Kui isoleeritud kultuuri testimisel saadud tulemused vastavad ülaltoodud andmetele, määratakse saadud bakteritüvi liigi Yersinia enterocolitica bakterikultuuriks.
Kui uuritav bakterikultuur ei ole liigitatud Yersinia enterocolitica bakteriks, on võimalik bakterisuspensiooni taaskasutada koos akumulatsioonisöötmega, mida hoitakse külmkapis temperatuuril +4°C.
Optimaalne lahendus on esitada uurimistööle mitte ainult üks uuritavast proovist proov, vaid terve seeria proove.
Materjali bakterioloogilise uuringu üldine tähtaeg on 7 päeva.
Liikide identifitseerimine toimub biokeemiliste ja seroloogiliste meetoditega.
Haiguse kiirendatud diagnoosimiseks võib kasutada katku bakteriofaagi. Bakteriofaag Y. pestis isoleeritakse erinevatest allikatest, sealhulgas haigete inimeste ja loomade kudedest, aga ka kirbudest. Paljud autorid seostavad haiguse loomulikku kiiret väljasuremist puhangu ajal bakteriofaagi esinemisega. Selle kõrge spetsiifilisus ja virulentsus katkubatsilli suhtes võimaldavad seda kasutada katku tuvastamiseks, lisades seda enne nakatamist uuritavale materjalile või suurendades bakteriofaagi tiitrit söötmes.
Kiireks tuvastamiseks kasutatakse ka fluorestseiiniga märgistatud AT-sid (võimaldab Y. pestis'e tuvastamist erinevates objektides esimese 2 uuringutunni jooksul), AT neutraliseerimisreaktsiooni, sadestamisreaktsiooni standardsetel agarplaatidel ja kiirendatud meetodit. Y. pestis'e kasv rikastussöötmel.
Samuti on välja töötatud meetodeid bioloogilise testi kiirendamiseks, näiteks glükokortikoidide või kanarebu manustamine nakatunud loomadele, mis võimaldab katku diagnoosimist kiirendada vähenenud virulentsuse korral või väikese nakkava annuse kasutamisel.
Peamised biokeemilised omadused, mis eristavad Y. pseudotuberculosis't ja Y. enterocoliticat, on toodud tabelites 15 ja 16. Täiendavad märgid võivad olla Voges-Proskaueri reaktsiooni tulemused: alati negatiivsed Y. pseudotuberculosis'e korral ja positiivsed temperatuuril 22-28 ° C Y. enterocolitica. Hiljuti on pakutud välja tsefsulodiini, irgasaani ja novobiotsiini sisaldavat selektiivset söödet (CIN agar) Y. enterocolitica isoleerimiseks väljaheitest.
Toitekeskkond Yersinia fosfaatpuhverdatud lahuse (PBS) kultiveerimiseks
Lahus A: KH 2 PO 4 – 9,08 g 1,0 l destilleeritud vees; lahus B: Na 2 HPO 4 2H 2 O – 11,87 g 1 liitris destilleeritud vees (pH 7,6-7,8). Kombineerige 150 ml lahust A 850 ml lahusega B. Valage 5 ml katseklaasidesse, steriliseerige 1 atm juures. 1 tunni jooksul.
Puhver-kaseiini-pärmi sööde (BCD)
Keskmise lõhenemisastmega kaseiinhüdrolüsaat – 2,0 ml (Dagestan Research Institute of Nutrient Media); pagaripärmi ekstrakt – 5,0 ml; fosfaatpuhverlahus (pH 7,6-7,8) – kogumahuni 1 liiter. Pagaripärmi ekstrakt: 500 g pärmile, mis on eelnevalt portselanmördis väikeses koguses destilleeritud vees homogeenseks massiks purustatud, lisada kuni 1 liiter destillaati. Valage suspensioon kolbi ja keetke segades madalal kuumusel 60 minutit. Jahutage suspensiooni 16-18 tundi temperatuuril 5 °C. Seejärel tühjendage supernatant ja filtreerige läbi laia pooridega paberfiltri. Valage valmistatud pärmiekstrakt pudelitesse ja steriliseerige 0,5 atm rõhu all. 30 minutit; hoida temperatuuril 5-8°C 12 kuud.
0,5 l fosfaatpuhverlahusele lisage 2,0 g kaseiinhüdrolüsaati (mis on eelnevalt valmistatud vastavalt etiketi juhistele) ja 5,0 ml pärmiekstrakti. Segage loksutades, lisage fosfaatpuhverlahust kogumahuni 1 liiter ja kontrollige ettevalmistatud söötme pH-d (peaks olema 7,6-7,8). Seejärel valage segu 5,0 ml katseklaasidesse ja autoklaavige 0,5 atm rõhu all. 20 minuti jooksul. Söödet saab kasutada 7-10 päeva jooksul, kui seda hoitakse külmkapis.
Klassikaline bakterioloogiline uuring on mikrobioloogilise diagnostika “kuldstandard”.
Bakterioloogiliste uuringute eesmärk on isoleerida patogeeni puhaskultuur ja see identifitseerida.
Bakterioloogilise uuringu algoritm:
Uuritava materjali esmane mikroskoopia (valikuline etapp, olenevalt materjali iseloomust);
Esmane külv puhaskultuuri isoleerimiseks;
Puhta kultuuri kogunemine;
isoleeritud kultuuri bioloogiliste omaduste kompleksi uurimine;
Patogeeni lõplik tuvastamine.
1. õppepäev
1. Esmane mikroskoopia
Primaarse mikroskoopia tulemus annab ligikaudse ettekujutuse mikroorganismide erinevate morfoloogiliste vormide olemasolust kliinilises materjalis ning võimaldab ka nende esmast identifitseerimist morfoloogiliste ja tooniliste omaduste järgi ning esmase inokulatsiooni söötme valimist.
Mädane eritis – vajalik esmane mikroskoopia.
Tserebrospinaalvedelik - vajalik on setete esmane mikroskoopia.
Röga - primaarne mikroskoopia tehakse lahjendustest 10 4–10 5.
Tampoonid kurgust ja ninast – esmast mikroskoopiat ei tehta.
Veri - primaarset mikroskoopiat ei tehta.
Väljaheited - primaarset mikroskoopiat ei tehta.
2. Esmane külvamine
Uuritav materjal pärast esmast mikroskoopiat või ilma selleta (väljaheited, uriin, nina- ja kurgutampoonid, veri) inokuleeritakse puhaskultuuri eraldamiseks sobivasse söötmesse:
Suhkrupuljong, vereagar - streptokokkide jaoks;
Kollase-soola-agar, vereagar - stafülokokkide jaoks;
Endo sööde - Enterobacteriaceae perekonna bakteritele;
MPA (lihapeptoonagar) – gramnegatiivsetele bakteritele;
MPA (külvimine Šukevitši meetodil) - Proteuse isoleerimiseks;
Kitta-Tarozzi sööde - anaeroobide isoleerimiseks;
Sabouraud sööde - seente isoleerimiseks.
Külv on bakterioloogilise uuringu esimene etapp (kui primaarset mikroskoopiat ei tehta).
Külvamine toimub järgmiselt:
Triibuga külvamine ja aasa laskmine. Materjal võetakse kaltsineeritud bakterioloogilise silmusega ja tassi ülemine väli on tihedalt nakatatud triibuga. Järgmisena kaltsineeritakse silmus uuesti ja viiakse tiheda seemnega sektorisse ning tõmmatakse 2-3 vertikaalset joont üle kogu tassi. Pärast seda pööratakse tass ümber, tiheda seemnega sektor jääb tassi alumisele väljale. Silmus kuumutatakse uuesti ja külv jaotatakse 2-3 horisontaalse tõmbega üle tassi.
Külv spaatliga. Materjal kantakse spaatli või pipetiga söötme pinnale ja seejärel puistatakse spaatliga üle kogu pinna.
Külv tampooniga. Inokuleerimiseks asetatakse uuritava materjaliga tampoon tassi ja selle sisu hõõrutakse ringjate liigutustega toitainekeskkonda.
Külv sektorite kaupa. Selle külviga tõmmatakse topsi põhi sektoriteks, külv toimub katkendlike liigutustega topsi servast keskele ja mööda sektoreid.
2. õppepäev
1. Registreerige kasv toitesöötmel homogeense või heterogeensena.
2. Viia läbi kultuuriväärtuste kirjeldus.
Kolooniate kirjeldamise algoritm
Toitekeskkonnal kasvamise tulemusena moodustuvad kolooniad (ühe raku järglased). Valitakse välja ja uuritakse isoleeritud kolooniaid – algab uuringu teine etapp, mille eesmärk on uurida bakterite kultuurilisi omadusi. Nende omaduste tundmine on vajalik saadud puhaskultuuri tuvastamiseks, kuna iga mikroorganismi tüüp, kui see kasvab teatud toitainekeskkonnas, vastab teatud kultuurilistele omadustele.
Kolooniad uurivad:
Makroskoopiliselt: palja silmaga läbivas ja peegeldunud valguses;
Mikroskoopiliselt: kuivmikroskoobisüsteemi väikese suurendusega.
Läbiva valguse käes uurivad nad:
Kolooniate suurus (suur, keskmine, väike, kääbus);
Koloonia kuju (korrapärane, ebakorrapärane, ümmargune);
Koloonia läbipaistvus (läbipaistev, läbipaistmatu).
Peegeldunud valguses määrake:
Värv (värvitu või värviline);
Pinna iseloom (sile, konarlik, läikiv, kare);
Kolooniate kõrgus söötme pinnast (surutud, tasane, kõrgendatud).
Hinnake mikroskoopiliselt:
Serv (sile, ebaühtlane);
Struktuur (homogeenne, ebahomogeenne).
Kolooniate uurimine lõpeb äigepreparaadi valmistamise, Grami värvimise ja mikroskoopiaga.
Kolooniast materjali võtmisel äigepreparaadi valmistamiseks hinnatakse selle konsistentsi (pehme, limane, kuiv).
Kui kultuur osutub mikroskoopias puhtaks, subkultuuritakse see akumuleerumiseks kaldus agarile.
3. õppepäev
1. Kasvumustri kirjeldus agari kaldega:
Homogeenne, heterogeenne;
Mööda lööki, pidev, pidev.
2. Kogunenud kultuuri puhtuse kontrollimine. Valmistatakse äigepreparaadid, värvitakse Gramiga ja uuritakse mikroskoopiliselt. Kui puhaskultuur on kogunenud, läbib see täiendava identifitseerimise. Bakterite identifitseerimine perekonna ja liikide kaupa põhineb metaboolsete omaduste – biokeemilise identifitseerimise ja antigeense struktuuri – seroloogilise identifitseerimise uurimisel.
3. Biokeemiliste omaduste uurimine. Biokeemilised omadused – bakterite võime lagundada teatud substraate vastavate ensüümide tootmise kaudu. Biokeemiliste omaduste uurimiseks kasutatakse erinevaid substraate sisaldavaid diferentsiaaldiagnostilisi söötmeid (kirjud seeriad). Nende hulka kuuluvad süsivesikutega Hissi sööde, lakmuspiim, želatiin, aminohapetega sööde, MPB (liha-peptoonpuljong) vesiniksulfiidi ja indooli indikaatoritega.
Sahharolüütilisi omadusi uuritakse Hissi söötmel. Need sisaldavad peptoonvett, süsivesikute substraati (erinevad mono- ja polüsahhariidid), mitmehüdroksüülseid alkohole ja indikaatorit.
Kui bakteritel on ensüüme, mis lagundavad süsivesikute substraati, vabastavad nad ainevahetusprodukte (hape või hape ja gaas). Happe moodustumisel muudab indikaator keskkonna värvi, gaasi moodustumisel registreeritakse söötme purunemised.
Proteolüütilisi omadusi uuritakse želatiinil ja lakmuspiimal kultiveerimisel. Kui bakteritel on proteaase, siis želatiin veeldub. Piima sisse ilmub kreemjas tromb ja selle kohal vedelik - piima peptoniseerimine (tulenevalt asjaolust, et bakteriaalsed proteaasid lagundavad piimakaseiini peptooniks).
Peptolüütilised omadused. Sagedamini suudavad bakterid lagundada valkude lagunemise vaheprodukte – peptoone. Selle protsessi saadused: amiinid (skatool, indool), aminohapped, gaasid (vesiniksulfiid, ammoniaak, süsinikdioksiid). Neid saab tuvastada indikaatorpaberi abil:
lakmustest - ammoniaagi tuvastamiseks;
Niisutatud oksaloäädikhappega - indooli tuvastamiseks;
Niisutatud pliatsetaadiga - vesiniksulfiidi tuvastamiseks. Aminohapete deamiinimise ja dekarboksüülimise saadused tuvastatakse testribade abil, mis muudavad värvi keskkonna pH muutumisel.
Uuringu 4. päev
1. Registreerige biokeemiliste analüüside tulemused. Pärast kultuuri identifitseerimist selle liigi järgi uuritakse mitmeid täiendavaid omadusi, nagu tundlikkus antibiootikumide suhtes, toksigeensus, virulentsusfaktorite olemasolu, plasmiidi profiil ja liigisisene diferentseerumine.
2. Biokeemilise identifitseerimise tulemused on seroloogilise tuvastamise aluseks. Eraldatud kultuuri seroloogiline identifitseerimine viiakse läbi klaasi aglutinatsioonireaktsioonis, kasutades sobivaid immuunadsorbeeritud seerumeid, mille valiku määravad biokeemilise identifitseerimise tulemused.
Liigisisene diferentseerumine – määramine, kas tüvi kuulub konkreetsesse fagovari, bakteriotsinogenovavari, bakteriotsinovari, biovari, resistovari jne. See võimaldab tuvastada epidemioloogilisi seoseid sama liigi tüvede vahel.
Eraldatud kultuuri tuvastamine võimaldab meil teha järelduse, milline mikroorganism on haiguse etioloogiline tegur. Oportunistlike bakterite eraldamisel tuleb järgida etioloogilise tähtsuse kriteeriume:
Bakterite esinemine materjalis patoloogilisest fookusest koguses vähemalt 10 5 CFU ml/g;
Korduv isoleerimine sama kultuuri materjalist;
Antikehade tiitri tõus patsiendi vereseerumis autotüve suhtes 4 korda või rohkem.
Bakterifaagide määramine (faagi tüpiseerimine)
Fagovaride tuvastamine toimub vastavalt epidemioloogilistele näidustustele, et luua haigete inimeste vahel epidemioloogilisi seoseid. Uuringu läbiviimiseks võtke MPA-ga Petri tassid, kuivatage pind, joonistage põhi ruutudeks ja märgistage need. Järgmisena külvatakse 3–4-tunnine kultuur puljongis murule, kuivatatakse ja igale ruudule kantakse tilk vastavat standardfaagi töölahjenduses. Põllukultuurid asetatakse päevaks termostaadi. 24 tunni pärast võetakse arvesse kultuuri tundlikkuse spektrit teatud faagide suhtes lüütilise toime tõttu.
bakteriotsünovari määramine
Bakteriotsinovari määramiseks määratakse uuritavate tüvede tundlikkus referentsbakteriotsünovari suhtes. Nagu faagi tüpiseerimine, viiakse see läbi epidemioloogiliste näidustuste kohaselt.
Uuringu läbiviimiseks külvatakse toitesöötmele vastavad standardseid tüüpilisi bakteriotsiine tootvad kultuurid. Põllukultuurid asetatakse 48 tunniks termostaadi temperatuurile 37 °C.
Indikaatorkultuuride kasvanud kolooniad inaktiveeritakse kloroformiga, misjärel valatakse pinnale 2-4 ml sulaagarit, millesse lisatakse esmalt 0,2 ml uuritavat 4-tunnist puljongikultuuri. Pärast agari kõvenemist asetatakse põllukultuurid uuesti 18-24 tunniks termostaadi, pärast määratud aja möödumist arvestatakse indikaatorkultuuride ümber kasvu inhibeerimise tsoonide olemasolu, millega määratakse uuritavate bakterite bakteriotsünovar.
©2015-2019 sait
Kõik õigused kuuluvad nende autoritele. See sait ei pretendeeri autorlusele, kuid pakub tasuta kasutamist.
Lehe loomise kuupäev: 2016-04-27
Bakterioloogiline kultuur (bakterioloogiline kultuur) on inimese bioloogilise materjali mikrobioloogiline laboriuuring, inokuleerides seda teatud toitekeskkonnale teatud temperatuuril, et tuvastada suvalise arvu patogeensete ja tinglikult patogeensete mikroorganismide olemasolu selles ja lahendada täiendavalt spetsiifilise ravi probleeme.
Teatud mikroorganismide eraldamisel viiakse läbi teine oluline analüüs - antibiogramm – tuvastatud patogeenide tundlikkuse määramine antibakteriaalsete ravimite ja bakteriofaagide suhtes.
Bakterioloogilise kultuuri eelised on järgmised:
Meetodi kõrge spetsiifilisus (see tähendab, et ristvalereaktsioone ei täheldata).
Võimalus uurida absoluutselt igasugust inimese bioloogilist vedelikku.
Terapeutiline eesmärk on määrata kindlaks tuvastatud mikroobi tundlikkus konkreetse raviaine suhtes (antibiootogramm), mis võimaldab teostada raviretsepte piisavalt suure täpsusega.
Bakterioloogilise kultuuri puudused:
Tulemuse saamise kestus.
Kõrged nõuded materjali kogumisele.
Teatud nõuded bakterioloogialabori personali kvalifikatsioonile.
Näidustused bakterioloogiliseks uuringuks
Mikrobioloogiliste uurimismeetodite kasutamine on meditsiinipraktikas üsna laialt levinud, eriti nakkushaiguste, günekoloogia, uroloogia, kirurgia, otolarüngoloogia, onkoloogia jt. Absoluutne näidustus bakterikultuuri vajaduse kohta on inimkeha organite ja süsteemide mis tahes põletikuline haigus või septilise protsessi kahtlus.
Materjal bakterite külvamiseks
Uurimiseks võetakse järgmised inimkeha bioloogilised söötmed: ninaneelu lima, neelu lima, bronhipuu (röga) sekretsioon, väljaheited (fekaalid), ureetra lima, emakakaela kanal, eesnäärme sekretsioon, uriin, veri, tserebrospinaalvedelik, rinnapiim, sapp, sisutsüstid, põletikukolded, haavaeritis.
Milliseid mikroorganisme saab bakterikultuuriga tuvastada?
Nina ja kurgu limas võib tuvastada hemolüütilisi streptokokke (Streptococcuc pyogenes, Streptococcuc agalactiae), pneumokokke (Streptococcuc pneumoniae), Staphylococcus aureust (Staphylococcus auereus), Corynebacterium diphtheriae in (Mene) itidis ), listeria (Listeria).
Väljaheites püütakse tuvastada soolestiku bakterite rühma - salmonella ja shigella (Salmonella spp., Shigella spp.), yersinia (Iersiniae spp.), tüüfus-paratüüfusbakterite rühm (Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B ), sooleinfektsioonide oportunistlikud patogeenid, anaeroobsed mikroobid, toidu kaudu levivate toksiliste infektsioonide patogeenid ja ka väljaheite uurimine soole düsbioosi suhtes.
Pseudomonas või Pseudomonas aeruginosa võib tuvastada haavade sisust, biopunktsioonist ja mädane eritis.
Urogenitaaltrakti lima uuritakse sugulisel teel levivate nakkuste patogeenide - gonokokk, trichomonas, seened (Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis, Candida perekonna seened), ureaplasma (Ureaplasma urealyticum), mükoplasma hominisy listeria (Mycoplasma) (Listeria), Võite uurida ka määrdumist bakteriaalse floora suhtes.
Vere steriilsust saab kultiveerida (uurida).
Üldise saastumise (bakteriaalse floora) suhtes uuritakse materjale nagu rinnapiim, uriin, eesnäärme sekretsioon, kraapimine, määrdumine, haava sisu, liigesevedelik, sapp.
Mis on bakterioloogiline kultuur?
Bakterioloogilises laboris uurimiseks mõeldud materjal asetatakse (inokuleeritakse) spetsiaalsetele toitekeskkondadele. Sõltuvalt konkreetse patogeeni või patogeenide rühma soovitud otsingust viiakse külvamine läbi erinevatel söötmetel. Näiteks võib see olla selektiivne või valikuline toitekeskkond (ühe patogeeni kasvuks, samal ajal kui teiste mikroobide kasv on pärsitud), mille näiteks võib olla koaguleeritud hobuseseerum difteeria patogeenide tuvastamiseks või sööde seleniidiga või sapisooladega soolepatogeenide tuvastamiseks.
Teine näide oleks diferentsiaaldiagnostika sööde (Hissi sööde), mida kasutatakse bakterikultuuride dešifreerimiseks. Vajadusel viige kolooniate paremaks tuvastamiseks vedelast toitainekeskkonnast üle tahkesse söötmesse.
Seejärel asetatakse toitainekeskkond termostaati (spetsiaalne seade), milles luuakse soodsad tingimused (temperatuur, niiskus jne) patogeenide kasvuks ja paljunemiseks, söödet hoitakse termostaadis teatud aja.
Järgmisena viiakse läbi kasvanud mikroorganismide kolooniate kontrolluuring, mida nimetatakse "mikroorganismide kultuuriks". Vajadusel tehakse kolooniamaterjali mikroskoopia koos eelneva värvimisega spetsiaalsete värvainetega.
Mida hinnatakse järelkontrolli käigus? Need on kolooniate kuju, värvus, tihedus ja pärast täiendavaid uuringuid - võime lagundada mõningaid anorgaanilisi ja orgaanilisi ühendeid.
Järgmisena loendatakse patogeenid. Mikrobioloogilised uuringud võtavad arvesse sellist kontseptsiooni nagu kolooniaid moodustav üksus (CFU) - üks mikroobirakk, mis on võimeline moodustama kolooniat või nähtavat mikroobide kolooniat. CFU abil on võimalik määrata uuritavas proovis olevate mikroorganismide kontsentratsiooni või arvu. CFU loendamine toimub erinevate meetoditega: kolooniate loendamine mikroskoobi all, seerialahjendusmeetod ja sektormeetod.
Bakterioloogiliseks nakatamiseks vajaliku bioloogilise materjali kogumise reeglid
Tehtud bakterioloogilise külvi kvaliteet sõltub suuresti uurimismaterjali õigest kogumisest. Peate meeles pidama lihtsat reeglit: steriilsed klaasnõud ja steriilsed instrumendid! Nende nõuete täitmata jätmine toob kaasa saastumise (materjali väline saastumine naha ja limaskestade esindajatega, keskkond, millel puudub kliiniline tähtsus), mis muudab uuringu automaatselt mõttetuks. Materjali kogumiseks kasutatakse väljaheite ja uriini kogumiseks steriilseid anumaid, mis antakse patsiendile ambulatoorsel läbivaatusel bakterioloogilises laboris. Erinevatest põletikukolletest võtab proove ainult steriilsete instrumentidega (spaatlid, silmused, lusikad) spetsiaalse väljaõppe saanud meditsiinitöötaja (kliinikus on selleks tavaliselt nakkushaiguste või uuringukabineti õde).
Veri ja uriin kogutakse kuivadesse katseklaasidesse ning muud materjalid transporditoitekeskkonnaga konteinerisse.
Teine reegel: proovide võtmine enne antibiootikumravi alustamist! Kui te võtate antibiootikume, on tulemus oluliselt moonutatud. Kui olete selliseid ravimeid võtnud, lõpetage nende võtmine 10 päeva enne uuringut ja teavitage oma arsti kõigist antibakteriaalsete ravimite võtmise faktist.
Tuleb tagada kiire tarnimine laborisse! Mikroorganismid võivad kuivamisel või happesuse muutumisel surra. Näiteks, väljaheide tuleb toimetada soojana.
Uriini kogumisel: pärast hommikusi hügieeniprotseduure võetakse steriilsesse anumasse keskmine portsjon hommikust uriini koguses 10-15 ml. Laborisse toimetada 2 tunni jooksul.
Tampooni võtmisel kurgust ja ninast: Sa ei saa hommikul hambaid pesta, suud ja nina loputada desinfitseerivate lahustega, juua ega süüa.
Väljaheidete kollektsioon tuleks teha hommikul steriilse spaatliga steriilses mahutis mahus 15-30 g. Uriiniproovi sisenemine ei ole lubatud. Tarne 5 tunni jooksul. Külmutamine või üleöö säilitamine ei ole lubatud. Koguge väljaheide ilma klistiiri või lahtiste kasutamata.
Veri kultuuriks võetakse enne antibiootikumravi algust temperatuuri tõusu taustal steriilsesse tuubi koguses vähemalt 5 ml (lastele), vähemalt 15 ml (täiskasvanutele).
Röga kogutakse hommikul tühja kõhuga steriilsesse anumasse köhahoo ajal koos limaga. Enne kogumist peske hambaid ja loputage suud keedetud veega. Laborisse toimetada 1 tunni jooksul.
Rinnapiim kogutakse pärast hügieeniprotseduuri. Peripapillaarset piirkonda töödeldakse 70% etüülalkoholiga niisutatud tampooniga. Esimesed 15 ml pressitud piima ei kasutata. Seejärel valatakse 5 ml steriilsesse anumasse. Tarne 2 tunni jooksul.
Suguelundite eritis: naistel toimub kogumine mitte varem kui 14 päeva pärast menstruatsiooni, mitte varem kui 1 kuu pärast antibiootikumide kasutamise lõpetamist, on soovitatav mitte urineerida 2 tundi; meestel ei soovitata enne proovi võtmist urineerida 5-6 tundi.
Valmisoleku aeg bakterioloogiliseks inokuleerimiseks
Ninaneelu lima uurimisel on tulemus valmis 5-7 päevaga, väljaheite uurimine võtab aega umbes 4-7 päeva. Urogenitaaltrakti kraapimise uurimisel võtab uuringu kestus 7 päeva. Külv üldise taimestiku jaoks kestab 4-7 päeva. Kõige pikem aeg, mis kulub vere ettevalmistamiseks steriilsuseks, on 10 päeva. Varaseima esialgse tulemuse saab aga anda 3 päeva pärast.
Bakterioloogilise uuringu tulemus
Bakterikultuuri tulemus on nii kvalitatiivne hinnang (patogeeni esinemise fakt uuritavas proovis) kui ka kvantitatiivne hinnang (patogeeni kontsentratsioon materjalis).
Kvantitatiivse tulemuse dekodeerimine toimub kõige lihtsamal viisil. Uuritavas materjalis on 4 mikroorganismide kasvu (saastumisastet). 1. kasvuastet iseloomustab nõrk kasv ainult vedelal söötmel ja kasvu puudumine tahkel söötmel; 2. astme puhul – kasv tihedal söötmel kuni 10 sama liigi kolooniat; 3. klassi puhul – 10 kuni 100 kolooniat; 4. klassi puhul – üle 100 koloonia.
See on oluline oportunistliku taimestiku jaoks, kui avastamisel ei peeta 1. ja 2. astmeid haiguse põhjuseks, see viitab lihtsalt uuritava materjali saastumisele, 3.-4. klassid näitavad haiguse etioloogiat (põhjust). Kui isoleeritakse patogeenne taimestik, võetakse arvesse eranditult kõik isoleeritud kolooniad, st kõik 4 kraadi.
Kolooniate loendamise tulemust CFU/ml tõlgendatakse järgmiselt: 103/ml tähendab 1 koloonia tuvastamist; 104/ml – 1 kuni 5 kolooniat; 105/ml – kasv 5-15 kolooniat; 106/ml – üle 15.
Kvantitatiivne tulemus on oluline mitte ainult saasteastme määramisel, vaid ka ravi õigsuse jälgimisel.
Eraldatud mikroorganismi tundlikkuse määramine konkreetse antibakteriaalse ravimi suhtes on bakterioloogiliste uuringute oluline komponent. Ravimite komplekt, mille suhtes patogeen on tundlik või resistentne, on antibiogramm .
Patogeeni tundlikkus on selle tundlikkus ravimi suhtes, see tähendab, et antibiootikum mõjutab mikroobi kasvu ja paljunemist. Resistentsus on patogeeni resistentsus konkreetse ravimi suhtes, see tähendab, et antibakteriaalne ravim ei tööta.
Antibiootikumogramm väljastatakse teatud mõõtühikutes - minimaalne inhibeeriv kontsentratsioon (MIC).
Nakkushaiguste arst N.I. Bykova
Usaldusväärse tulemuse saamiseks tuleks analüüs läbi viia vähemalt 2 nädalat pärast antibiootikumide ja (või) antibakteriaalsete ravimite viimast annust.
- Alates kraapimine kusiti Testi on soovitatav teha 2 tundi pärast viimast urineerimist, alates neelu ja ninaneelu - tühja kõhuga (4-5 tundi pärast viimast söögikorda, sel juhul on vaja välistada hammaste pesemine ja suu loputamine), teiste lookuste puhul pole erilist ettevalmistust vaja.
- Uriin. Uuritav on keskmine portsjon vabalt eralduvat uriini koguses 3-5 ml steriilses plastikust ühekordses mahutis (konteineri saab kätte vastuvõtust) pärast välissuguelundite põhjalikku tualetti ilma antiseptikume kasutamata. . Toatemperatuuril laborisse tarneaeg on 1-2 tundi, temperatuuril 2-8°C – 5-6 tundi.
- Sperma bakterioloogilisteks uuringuteks kogutakse masturbeerimise teel laia kaelaga steriilsesse plastikust ühekordsesse anumasse (anuma saab vastuvõtust). Materjali tarneaeg laborisse toatemperatuuril on 1-2 tundi.
- Röga Soovitatav on koguda hommikul tühja kõhuga pärast suuõõne desinfitseerimist steriilsesse plastmahutisse. Materjali tarneaeg laborisse toatemperatuuril on 1-2 tundi, temperatuuril 2-8°C - 5-6 tundi.
- Tara eesnäärme sekretsioon teostab uroloog pärast eesnäärme esialgset massaaži (seda manipuleerimist tehakse ainult keskbüroos). Enne eesnäärme sekreedi kogumist on soovitatav vähemalt 2-päevane seksuaalne karskus.
- Bakterioloogiline uuring rinnapiim . Rinnapiima kogutakse ainult enne lapse toitmist või kaks tundi pärast imetamist. Uuritav patsient peseb vasakut ja paremat rinda sooja vee ja seebiga ning pühib need puhta rätikuga kuivaks. Töötle nibude ja sõrmeotste pind 70% etüülalkoholiga mõõdukalt niisutatud vatiga. Esimene portsjon rinnapiima, ligikaudu 0,5 ml, visatakse ära. Seejärel väljutab naine nibu kätega puudutamata 0,5-1 ml piima igast näärmest eraldi steriilsesse anumasse (anumad saab vastuvõtust). Toatemperatuuril laborisse tarneaeg on 1-2 tundi, temperatuuril 2-8°C – 5-6 tundi.
- Tara koos inoviaalne vedelik bakterioloogiliseks uuringuks viib selle läbi arst steriilses plastmahutis (konteinerit saab vastuvõtust). Seda protseduuri ei tehta laboritingimustes. Materjali tarneaeg laborisse toatemperatuuril on 1-2 tundi, temperatuuril 2-8°C - 5-6 tundi.
- Tara haava eritis bakterioloogiliseks uuringuks viib läbi arst, ühekordselt kasutatavas konteineris Amesi söötmega (konteinerit saab vastuvõtust). Materjali tarneaeg laborisse toatemperatuuril on 6 tunni jooksul, temperatuuril 2-8°C - kuni 2 päeva.
- Sapp bakterioloogilisteks uuringuteks kogutakse see sondeerimisel eraldi, A, B ja C osadena kolme steriilsesse katsutisse või operatsiooni käigus süstla abil ühte katsutisse, järgides aseptika reegleid (seda protseduuri laboris ei teostata). Materjali tarneaeg laborisse toatemperatuuril on 1-2 tundi, temperatuuril 2-8°C - 5-6 tundi.
Bakterioloogilised uuringud on üks populaarsemaid viise erinevate bioloogiliste vedelike testimiseks. Kui mõeldakse verekultuuri, siis räägime testist, mis aitab tuvastada inimese organismis esinevaid bakteriaalseid infektsioone. Kultiveerimispaak on vajalik, kui rutiinsed vereanalüüsid ei suuda kindlaks teha baktereemia olemasolu. Külvipaak hõlmab materjali võtmist ja selle edasist asetamist toitainekeskkonda, mis sisaldab komponente, mis võimaldavad bakteritel väga kiiresti paljuneda.
Bakterioloogiline vereanalüüs hõlmab kultuuride eelnevat kasvatamist toitainekeskkonnas. Seetõttu nimetavad arstid selliseid teste kultuuriuuringuteks. Kui mõne päeva pärast hakkavad bakterid aktiivselt kasvama, saadetakse saadud proov mikroskoopiliseks uuringuks. Kui kultuurid on piisavalt kasvanud, pole bakteriuuriat enam raske määrata. Kuid see pole veel kõik analüüs. Sel juhul antakse ainult esialgne hinnang. Bakterite täpsemaks tuvastamiseks tehakse järgmine samm. See on paak, mis inokuleerib vedelkultuuri proove Petri tassi tihedasse söötmesse. See test aitab tuvastada kasvavaid bakterikolooniaid. Nende proovidega saab nüüd läbi viia keemilisi katseid, mis võimaldavad täpsemalt määrata lõpliku mikroorganismitüübi.
Kõik need etapid on ettevalmistavad bakteriliikide tundlikkuse testimiseks erinevat tüüpi antibiootikumide suhtes. See on vajalik nakkuse vastu võitlemiseks sobivaima ravimi leidmiseks.
Bakterioloogilise vereanalüüsi tegemisel saate tuvastada:
- stafülokokid;
- streptokokid;
- enterobakterid;
- pärmseened.
Vähenenud immuunsusega patsientidele on bakteriaalsete infektsioonide vereanalüüsid kohustuslikud. Näiteks tuberkuloosibaktereid leidub sageli HIV-nakkusega inimestel. Selline uuring aitab kõrvaldada ebaõiged tulemused.
Nakkushaiguste korral on bakteritel ja mikroorganismidel võimalus tungida vereringesse ja siseneda teistesse kehasüsteemidesse, mis asuvad allika enda lähedal. Kui verekultuuri test näitab positiivset tulemust, tähendab see, et infektsioon on juba edasi arenenud. Sellega võib kaasneda temperatuuri tõus, valgete vereliblede arvu suurenemine ja südametegevuse katkestused.
Analüüsi omadused
Bakterioloogilisel uurimismeetodil, nagu igal teisel testil, on oma plussid ja miinused. Eeliste hulgas on meetodi kõrge spetsiifilisus. See väldib ristvale reaktsioone. Uurimiseks sobib igasugune bioloogiline vedelik. Võib teha äigekülv, uriinianalüüs, vereanalüüs jne. Terapeutiline eesmärk on määrata kindlaks tuvastatud mikroobi tundlikkus konkreetse raviaine suhtes. See võimaldab teil kiiresti hävitada mikroorganismid, raisamata aega tarbetule ravile.
Muidugi on mõned varjuküljed. Nende hulgas võib märkida, et bakterite külvamine võtab aega. Tavaliselt hoitakse uuritavat materjali laboris vähemalt nädal. Materjali kogumisel on tõsised nõuded, bakterioloogiliste uuringute jaoks materjali kogumisel on oluline järgida kõiki reegleid. Lisaks peab laboritöötajatel olema erikvalifikatsioon.
Tavaliselt saadakse bakterioloogilise uuringu tulemused inimese mis tahes bioloogiliste vedelike proovidest: ninaneelu limast tserebrospinaalvedelikku. Verekultuur, nagu mis tahes muu vedelik, ei vaja analüüsiks spetsiaalset ettevalmistust. Kahe-kolme päeva jooksul on soovitatav loobuda rasvastest ja praetud toitudest ning mitte tarvitada alkoholi. Kui annate verd, peate oma viimase söögikorra võtma vähemalt 12 tundi enne seda. Seda tarnefunktsiooni nimetatakse rangelt tühja kõhuga. Suitsetamine on keelatud mitu tundi enne analüüsi.
Steriilsuse seisukohalt võetakse kultuuri jaoks verd mitu korda teatud aja jooksul. See on tingitud asjaolust, et ühest proovist ei ole alati võimalik saavutada toitekeskkonna saastumist, mistõttu ei peeta ühekordset proovivõttu efektiivseks. Võib väita, et teatud mikroorganism oli konkreetse infektsiooni esilekutsuja, alles pärast seda, kui seeriauuring on läbi viidud vähemalt kaks korda. Korduva testimise tulemusena tuleks tuvastada kahtlustatavad bakterid. Võimalik on samaaegselt testida mitte ainult verd, vaid ka teisi bioloogilisi vedelikke.
Verd tuleb koguda võimalikult kõrgel temperatuuril. Esialgne antibiootikumravi võib aga tulemusi hägustada. Viimase abinõuna peaks viimasest antibiootikumiannusest mööduma vähemalt 24 tundi. Vereproovid võetakse hommikul.
Pärast kogumist külvatakse see toitainekeskkonda, mis on soodne bakterite kasvuks. Selliseid proove hoitakse mitu päeva temperatuuril 37-38 kraadi.
Praegu tehakse kahte tüüpi külvi. Me räägime kultuurist, et määrata tundlikkust peamise antibiootikumi spektri suhtes, ja kultuurist, et tuvastada tundlikkust paljude ravimite suhtes. Tavaliselt kulub esimeste tulemuste saamiseks vähemalt kolm päeva. Mõnikord kestab uuring kuni kaks nädalat.
Viirusnakkus
Kui viirus siseneb kehasse, saab selle olemasolu või puudumist diagnoosida üldise vereanalüüsi abil. Tavaliselt saab isegi patsient ise ilma probleemideta kindlaks teha infektsiooni olemasolu, olles saanud testi tulemused kätte. Kuid see ei tähenda, et peaksite välistama spetsialistiga konsulteerimise.
Et teha kindlaks, kas nakkuse põhjustas viirus või bakter, tuleb saadud andmed hoolikalt läbi lugeda. Fakt on see, et vere struktuurne koostis muutub erinevalt, olenevalt sellest, kas nakkuse põhjuseks on viirus või bakter.
Kui kehva tervise põhjuseks on viirus, siis leukotsüüdid on normaalsed või isegi veidi madalamad, harvematel juhtudel esineb kerge tõus. Lümfotsüüdid on esindatud normaalsest kõrgemal, nagu ka monotsüüdid. Viirusel on neutrofiilidele pärssiv toime, mistõttu nende arv väheneb. ESR jääb tavaliselt normaalseks või suureneb väga vähe.
Isegi kui kõik kirjeldatud kattub teie analüüsiga, on oluline võtta arvesse tekkinud sümptomeid. Viirusnakkustel on lühem peiteaeg. Tavaliselt ei ületa see viit päeva. Samal ajal tuleks välistada sõltumatu diagnoosi tegemine, kuna mõnikord ilmnevad bakterid viiruse arengu taustal ja ainult spetsialistil on selle etioloogia kindlaksmääramisel probleem.
Erinevad näidised
Bakterioloogiliseks uuringuks uriini kogumisel eeldatakse hommikuse uriini kogumist, selle keskmist osa. Kõigepealt tehakse välissuguelundite tualettruum. Kogumine toimub steriilses mahutis 10-15 ml. Analüüs tuleb laborisse toimetada hiljemalt kahe tunni jooksul.
Kui tuleb uurida tampooni kurgust ja ninast, siis hommikuti on keelatud hambaid pesta ega desinfitseerivate lahustega suud ja nina loputada. Toidu ja vee tarbimine on keelatud. Kui on vaja teha väljaheite bakterikultuuri, kogutakse väljaheide hommikusest väljaheitest steriilse spaatliga steriilsesse anumasse, analüüsi maht peaks olema 15-30 grammi. On oluline, et uriin ei satuks proovi sisse.
Test tuleb esitada viie tunni jooksul. Testi on keelatud hoida üleöö või külmutada. Samuti tuleks välistada väljaheidete kogumine klistiiri ja lahtistiga.
Kui teil on vaja röga uurida, kogutakse köhahoo ajal koos limaga hommikul tühja kõhuga steriilses anumas. Enne kogumist on lubatud hambaid pesta, kuid loputamiseks tuleks kasutada ainult keedetud vett. Analüüs toimetatakse laborisse tunni jooksul.
Rinnapiim kogutakse pärast eelnevaid hügieeniprotseduure. Nibude lähedal asuvat piirkonda tuleb töödelda tampooniga, mis on niisutatud 70-protsendilise etüülalkoholiga. Esimesed 15 ml ei saa annetamiseks kasutada. Keskmisest portsjonist dekanteeritakse 5 ml. Analüüsi kohaletoimetamine peab toimuma kahe tunni jooksul.
Kui tehakse suguelundite eritumise analüüs, siis naistel on menstruatsiooni ajal testimise keeld, pärast seda peab mööduma vähemalt nädal. Kui antibiootikumikuuri on varem manustatud, peaks pärast selle lõppu mööduma kuu. Kõigepealt tehakse välissuguelundite tualettruum. Soovitav on kaks tundi mitte urineerida. Meestel soovitatakse tualetis mittekäimise aega pikendada viie tunnini.