimene on nakatunud H. pylori'ga.
• Eradikatsiooniravi ei ole piisavalt tõhus ja mikroob pole seedetrakti limaskestalt kadunud.
• Pärast ravi on möödunud vähem kui kuu ja surnud patogeenide antigeenid jäävad väljaheitesse.

Et välistada valepositiivne tulemus pärast Helicobacter-vastase raviskeemi läbimist (kui analüüs on positiivne ja inimkeha ei sisalda H. pylori't), ei tohiks kiirustada ravi efektiivsuse väljaselgitamisega, vaid oodata. vähemalt üks kuu pärast selle valmimist.

Eduka läbiviimise korral ei tuvastata väljaheites mikroobi antigeene ega DNA-d 1 kuu pärast likvideerimist. Testi tulemus on negatiivne.

Kui esialgse analüüsi käigus avastatakse antigeene, soovitab arst patsiendil läbida spetsiaalse ravikuuri, mille eesmärk on H. pylori hävitamine.

Helicobacter pylori on üks inimesele ohtlikumaid baktereid. Patogeenne mikroorganism on võimeline esile kutsuma tõsiseid kõrvalekaldeid seedetrakti ja keha kui terviku funktsionaalses seisundis. Seda tüüpi baktereid iseloomustab suurenenud resistentsus paljude tegurite suhtes.

Ravi tulemus sõltub otseselt õigesti koostatud raviskeemist. Mikroorganismide tundlikkuse määramiseks teatud tüüpi antibakteriaalsete ravimite suhtes kasutatakse väljaheite masside erianalüüse. Igal tehnikal on oma eelised ja puudused. Täpsete tulemuste saamiseks on soovitatav läbi viia mitu testi.

Pylori esineb kehas pikka aega asümptomaatiliselt. Seedetrakti funktsionaalse seisundi rikkumise märgid ilmnevad ainult bakterite aktiivse eluga. Üks peamisi provotseerivaid tegureid on immuunsuse vähenemine.

Kui patsiendil on teatud haigused või individuaalsed sümptomid, ei muutu analüüsiprotseduur kohustuslikuks.

Näidustused analüüsiks:

• antibiootikumravi läbiviimine (ravi tulemuste jälgimiseks);
• erosioon ja;
• seedetrakti funktsionaalse seisundi rikkumise sümptomid (erineva lokaliseerimise korrapärased või valuaistingud);
• geneetiline eelsoodumus provotseeritud haigustele (seedesüsteemi pahaloomulised kasvajad, seedetrakti kroonilised patoloogiad);
• mao limaskestade progresseeruv atroofia;
• regulaarne pärast söömist;
• rauavaegusaneemia;
• järsk kehakaalu langus koos teiste seedetrakti funktsionaalse seisundi kõrvalekallete sümptomitega;
• vere olemasolu oksendamises või väljaheites;
• tuvastatud neoplasmid ja polüübid seedesüsteemis;
• söögitoru haavand või gastroösofageaalne refluks.

2. Kuidas analüüsi õigesti võtta?

Väljaheidete patogeensete bakterite esinemise kontrollimise protseduuri läbiviimine eeldab reeglite järgimist. Kui analüüsiks ettevalmistamine või bioloogilise materjali kogumine on valesti tehtud, võivad testi tulemused näidata vale tulemust. Fekaalidel on teatud säilivusaeg. Kui materjal tarnitakse laborisse tähtaegu rikkudes, võib ka testimine muutuda ebausaldusväärseks.

Ettevalmistus analüüsi edastamiseks

Väljaheidete analüüsi ettevalmistavad meetmed hõlmavad soovitusi teatud dieedi järgimiseks, samuti ravimteraapia kohandamist (kui see on olemas). Kui ettenähtud ravimite võtmist ei ole võimalik ajutiselt katkestada, tuleb sellest nüansist arstile teada anda.

Konteinerite ettevalmistamine

Steriilset konteinerit bioloogilise materjali kogumiseks saab osta apteegist. Sellise purgi ostmisel on saaste olemasolu välistatud. Teise võimalusena võite kasutada muid mahutivalikuid (näiteks imikutoidu konteinereid). Oluline nüanss on nende steriilsus. Konteinerid peaksid olema võimalikult puhtad igasugusest saastumisest.

Materjali kogumine

Keelatud on koguda väljaheiteid mähkmest või tualettruumist. Ideaalne variant on bioloogiline materjal võtta potist või kilekotist. Väljaheite säilitusnõu peaks olema kolmandiku võrra täis. Mahuti külge tuleb kinnitada täidetud suund.

Kuidas ja kui kaua saab materjali säilitada?

Väljaheite konteiner toimetatakse laborisse esimesel võimalusel. Kui pole võimalust materjali kiiresti analüüsimiseks saata, võite kasutada kahte salvestusvõimalust. Esimesel juhul külmutatakse väljaheited üks kord. Teises - säilitatakse mitte rohkem kui kaks päeva temperatuuril, mis ei ületa 4 kraadi.

3. Helicobacter bakteri määramise taktika fekaalianalüüsi abil

Spetsiifilise analüüsi määramise eest vastutab arst. Spetsialist võtab arvesse patsiendi tervisliku seisundi individuaalset kliinilist pilti. Seedetrakti funktsionaalse kõrvalekalde kahtluse korral saate ise analüüsid teha.

Molekulaardiagnostika

Molekulaaranalüüs paljastab bakteri spetsiifilise DNA. Kood dubleeritakse spetsiaalses seadmes. Kui bakter saavutab soovitud suuruse, võrreldakse seda etanooliga. Kui DNA osad vastavad originaalile, on testi tulemus positiivne (tuvastatud). Metoodikat iseloomustab kõrge teabesisaldus.

Kultuurianalüüs

Bakterite külvamine (ehk kultuurianalüüs) kuulub mikrobioloogiliste uurimismeetodite kategooriasse. Protseduuri käigus paigutatakse bioloogiline materjal keskkonda, mis on kõige soodsam patogeensete mikroorganismide paljunemiseks. Nädal hiljem uuritakse väljaheiteid mikroskoobi all.

Identifitseerimiseks võetakse arvesse bakterite värvust ja nende võimet teatud reaktsioonidesse astuda.

Tehnika omadused:

• protseduur võimaldab tuvastada patoloogilist antigeeni;
• bioloogilise materjali uurimise käigus viiakse läbi antibakteriaalsete ravimite tundlikkuse test;
• Uuringu tulemused võimaldavad valida kõige tõhusama raviskeemi.

Helicobacter pylori antigeeni määramine väljaheites immunoloogilise meetodiga

Immunoloogiliste testide läbiviimise peamine eesmärk tuvastamise ajal on antigeeni + antikeha komplekside määramine. Testimiseks kasutatakse märgistatud antikehi. Väljaheitega reageerides muutuvad sellised ained teatud muutusteks. Antikehad suudavad määrata mitte ainult patogeensete bakterite, vaid ka nende osade ja jääkainete olemasolu väljaheites.

PCR-diagnostika eelised ja puudused

PCR diagnostikal on mitmeid eeliseid ja puudusi. Teatud tüüpi patogeenseid baktereid saab tuvastada ainult seda meetodit kasutades (näiteks tsütotoksilised mikroorganismid). Analüüsiks materjali kogumine ei põhjusta patsiendile valu ega ebamugavustunnet. Protseduur näitab kõige usaldusväärsemaid tulemusi.

Tehnika eelised:

• protseduur võimaldab tuvastada erinevaid patogeensete bakterite tüvesid;
• meetodil on kõrge tundlikkus;
• analüüs on patsiendile ohutu (materjali kogumiseks ei kasutata meditsiinilisi instrumente);
• bioloogilise materjali võtmise protsessi mitteinvasiivsus ja lihtsus;
• testi kõrge spetsiifilisuse aste;
• meetod võimaldab teil määrata mitte ainult spiraalseid, vaid ka kooki tüüpi baktereid.

Testi kõrge tundlikkus on selle samaaegseks eeliseks ja puuduseks. Analüüs määrab täpselt bakterite olemasolu, kuid kui bioloogiline materjal või anum on saastunud, võivad protseduuri tulemused olla valepositiivsed.

Vale näitajate välistamiseks tuleks järgida kõiki nende uurimiseks väljaheidete kogumise reegleid.

Muud puudused:

• protseduuri suhteliselt kõrge hind;
• võimetus määrata bakterite tundlikkust antibakteriaalsete ravimite suhtes;
• madalam tundlikkuse indeks võrreldes mao limaskesta biopsia uurimise protseduuriga.

Väljaheidete analüüs antigeeni Helicobacter pylori suhtes in vitro

Väljaheidete uurimise protseduurid viiakse läbi väljaspool patsiendi keha ("in vitro" - "klaasis", "in vitro"). Mikroobi tuvastamiseks on sellised meetodid võimalikult täpsed ja tõhusad. Kuid protseduuridel on mõned puudused. Mõnda inimkehas toimuvat protsessi ei saa kunstlikult taasluua.

Analüüsid võivad näidata bakterite tundlikkuse taset teatud antibiootikumide suhtes, kuid sellised testid ei anna sada protsenti teavet.

4. Tulemuste dešifreerimine

Uuringut kasutatakse antigeenide määramiseksH. pyloriväljaheiteproovides immunokromatograafia abil infektsiooni diagnoosimiseksH. pylori.

Test on soovitatav paljude rahvusvaheliste konsensustega, väga informatiivne meetod, mis on helicobacter pylori diagnoosimise "kuldstandard", mida kasutatakse esmaseks diagnoosimiseks ja helikobakterivastase ravi jälgimiseks.

Üks paljutõotavamaid mitteinvasiivseid meetodeid Helicobacter pylori infektsiooni (mis on ka erinevate seedetrakti onkoloogiliste haiguste jms riskifaktor) kinnitamiseks on patogeeni antigeenide määramine väljaheites. meetodväga tundlik ja spetsiifiline (umbes 90%), minimaalselt invasiivne, lihtne kasutada.Testi kasutamine on eriti mugav pediaatrias.

Meetodi eelised:

1. Mitteinvasiivne meetod (diagnoosimine ilma fibrogastroskoopia kasutamiseta).

2. Bakteri nii aktiivsete kui ka kokkide vormide tuvastamine.

3. Kõrge täpsus, tundlikkus ja spetsiifilisus (kuni 95-98%).

4. Proovide pikaajaline säilitamine ilma teabesisu kadumiseta, samuti transpordi võimalus.

5. Meetodit soovitavad 3. rahvusvahelised (Maastrichti) lepingud helikobakterioosi diagnoosimiseks ja raviks, Venemaa gastroenteroloogide ühing ja Venemaa Helicobacter pylori uurimisrühm kui patsiendile kõige täpsem ja mugavam.

6. Kasutatakse täiskasvanutel ja lastel.

7. Eelnevat ettevalmistust pole vaja.

liiki bakterid Helicobacter pylori on enamiku gastriidi, kuni 80% maohaavandite ja kuni 90% kaksteistsõrmiksoole haavandite põhjus. Arvatakse, et kogu maailmas on nakatunud üle poole elanikkonnast ja Venemaal üle 80% elanikest.

Helikobakterioos- See on laialt levinud nakkushaigus, millega kaasneb patogeeni suukaudne, fekaal-oraalne ja kontakti ülekandumine, millega kaasneb mao ja kaksteistsõrmiksoole antrumi domineeriv kahjustus. Nakkuse allikaks on haige inimene või bakterikandja ning immuunpuudulikkusega inimesed on selle suhtes kõige tundlikumad. Inkubatsiooniperiood on umbes seitse päeva.

Nakkuse tekitaja on Helicobacter pylori on spiraalne gramnegatiivne bakter, mis võib nakatada magu ja kaksteistsõrmiksoole. Helicobacter pylori põhjustab ainult eelsoodumust gastriidile ja peptilisele haavandile ning ainult täiendavate teguritega - veregrupp O (I), pärilik eelsoodumus, suitsetamine, alkoholi kuritarvitamine, haavandiliste ravimite võtmine, sagedane stress, alatoitumus - tekib haavand.

Nüüd on näidatud, et Helicobacter pylori infektsioon suurendab selle riski vähk kõht. Enam kui pooled maailma elanikkonnast on Helicobacter pylori kandjad, kuid enamikul kandjatel puuduvad sümptomid ja ainult umbes 15%-l areneb gastriit või peptilised haavandid.

Õppetööks ettevalmistamise reeglid:

• Eelnev ettevalmistus pole vajalik.

Helicobacter pylori väljaheidete analüüs- see on usaldusväärne tõend peptilist haavandit ja paljusid teisi inimese seedetrakti haigusi põhjustava bakteri esinemise kohta inimkehas. Selline analüüs on otsene tõend, kui tuvastatakse kas Helicobacter ise või selle DNA. Analüüsi usaldusväärsus on teadaolevatest kõrgeim.

Tulemus sõltub materjali õigest ettevalmistamisest ja kogumisest. Inimese kohalolek pole vajalik, piisab õigesti kogutud materjali õigeaegsest kohaletoimetamisest.

Ettevalmistus analüüsi edastamiseks

Valmistamisel peate rangelt järgima järgmisi reegleid:

Valmistamiseks piisab 3 päevast. Sel ajal on soovitatav loobuda kõigist ravimitest (kui see pole võimalik, öelge arstile nimetused ja annus). On vaja vähendada kala ja liha tarbimist, küpsetada neid paariks või keeta. Parim toit on sel ajal teraviljad ja hapupiimatooted, köögivilja- ja puuviljapüreed, nõrgad supid, neutraalsed looduslikud mahlad (õun, valge viinamarjad), kompotid, puuviljajoogid, nõrk tee, kibuvitsapuljong.

Konteinerite ettevalmistamine

Mõned laborid väljastavad analüüsimiseks konteinereid, sealhulgas nende maksumuse koguhinnas. See on parim variant. Väljaheidete konteinerit saab osta apteegist, hind on mitu rubla. Anumat müüakse steriilselt ning seda ei tohi avada, pühkida ega loputada. Kaane külge on kinnitatud plastiklusikas, millega kogutakse materjal kokku.

Kõige äärmuslikumal juhul võite kasutada hästi suletava kaanega klaaspurki (imikutoidust). Purk tuleb hästi pesta ja seejärel kaane ja lusika või muu esemega, mis väljaheiteid kogub, keema panna. Kui nõudele jäävad bakterid, on analüüs vale.

Materjali kogumine

WC-potist või mähkmest on võimatu materjali koguda. WC tuleks katta puhta kilekotiga, mähkme asemel (lapsele või voodihaigele) panna sellele õlilapp. Materjali on lubatud võtta puhtast potist.

Mahuti täidetakse mitte rohkem kui kolmandiku võrra, sulgege kaas tihedalt. Nõudele lisada saatekiri või kirjutada sildile (loetavalt) patsiendi perekonna- ja eesnimi, sünniaasta.

Kuidas ja kui kaua saab materjali säilitada?

Mahuti materjaliga toimetatakse laborisse võimalikult varakult, optimaalselt proovi võtmise päeval. Kiireloomulise kohaletoimetamise võimaluse puudumisel võib seda hoida külmkapis mitte rohkem kui 2 päeva temperatuuril, mis ei ületa +4 ° C. Kui on vaja pikemat ladustamist, külmutatakse materjal üks kord temperatuuril - 20°C.

Näitajate analüüsi ja tõlgendamise meetodid

Bioloogilist materjali saab uurida mitmel viisil.

Muud viisid helikobakteri tuvastamiseks

Uuringu käigus kasutatakse tavaliselt mitmeid meetodeid, et lõpuks kontrollida Helicobacter pylori olemasolu või puudumist:

Diagnostiliste testide komplekt sõltub meditsiiniasutuse varustusest. Histoloogilist uuringut peetakse "kullastandardiks". Kuid vähemalt kahe erineva testi positiivset tulemust peetakse piisavaks, et kinnitada bakteri olemasolu.

Mida teha positiivse analüüsiga?

Külastage esimesel võimalusel gastroenteroloogi, et selgitada välja, kas bakterite likvideerimine (kehast eemaldamine) on vajalik. See on mitmetähenduslik protsess, on vastunäidustusi, vajalik on arsti konsultatsioon.