يتم تمثيل آليات مضادات التخثر بمجموعتين من مضادات التخثر:الفسيولوجية ، والتي يتم تشكيلها بشكل مستقل عن تخثر الدم وانحلال الفبرين ، ومضادات التخثر ، والتي تتشكل في عملية تخثر الدم وانحلال الفيبرين. الأول يشمل مضادات الثرومبوكينازات (مضادات الثرومبوبلاستين) ، مضادات الثرومبين ، الهيبارين ، إلخ. كل منهم له تأثير مثبط على مراحل مختلفة من عملية تخثر الدم. تثبط مضادات الثرومبوكينازات المرحلة الأولية لتخثر الدم وتثبط نشاط إنزيم الثرومبوكيناز المتكون. تعمل مضادات الثرومبين على إبطاء انتقال البروثرومبين إلى الثرومبين وتمنع تأثير الثرومبين على الفيبرينوجين. يعطل الهيبارين تكوين الخثرات ، ويعطل الثرومبين ، ويربط الفيبرينوجين ، أي يثبط جميع مراحل عملية التخثر. تشمل المجموعة الثانية من مضادات التخثر مواد تتشكل نتيجة لتجلط الدم وانحلال الفبرين ولها تأثير مانع للتخثر. توجد آليات تثبيط في كل مرحلة من مراحل تخثر الدم. تلعب البطانة الوعائية الطبيعية دورًا معروفًا في منع دخول الصفائح الدموية وعوامل التخثر التلامسية في عملية التخثر.
لتحضير الدم المنزوع الفايبر ، غالبًا ما يتم استخدام ملح ثلاثي القلويات ، حمض إيثيلين ديامينيتراسيتيك (EDTA) ، وسيترات ثلاثي الصوديوم والهيبارين. المادتان الأوليان تمنعان التخثر عن طريق إزالة الكالسيوم من الدم.
من بين مضادات التخثر المعروفة في المرحلة الأولى من التخثر ، فإن مثبط العامل XI المنشط (XIa) ، الذي ينتمي إلى α-2-globulins ، ومضادات الثرومبوبلاستين (مثبطات مركب العامل III-factor VIIa) لهما أكبر أهمية فسيولوجية. تشمل مثبطات المرحلة الثانية من التخثر مضاد الثرومبين II - α-2-γlobulin في الدم ؛ لا يثبط الثرومبين فحسب ، بل يمنع أيضًا عوامل التخثر المنشط الأخرى - Xa و IXa و XIa و XIIa و kallikrein. يمثل مضاد الثرومبين III معظم النشاط العفوي المضاد للتخثر ، والذي يحدد دوره الرائد في الحفاظ على الحالة السائلة للدم ومنع تجلط الدم. حصة مضادات الثرومبين الطبيعية الأخرى - α-2-macroglobulin و α-1-antitrypsin هي فقط حوالي 25 ٪ من النشاط المضاد للتخثر لبلازما الدم المنزوعة الفايبر.
يتم إجراء انحلال الفبرين بواسطة نظام الإنزيم المحلل للبروتين في الدم- البلازموهيبلازمين. يحدث تحول البلازمينوجين إلى شكل نشط بمساعدة المنشطات الموجودة في بلازما الدم والبول والأنسجة المختلفة ، والتي تتشكل في بطانة الأوعية الدموية. يتم إنتاج المنشط الموجود في البول (urokinase) عن طريق الكلى. بعض المنتجات من أصل بكتيري ، وخاصة الستربتوكيناز ، لديها أيضًا القدرة على تنشيط البلازمينوجين.
تحت تأثير المنشطات ، يحدث الانقسام الأنزيمي لجزيء البلازمينوجين ويتشكل البلازمين ، الذي له خاصية تحلل بروتينية واضحة فيما يتعلق بالفيبرين - الفيبرينوجين (بالإضافة إلى العوامل السابع والخامس والمكمل وبعض الهرمونات). يحدث تحلل الفيبرينوجين على عدة مراحل. أولاً ، بعد فصل الأجزاء الصغيرة A ، B ، C ، يتم تكوين جزء X عالي الجزيئية. ثم يتم تقسيمها إلى كسرين D و Y. بعد ذلك ، يتم تقسيم الكسر Y إلى كسر D ثاني وكسر E إضافي.
الكسور D و Eهي المنتجات النهائية لتدهور الفبرينوجين. إن تحلل الفيبرين القابل للذوبان بواسطة البلازمين مشابه لتحلل الفيبرينوجين ، باستثناء أن الأجزاء الصغيرة غائبة في المرحلة الأولى. يتميز تحلل الفيبرين المستقر بتكوين شظية D-dimer مزدوجة الحجم بدلاً من D-fraction.
يتم دعم انحلال الفبرين الإنزيمي بمركبات معقدة من الهيبارين مع الفيبرينوجين والأدرينالين واليوريا والبلازموجين ، والتي لديها القدرة على تحليل جلطات الفيبرين غير المستقرة (انحلال الفبرين غير الإنزيمي). يمكن تحلل الفيبرين عن طريق البروتياز الذي تفرزه الكريات البيض ، والتي تشارك أيضًا في تحلل الفبرين بسبب إطلاق منشطات البلازمينوجين في كريات الدم البيضاء وبلعمة منتجات انقسام الفيبرين.
يتم إجراء التحفيز العلاجي لانحلال الفبرين باستخدام إنزيمات من أصل بكتيري (ستربتوكيناز ، إلخ) أو يوروكيناز.
يعطي مفهوم نشاط انحلال الفبرين في الدم تعريفه بطريقة euglobulin.طريقة كوفالسكي (الترسيب في وسط حمضي وعند درجة حرارة منخفضة لجزء euglobulin الذي يحتوي على عوامل تخثر الدم وعوامل انحلال الفبرين ، وخاصة البلازمينوجين). يتم وضع 0.1 مل من بلازما الأكسالات (1: 9) في أنبوب الطرد المركزي ، ويضاف 1.8 مل من الماء الحمضي (الرقم الهيدروجيني 5.2) ، ويتم وضع الأنبوب في الثلاجة عند 4 درجات مئوية (يسقط جزء euglobulin من البلازما) . بعد 30 دقيقة ، يتم إزالة الأنبوب وطرده لمدة 10 دقائق عند 2000 دورة في الدقيقة. يُمتص السائل الطاف ، ويضاف 0.1 مل من بورات الصوديوم إلى الراسب ويوضع في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية لعدة دقائق حتى يذوب الراسب تمامًا. يضاف 0.1 مل من محلول كلوريد الكالسيوم (يتحول الفيبرينوجين الموجود في جزء الأوجلوبين إلى الفيبرين). يتم تسجيل وقت تكوين الجلطة ويتم وضع أنبوب الاختبار في منظم حرارة حتى تتحلل الجلطة تمامًا. الوقت من لحظة تكوين الجلطة إلى ذوبانها يعبر عن نشاط تحلل الفبرين في الدم ، والذي عادة ما يكون 3-4 ساعات.
يتم استخدام طرق دراسة انحلال الفبرين ، بناءً على التنشيط المعياري الإضافي له بواسطة الستربتوكيناز ، وكذلك طرق الكشف عن منتجات انحلال الفبرين في بلازما الدم - PDF (المناعي والكيميائي) ومركباتها مع مونومرات الفبرين والفيبرينوجين (اختبارات تجلط الدم) ، طرق دراسة انحلال الفبرين غير الأنزيمي وفقًا لـ B. BUT. كودرياشوف.
في دراسة انحلال الفبرين ، يجب أن نتذكر أن البلازمين ومحفزاته مثبتة في جلطات الدم والجلطات ، بينما ينخفض تركيزها في الدورة الدموية عند تنشيط عملية انحلال الفيبرين.
المجموعتان الأولى والثالثة من الطرق المذكورة أعلاه لها أهمية إكلينيكية كبرى في تقييم حالة نظام تحلل الفبرين.
1. وقت تحلل جلطات اليوجلوبولين -أهم طريقة أساسيةدراسات نظام انحلال الفبرين ، والذي يسمح بتقييم حالة الآليات الداخلية والخارجية لتكوين البلازمينوجين.
المبدأ: تحديد وقت التحلل التلقائي للجلطة المتكونة من جزء euglobulin من البلازما الخالية من الصفائح الدموية عند إضافة محلول كلوريد الكالسيوم إليه.
عادة ، يحدث تحلل الجلطات في غضون 3-5 ساعات.
يشير تقصير هذا الوقت إلى زيادة نشاط انحلال الفبرين في البلازما.
حالة آلية داخليةتنشيط البلازمينوجين - يتم إجراء الدراسة في ظل ظروف التمثيل الغذائي القاعدي (في الصباح على معدة فارغة ، قبل أن ينهض المريض من السرير).
لتميز آلية خارجيةتحديد وقت تحلل الجلطات بعد الضغط الأولي للأوعية بكفة ، والذي يخلق ضغطًا قدره 80 ملم زئبق لمدة 10-15 دقيقة. الفن ، وكذلك بعد النشاط البدني (اختبار على مقياس سرعة دراجة أو حلقة مفرغة). في هذه الحالات ، مع الأداء الطبيعي للآلية الخارجية ، يتم إطلاق منشط الأوعية الدموية من نوع الأنسجة في الدم ، ويتم تسريع تحلل الجلطات بمقدار 1.5-2 مرة.
علامات قصور جهاز تحليل الفبرين:
1) إبطاء (أكثر من 5 ساعات) تحلل جزء euglobulin من البلازما في ظل ظروف التمثيل الغذائي القاعدي ؛
2) عدم استجابة النظام لمحفزات الآلية الخارجية لتنشيط البلازمينوجين (اختبار الكفة والتمرين ، إلخ).
هناك تعديلات أخرى على طريقة تحلل الجلطة الأوجلوبولين. على سبيل المثال ، يمكن تسريع انحلال الجلطة بشكل كبير عن طريق الإدارة الأولية للكاولين ، وهو منشط اتصال قوي للآلية الداخلية لتحلل الفيبرين ، المرتبط بتنشيط مجموعة من العوامل: العامل XII-kallikrein-kininogen ("Hageman- انحلال الفبرين المعتمد على كاليكرين ") في البلازما. عادة ، مع إدخال الكاولين ، يتم تسريع تحلل الأوجلوبولين في الجلطة إلى 4-10 دقائق.
2 اختبار التصاق المكورات العنقودية -الكشف في مصل الدم عن كميات صغيرة من PDF و RFMK. يعتمد اختبار التصاق المكورات العنقودية على قدرة المكورات العنقودية ، التي لها عامل تحامل محدد ، على التراص عند ملامستها لمصل يحتوي على PDF و RFMK. يتم تطبيق قطرة من المعلق القياسي للمكورات العنقودية ومصل الاختبار المخفف 2 و 4 و 8 و 16 و 32 مرة على الزجاج. اعتمادًا على التخفيف الذي يحدث فيه تفاعل التراص ، يتم تحديد تركيز PDF و RFMK.
مع تجلط الدم ، الجلطات الدموية و DIC ، يزداد هذا الرقم بشكل ملحوظ.
خامسا أمراض الدم
أمراض نظام الإرقاء الناتجة عن أضرار خلقية أو وراثية أو مكتسبة لواحد أو أكثر من المكونات الهيكلية والوظيفية لنظام الإرقاء: الصفائح الدموية وجدار الأوعية الدموية ونظام تخثر الدم ، ونتيجة لذلك تنتهك الوظائف الرئيسية لهذا النظام - الحفاظ الدم في حالة سائلة ومنع فقدان الدم
تصنيف
سريريا:
النزيف والنزيف (أهبة نزفية ، اعتلال مرقئ نزفي)
ثانيًا. تجلط الدم والانصمام الخثاري (أهبة التخثر ، مرض الانسداد التجلطي ، اعتلال الإرقاء الخثاري)
ثالثا. مدينة دبي للإنترنت ، اعتلال الإرقاء الخثاري
1. النزيف الدموي الدموي (تشخيص الدم الهيموري -مرض وراثي أو مكتسب ناتج عن تلف واحد أو اثنين أو ثلاثة من مكونات نظام الإرقاء (الصفائح الدموية ، نظام تخثر الدم ، جدار الأوعية الدموية) ويتميز بالميل إلى نزيف تلقائي أو ما بعد الصدمة (ما بعد الجراحة)
التصنيف حسب عيب مرقئ مهيمن:
1) تجلط الدم(اضطراب تخثر الدم بسبب النقص المطلق في عوامل تخثر الدم الأساسية)
§ تشارك في تكوين البروثرومبيناز - الثامن ، التاسع ، الحادي عشر - الهيموفيليا
(وراثي متنحي ، مرتبط بالكروموسوم X (الهيموفيليا A - ضعف توليف العامل الثامن))
مرض الكريسماس (الهيموفيليا ب - اضطراب العامل التاسع)
مرض وراثي وراثي متنحي - الهيموفيليا C (ضعف تخليق العامل الحادي عشر)
الهيموفيليا A و B - عند الرجال والنساء - موصلات المرض
الهيموفيليا C - كلا الجنسين
من بين تجلط الدم الوراثي
الهيموفيليا أ - 68-79٪
الهيموفيليا B - 6-13٪
الهيموفيليا C - 1-2٪
طريقة تطور المرض:نقص العوامل ← يبطئ تكوين الجلطة (الجلطة) ← النزيف
الصورة السريرية
o نزيف ونزيف منذ الصغر
يا مركز حقوق الانسان. التهاب المفاصل والتقلصات وضمور العضلات والأورام الكاذبة في تجويف البطن والمفاصل وعضلات الفخذ.
متلازمات المناعة الذاتية: تظهر الأجسام المضادة للعوامل الثامن والتاسع (الشكل المثبط للهيموفيليا) ، متلازمة الروماتويد الثانوية ، الداء النشواني الكلوي ، فقر الدم المناعي الذاتي
تشخبص:
س تاريخ نزيف ورم دموي (رجال)
س التكوين الوراثي للمرض
o صورة بالأشعة السينية لمرض تدمي المفصل.
ا مخطط الدم:دون تفاقم المرض لا تنحرف عن القاعدة. التغييرات في تكوين البروثرومبيناز:
o يتباطأ وقت تخثر الدم الوريدي وفقًا لـ Lee-White - أكثر من 12 دقيقة (N 5-12 دقيقة) ؛
o تم انتهاك اختبار التخثير التلقائي (ACT) - في الدقيقة العاشرة (N 10-12 ثانية)
o زمن الكاولين-كيفالين - أكثر من 50 ثانية (N 35-45 ثانية)
o اختبار توليد الثرومبوبلاستين (TGT) - في 2-6 دقائق (N 8-10s)
o زمن البروثرومبين والثرومبين ، تراجع الجلطة ، مستوى الفيبرينوجين ، عدد الصفائح الدموية ، مدة نزيف اللبلاب ، مقاومة جدار الأوعية الدموية أمر طبيعي. لتشخيص الهيموفيليا الخفيفة إلى المعتدلة ، من الضروري استخدام ACT والتحديد الكمي للعوامل الثامن والتاسع والحادي عشر ومثبطات التخثر
§ في تكوين الجلطة - II ، V ، VII ، X - بارايموفيليا (عسر الدم)
(اعتلالات النزف النزفية الوراثية والمكتسبة بسبب نقص عوامل البروثرومبين المعقدة - II أو V أو VII أو X)
يشير مصطلح "انحلال الدم" إلى عدد الأشخاص الأكثر استخدامًا في أي مجال من مجالات النشاط الطبي. يعرف الكثير من الناس الغرض منه ، بينما يعتقد البعض الآخر أن شيئًا لا رجوع فيه قد حدث للدم ، نظرًا لأن هذه الكلمة منطوقة بشكل هادف ، بالنسبة للآخرين ، لا يعني هذا المفهوم أي شيء على الإطلاق إذا كان الشخص يتمتع بصحة جيدة ولا يهتم بالطب من حيث المبدأ.
يحدث انحلال الدم في الدم باستمرار ، ويكمل دورة حياة خلايا الدم الحمراء ، التي تعيش 4 أشهر ، ويتم تدميرها بطريقة مخططة و "تموت" - وهذا الحدث يمر دون أن يلاحظه أحد لجسم سليم. شيء آخر هو إذا توقفت كريات الدم الحمراء عن الوجود كناقل أكسجين كامل لأسباب أخرى ،والتي يمكن أن تكون سموم مختلفة تدمر أغشية كريات الدم الحمراء والعقاقير والالتهابات والأجسام المضادة.
أين يحدث انحلال الدم؟
يمكن أن تنهار في أماكن مختلفة. عند تمييز هذا الانحلال عن طريق التوطين ، يمكن تمييز الأنواع التالية من انحلال الدم:
- تتأثر خلايا الدم الحمراء أحيانًا ببيئتها - الدورة الدموية ( انحلال الدم داخل الأوعية الدموية)
- في حالات أخرى ، يحدث التدمير في خلايا الأعضاء المشاركة في تكون الدم أو خلايا الدم المتراكمة - نخاع العظام والطحال والكبد ( انحلال الدم داخل الخلايا).
صحيح أن انحلال الجلطة والتلوين الأحمر للبلازما يحدث أيضًا في المختبر (في المختبر). في أغلب الأحيان ، يحدث انحلال الدم في فحص الدم:
- بسبب انتهاك تقنية أخذ عينات المواد (الأنبوب الرطب ، على سبيل المثال) أو عدم الامتثال لقواعد تخزين عينات الدم. كقاعدة عامة ، في مثل هذه الحالات ، يحدث انحلال الدم في المصل ، في وقت تكوين الجلطة أو بعده ؛
- يتم استفزازه عمدًا لإجراء اختبارات معملية تتطلب انحلال الدم الأولي للدم ، أو بالأحرى تحلل خلايا الدم الحمراء من أجل الحصول على مجموعة منفصلة من الخلايا الأخرى.
بمناقشة أنواع انحلال الدم في الجسم وخارجه ، نعتقد أنه سيكون من المفيد تذكير القارئ بالفرق بين البلازما والمصل. تحتوي البلازما على بروتين مذاب فيه - الفيبرينوجين ، والذي يتبلمر لاحقًا إلى فيبرين ، والذي يشكل أساس الجلطة التي غرقت في قاع أنبوب الاختبار وتحول البلازما إلى مصل. مع انحلال الدم ، يكون لهذا أهمية أساسية ، لأنه في الحالة الفسيولوجية الطبيعية ، لا يتخثر الدم في قاع الأوعية الدموية. حالة خطيرة ناتجة عن التعرض لعوامل غير مواتية للغاية - انحلال الدم داخل الأوعية الدموية أو تشير إلى العمليات المرضية الحادة التي تتطلب الكثير من الجهد لإنقاذ حياة الشخص. ولكن حتى ذلك الحين سوف نتحدث عن البلازما ، وليس عن المصل ، لأن المصل في شكله الكامل لا يُلاحظ إلا خارج الكائن الحي ، بعد تكوين جلطة دموية عالية الجودة ، تتكون أساسًا من خيوط الفيبرين.
لا يمكن استخدام اختبارات الدم البيوكيميائية التي يتم أخذها بمضادات التخثر وفحصها في البلازما ، أو يتم أخذها بدون استخدام محاليل مضادة للتخثر في أنبوب جاف وفحصها في مصل الدم. يعد انحلال الدم في كريات الدم الحمراء في العينة موانع للدراسة ، لأن النتائج ستكون مشوهة.
انحلال الدم كعملية طبيعية
كما ذكرنا سابقًا ، يحدث انحلال الدم إلى حد ما باستمرار في الجسم ، لأن خلايا الدم الحمراء القديمة التي انتهت صلاحيتها تموت ، وتحل محلها خلايا الدم الحمراء الجديدة والشابة والقادرة. انحلال الدم الطبيعي أو الفسيولوجيتحدث بشكل دائم في الجسم السليم ، وهي موت طبيعي لخلايا الدم الحمراء القديمة وتحدث هذه العملية في الكبد والطحال ونخاع العظام الأحمر.
شيء آخر هو عندما لا تزال كريات الدم الحمراء تعيش وتعيش ، وبعض الظروف تؤدي بهم إلى الموت المبكر - هذا هو انحلال الدم المرضي.
العوامل غير المواتية للغاية ، التي تعمل على خلايا الدم الحمراء (وهي خلايا الدم الحمراء الطبيعية) ، تزيدها إلى شكل كروي ، مما يتسبب في تلف لا يمكن إصلاحه في الغشاء. ينكسر غشاء الخلية ، الذي لا يتمتع بقدرات خاصة على التمدد بطبيعته ، في النهاية ، وتدخل محتويات كريات الدم الحمراء () إلى البلازما بحرية.
نتيجة لإطلاق صبغة الدم الحمراء في البلازما ، تتحول إلى لون غير طبيعي. ورنيش الدم (مصل أحمر لامع) هو العلامة الرئيسية لانحلال الدم ، والذي يمكن رؤيته بأم عينيك.
كيف يعبر عن نفسه؟
لا يعطي أي مظاهر خاصة وانحلال دم مزمن والذي يصاحب بعض الأمراض ويوجد كأحد أعراض (الخلية المنجلية) وهي عملية بطيئة حيث تستهدف كافة الإجراءات العلاجية المرض الأساسي.
بالطبع ، بغض النظر عن مدى صعوبة المحاولة ، لن نرى أي علامات لانحلال الدم الطبيعي. مثل العمليات الفسيولوجية الأخرى ، تتم برمجتها بطبيعتها ولا يلاحظها أحد.
خلايا الدم الحمراء غير منتظمة الشكل والمنهارة في فقر الدم المنجلي
يتطلب انحلال الدم الحاد إجراءات عاجلة ومكثفة ، من أهم أسبابها:
مع تطور انحلال الدم الحاد ، لن تظهر شكاوى المريض إلا إذا كان واعياً ويمكنه الإبلاغ عن مشاعره:
- يضغط بحدة على الصدر.
- هناك حرارة في جميع أنحاء الجسم.
- ألم في الصدر والبطن وخاصة في منطقة أسفل الظهر ( آلام الظهر هي عرض نموذجي لانحلال الدم).
تشمل الميزات الموضوعية:
- انخفاض في ضغط الدم
- واضح انحلال الدم داخل الأوعية (دراسات مختبرية) ؛
- فرط الدم في الوجه ، والذي سرعان ما يحل محله الشحوب ، ثم الزرقة ؛
- قلق؛
- يشير التبول والتغوط اللاإراديان إلى درجة عالية من خطورة الحالة.
تمحى علامات انحلال الدم الحاد في المرضى الذين يخضعون للعلاج الإشعاعي والهرموني أو في حالة التخدير ولا تظهر بشكل واضح ، وبالتالي يمكن تفويتها.
بالإضافة إلى ذلك ، فإن مضاعفات نقل الدم لها الميزة التالية: بعد بضع ساعات ، تنحسر شدة العملية ، ويرتفع ضغط الدم ، ولا يكون الألم مزعجًا بشكل خاص (هناك ألم في أسفل الظهر) ، لذلك يبدو أنه يعاني من " تم الاجتياز بنجاح". للأسف، هذا ليس كذلك. بعد مرور بعض الوقت ، يعود كل شيء إلى طبيعته ، ولكن فقط بقوة متجددة:
- ترتفع درجة حرارة الجسم.
- يزيد اليرقان (الصلبة والجلد).
- تقلق من صداع شديد.
- العرض السائد هو اضطراب في القدرات الوظيفية للكلى: انخفاض حاد في كمية البول التي تفرز ، حيث يظهر الكثير من البروتين والهيموجلوبين الحر ، وتوقف إخراج البول. نتيجة عدم فعالية العلاج (أو غيابه) في هذه المرحلة هو تطور انقطاع البول ، التبول في الدم ووفاة المريض.
في حالة انحلال الدم الحاد أثناء العلاج ، يقوم المريض بإجراء فحوصات الدم والبول باستمرار ، والتي تحمل المعلومات اللازمة للطبيب حول التغييرات للأفضل أو للأسوأ. من جانب الدم يلاحظ:
- زيادة فقر الدم (يتم تدمير كريات الدم الحمراء ، يتم إطلاق الهيموجلوبين في البلازما) ؛
- كمنتج لانهيار خلايا الدم الحمراء (فرط بيليروبين الدم) ؛
- الانتهاكات في نظام التخثر والتي ستظهر.
أما بالنسبة للبول (إن وجد) ، فبإمكانك بالفعل رؤية علامات انحلال الدم حتى حسب اللون (اللون أحمر وأحيانًا أسود) ، مع دراسة كيميائية حيوية - الهيموجلوبين والبروتين والبوتاسيوم.
علاج
يتطلب علاج انحلال الدم الحاد (أزمة انحلال الدم ، صدمة) دائمًا إجراءً فوريًا ، والذي يعتمد ، مع ذلك ، على سبب تطوره وشدة حالة المريض.
يتم وصف حلول استبدال الدم للمريض ، والاستبدال (عند الأطفال حديثي الولادة مع HDN) ، وفصل البلازما ، والهرمونات ، ويتم إجراء غسيل الكلى. نظرًا لحقيقة أنه لا يمكن للمريض نفسه ولا أقاربه ، تحت أي ظرف من الظروف ، التعامل مع مثل هذه الحالة في المنزل ، فليس من المنطقي وصف جميع أنظمة العلاج. بالإضافة إلى ذلك ، يتم اعتماد أساليب علاجية معينة على الفور ، في سياق جميع الأنشطة ، بناءً على التحكم المعملي المستمر.
أسباب وأنواع انحلال الدم المرضي
تتنوع أنواع انحلال الدم ، اعتمادًا على أسباب تطورها ، كما تتنوع الأسباب نفسها:
عند دراسة خصائص خلايا الدم الحمراء في تشخيص بعض الأمراض ، يلزم أحيانًا إجراء اختبار دم مثل المقاومة التناضحية لكريات الدم الحمراء (ORE) ، والذي سننظر فيه بشكل منفصل ، على الرغم من أنه يرتبط ارتباطًا مباشرًا بانحلال الدم التناضحي.
المقاومة الأسموزية لكريات الدم الحمراء
تحدد المقاومة التناضحية لخلايا الدم الحمراء ثبات أغشيتها عند وضعها في محلول ناقص التوتر.
تحدث بيئة نظام التشغيل:
- الحد الأدنى- يتحدثون عن ذلك عندما تبدأ الخلايا الأقل مقاومة في الانهيار في 0.46 - 0.48٪ محلول كلوريد الصوديوم ؛
- أقصى- كل خلايا الدم تتحلل بتركيز كلوريد الصوديوم 0.32 - 0.34٪.
تعتمد المقاومة التناضحية لخلايا الدم الحمراء بشكل مباشر على شكل الخلايا ودرجة نضجها. من سمات شكل كريات الدم الحمراء ، التي تلعب دورًا في ثباتها ، مؤشر كروية (نسبة السُمك إلى القطر) ، والذي يتراوح عادةً بين 0.27 و 0.28 (من الواضح أن الفرق صغير).
الشكل الكروي هو سمة من سمات كريات الدم الحمراء الناضجة جدًا ، والتي هي على وشك إكمال دورة حياتها ، ومقاومة أغشية هذه الخلايا منخفضة جدًا. مع فقر الدم الانحلالي ، يشير ظهور الأشكال الكروية (الكروية) إلى الموت الوشيك لخلايا الدم هذه ، ويقلل هذا المرض من متوسط العمر المتوقع لديهم بمقدار 10 مرات ، ولا يمكنهم أداء وظائفهم لأكثر من أسبوعين ، وبالتالي ، وجودهم في الدم لمدة 12-14 يوما يموتون. وهكذا ، مع ظهور الأشكال الكروية في فقر الدم الانحلالي ، يزداد مؤشر كروية أيضًا ، مما يصبح علامة على الموت المبكر لكريات الدم الحمراء.
الخلايا الشابة التي غادرت لتوها النخاع العظمي تتمتع بأكبر مقاومة لانخفاض ضغط الدم -وأسلافهم. امتلاك شكل قرص مسطح ، مؤشر كروي منخفض ، كريات الدم الحمراء الصغيرة تتحمل مثل هذه الظروف جيدًا ، لذلك ، يمكن استخدام مؤشر مثل المقاومة التناضحية لكريات الدم الحمراء لتوصيف شدة تكون الكريات الحمر ، وبالتالي ، نشاط تكوين الدم للأحمر نخاع العظم.
سؤال واحد صغير
في الختام ، أود أن أتطرق إلى موضوع واحد صغير ، والذي ، في الوقت نفسه ، غالبًا ما يثير اهتمام المرضى: انحلال الدم في كريات الدم الحمراء في علاج بعض الأدوية.
تسبب بعض الأدوية زيادة في تدمير خلايا الدم الحمراء. يعتبر انحلال الدم في كريات الدم الحمراء في هذه الحالات من الآثار الجانبية للدواء الذي يختفي عند توقف الدواء. تشمل هذه الأدوية:
- بعض المسكنات وخافضات الحرارة (حمض أسيتيل الساليسيليك والأسبرين المحتوية على الأميدوبيرين) ؛
- توجد أوجه قصور مماثلة في بعض (دياكارب ، على سبيل المثال) ومستحضرات النيتروفوران (فيورادونين) ؛
- تميل إلى تدمير أغشية كريات الدم الحمراء والعديد من السلفوناميدات قبل الأوان (سلفالين ، سلفابيريدازين) ؛
- يمكن أن يتأثر غشاء خلايا الدم الحمراء بالأدوية التي تقلل (تولبوتاميد ، كلوربروباميد) ؛
- يمكن أن يحدث انحلال الدم في كريات الدم الحمراء بسبب الأدوية التي تهدف إلى علاج مرض السل (أيزونيازيد ، باسك) والأدوية المضادة للملاريا (كينين ، كينين).
لا تشكل هذه الظاهرة خطرًا خاصًا على الجسم ، فلا داعي للذعر ، لكن لا يزال يتعين عليك إبلاغ طبيبك بما لديك من شكوك ، والذي سيحل المشكلة.
فيديو: تجربة - انحلال الدم في خلايا الدم الحمراء تحت تأثير الكحول
بالنسبة للعيادة ، من المهم للغاية تحديد كل من الزيادة في نشاط تحلل الفبرين في الدم وانخفاضه ، والذي قد يترافق إما مع الاستهلاك المكثف للبلازمينوجين ومحفزاته أثناء تنشيطها وتثبيتها في الجلطات والجلطات الدموية ، أو مع زيادة في مضاد البلازمين البلازمين ونشاط مضاد التنشيط. في الوقت نفسه ، يجب أن نتذكر دائمًا أن انحلال الفيبرين الشديد في الجلطات والخثرات ، الذي تم اكتشافه من خلال زيادة محتوى PDP في البلازما ، يتم دمجه بشكل طبيعي مع انخفاض احتياطي البلازمينوجين ومنشطاته في البلازما (الدم المنتشر) .
حالة تحلل الجلطة الطبيعية
لمحة عامة عن حالة تحلل الجلطة الطبيعييمكن إعطاء طريقة Kotovshchikova-Kuznik في تعديل V.P. Baluda أو في تعديل E. P. Ivanov.
مبدأ الطريقة هو أنه مع الأخذ في الاعتبار عدد الهيماتوكريت ومحتوى كريات الدم الحمراء في الدم ، يتم تحديد عدد الأخيرة التي ترسبت من الجلطة خلال فترة حضانة معينة. مع زيادة نشاط انحلال الفبرين في الدم ، يزداد حجم هذا الجزء (الثالث) من كريات الدم الحمراء. في حالة نقص التخثر العميق ونقص الفيبرينوجين الدم ، حيث تتشكل الجلطات المعيبة والمرخية ، قد تعطي هذه التقنية نتائج خاطئة.
وفقًا لطريقة بيدويل التي تم تعديلها بواسطة G.V. Andreenko ، يتم تقييم انحلال الفبرين من خلال فقدان الفيبرين من الجلطات.
التحقيق في نشاط الفبرينات لجزء الاوغلوبولين من بلازما الدم
تعتبر دراسة نشاط انحلال الفيبرين لجزء الأوجلوبولين من بلازما الدم أهم اختبار أساسي ، وهو ما أكدته لجنة الجمعية الأوروبية للتخثر.
لهذا الغرض ، يتم استخدام إما الطرق التقليدية لتحديد تحلل euglobulin للجلطات ، أو تحديد النشاط التحليلي لجزء euglobulin على ألواح الفيبرين (في الحالة الأخيرة ، يتم تسوية تأثير كميات مختلفة من الفيبرين على قراءات الاختبار) . يحدث التحلل في هذه الاختبارات بسبب حقيقة أن البلازمينوجين ومحفزاته يتم إطلاقها في جزء euglobulin ، بينما تتم إزالة مثبطات انحلال الفيبرين في الغالب. لذلك ، باستخدام اختبارات euglobulin ، يتم تقييم محتوى البلازمينوجين ومنشطاته في بلازما الدم.
عند تلقي الدم في ظل ظروف التمثيل الغذائي القاعدي ، أي في الصباح على معدة فارغة ، قبل أن يستيقظ المريض من الفراش ، لا يوجد تقريبًا منشطات بلازمينوجين للأنسجة في الدم. لذلك ، في ظل هذه الظروف ، يتم تحديد حالة العملية الداخلية (الدم السليم) لتنشيط البلازمينوجين بشكل أساسي.
يمكن تسريع هذه العملية بشكل حاد عن طريق التنشيط التلامسي الأولي لمركب العوامل XIIa-kallikrein-BM kininogen مع الكاولين ، ونتيجة لذلك يتم تقليل تحلل الأوجلوبولين من 2.5 إلى 3 ساعات إلى 2-10 دقائق. بناءً على مبدأ تفعيل الاتصال طرق التحديدثاني عشر أ- انحلال الفبرين المعتمد.
يتم تقدير قدرة البطانة الوعائية على إفراز منشط انحلال الفبرين الخارجي (منشط من نوع الأنسجة ، ATT) في الدم عن طريق تسريع تحلل الأوجلوبولين بعد ضغط الأوعية الدموية بواسطة صفعة ضغط الدم ( اختبار Oivin-Chekalina) ، أو بعد تمرين بجرعة على مقياس سرعة دراجة ، أو مع التحفيز الدوائي (مشتقات فازوبريسين - ديسموبريسين أو أديوريتين).
تم وصف العديد من التعديلات على هذه التقنيات في الأدبيات.
لذلك ، على سبيل المثال ، عند القيام اختبار الضغط حسب الطريقة الكلاسيكيةيتم الحفاظ على ضغط الكفة عند 10.7 كيلو باسكال (80 ملم زئبق) أو 1.3 كيلو باسكال (10 ملم زئبق) فوق الانبساطي لمدة 15-20 دقيقة ، ومع تعديل أكثر حداثة للاختبار وفقًا لـ B.P.Balude - 3 دقائق مع الضغط 1.3 كيلو باسكال (10 ملم زئبق) فوق الضغط الانقباضي. في كلتا الحالتين ، في المرة الثانية يتم أخذ الدم للدراسة من الأوعية المشدودة قبل إزالة الكفة.
بمساعدة هذه العينات ، يمكن دراسة تأثير الضغط ليس فقط على انحلال الفبرين ، ولكن أيضًا على الخصائص الأخرى المضادة للتخثر لجدران الوعاء الدموي (مضاد التخثر ، مضاد التجمّع ، إلخ).
اختبارات الإجهاديتم توحيدها بحيث يتم تسريع تحلل الأوجلوبولين الطبيعي مرتين أو أكثر (يؤدي إجراء دراسة لا تخضع لظروف التمثيل الغذائي القاعدية إلى أخطاء عشوائية كبيرة جدًا ، لذلك ، قبل بدء الدراسة ، يجب ألا ينهض المريض من السرير في الصباح ، يجب إجراء بزل الوريد في الجناح).
ضعف الاستجابة للضغطأو الحمل يشير إلى تفاعل غير كافٍ لنظام التحلل الفبري وزيادة خطر التجلط ، وهو ما تم التحقق منه من خلال عدد من الدراسات.
محتوى البلازمينوجين في بلازما الدم
محتوى البلازمينوجين في بلازما الدميمكن تقييمها جزئياً بإضافة جرعة معينة من الستربتوكيناز إلى جزء euglobulin. وفقًا لطريقة Slobozhankina - Fedorova ، يتم اختيار نشاط الستربتوكيناز ، والذي يضمن تحلل الأوجلوبولين في 9-11 دقيقة ، ومع ذلك ، من الممكن استخدام تركيزاته العالية (يتم عرض المؤشرات المعيارية في كل مختبر على حدة). مع نقص البلازمينوجين ، يتم تمديد وقت التحلل في هذا الاختبار إلى حد كبير ، وكلما قل هذا الإنزيم.
دراسة تحلل جلطة البلازما
دراسة موازية لتحلل الجلطة بالبلازماباستخدام نفس الطريقة ، عندما يتم تحفيز العملية باستخدام الستربتوكيناز ، فإنه يسمح لنا بتقييم نشاط مضاد البلازمين في بلازما الدم المدروسة من خلال الاختلاف في المؤشرات التي تم الحصول عليها ، حيث لا يوجد عمليًا مضاد للبلازمين في جزء euglobulin ، ولكنه موجود في البلازما الكاملة المتخثرة.
يتم حساب كمية مضاد البلازمين بواسطة المعامل
(PLS-ELS) / ELS ؛
حيث PLC هو وقت تحلل جلطة البلازما في وجود الستربتوكيناز ،
ELS هو وقت تحلل جلطة euglobulin في وجود نفس جرعة الستربتوكيناز.
أكثر دقة ولكن سهل التنفيذ طرق دراسة انحلال الفبرين عن طريق تفكك أزوفيبرين، وهو مركب فيبرين مرتبط تساهميًا بركيزة كروموجينية (أزوبيبتيد)
مبدأ الطريقة هو أن 10 ملغ من أزوفيبرين يضاف إلى ثلاثة أنابيب اختبار ، مختلطة مع محلول (pH 7.4) ، وبعد ذلك يضاف 0.15 مل من بلازما الدم المدروسة إلى اثنين منهم بالإضافة إلى أحد أنابيب الاختبار هذه - 10000 وحدة / مل من الستربتوكيناز.
بعد فترة الحضانة لمدة ساعة ، يتم ترشيح المحاليل وقياسها ضوئيًا على مقياس طيف ضوئي بطول موجة 440 نانومتر أو على مقياس ألوان طبي مع مرشح الضوء الأزرق.
يتم تحديد نشاط البلازمين في عينة بدون الستربتوكينازوفقًا للتغير في الكثافة الضوئية للمرشح مقارنة بمحتويات أنبوب الاختبار الثالث ، ومحتوى البلازمينوجين في البلازما - في العينة التي تحتوي على الستربتوكيناز. أثناء حضانة البلازمين والبلازما المدروسة على نفس الركيزة ، يتم تحديد نشاط مضاد البلازمين. تؤخذ مؤشرات التحكم التي تم الحصول عليها في دراسة بلازما الدم الطبيعية بنسبة 100٪.
وبالتالي ، باستخدام مجموعة صغيرة نسبيًا من الأساليب المختبرية والوظيفية البسيطة ، يمكن للمرء الحصول على فكرة عن حالة الآليات المختلفة لتحلل الفيبرين ومحتوى البلازما والإفراج عن جدار الوعاء الدموي للبلازمينوجين ومنشطاته ومثبطاته.
كما هو الحال في دراسة نظام تخثر الدم ، يمكن استكمال هذه البيانات بشكل كبير من خلال التحديد المناعي لمكونات نظام انحلال الفبرين ومنتجات انقسام الفيبرينوجين والفيبرين.
طرق تحديد "الشهود" والعلامات الجزيئية للتخثر داخل الأوعية الدموية وانحلال الفبرين
في عملية تخثر الدم داخل الأوعية الدموية وانحلال الفيبرين الشديد المرتبط به ، من ناحية ، يحدث الاستهلاك وانخفاض واضح إلى حد ما في مستوى الدم لعدد من مكونات نظام الإرقاء ، ومن ناحية أخرى ، ظهور أجزائها وشظاياها ومستقلباتها الغائبة في بلازما الدم الطبيعية أو الموجودة بكميات قليلة.
التعرف على هؤلاء "الشهود" وعلامات تنشيط التخثر داخل الأوعية الدموية وانحلال الفيبرين له أهمية تشخيصية كبيرة في مدينة دبي للإنترنت ، وأمراض الانسداد التجلطي والتهاب الأوعية الدموية الدقيقة من أصول مختلفة (المعدية ، المناعية ، الورم ، إلخ).
علامات استهلاك وتفعيل ارقاء الصفائح الدموية
تشمل علامات استهلاك وتفعيل ارتباط الصفائح الدموية بالإرقاء قلة الصفيحات ، وزيادة مستوى البلازما لمكونات الحبيبات - عامل مضاد الهيبارين 4 للصفائح الدموية (3-ثرومبوجلوبولين ، إلخ) ، بالإضافة إلى الحفاظ على وظائف أقل. نشط وأسوأ الصفائح الدموية المتجمعة في الدورة الدموية.
العلامات الرئيسية للضرر والدونية الوظيفية للبطانة الوعائية هي زيادة مستوى عامل فون ويلبراند في بلازما الدم ، أو ضعف تفاعل تحلل الأوجلوبولين أثناء ضغط الأوعية الدموية بالكفة ، أو التمرين ، أو إدخال نظائر الفازوبريسين .
فرط تخثر الدم
قد يكون فرط التخثر ، إن وجد ، علامة على تنشيط نظام تخثر الدم. يتم اكتشافه باستخدام اختبارات التخثر العامة وطرق البحث الآلية (التخثر الخثاري) ، وفي العيادة - بناءً على صعوبة الحصول على الدم من الوريد - تجلط سهل لكل من الوعاء الدموي والإبر ، بالإضافة إلى عدم اكتمال استقرار الدم عند مزجه مع السترات (التكوين في أنبوب الاختبار الكلي و microclots).
هذا الدم المتخثر جزئيًا غير مناسب تمامًا لمزيد من الدراسة لنظام الإرقاء ، لذلك ، قبل طرد الدم ، من الضروري التحقق من وجود أي جلطات فيه. في حالة وجود جلطات ، لا يخضع الدم لمزيد من الفحص (ولكن يمكن استخدامه لتحضير مصل الدم وإجراء عدد من التحليلات الكيميائية الحيوية). تظهر التجربة أن التقيد الصارم غير الكافي بهذه التوصية غالبًا ما يكون مصدرًا للأخطاء الجسيمة في دراسة نظام الإرقاء.
فرط تخثر الدم في عدد من الاختبارات لا يشير حتى الآن إلى وجود خطر التخثر.. علاوة على ذلك ، يُعرف عدد كبير من داء التخثرات ، والتي تتميز بنقص مبدئي ، بدلاً من فرط تخثر الدم. وتشمل هذه التخثر بسبب نقص العامل XII ، والبريكاليكرين ، ومولد الكينينوجين VM ، وخلل فيبرينوجين الدم ، ونقص البروتين C ، وما إلى ذلك. من انحلال الفبرين وما إلى ذلك.
للأسباب المذكورة ، من المستحيل وضع علامة متساوية بين فرط التخثر وخطر التجلطوهذا هو سبب عدم تضمين هذه الأعراض حاليًا في عدد الندبات الناتجة عن أهبة التخثر.
تفعيل "الجسر" بين العوامل XIIa + kallikrein والعامل السابع
تفعيل "الجسر" بين العوامل XIIa + kallikrein والعامل السابع ، والذي يتم التعرف عليه من خلال فحص زمن البروثرومبين مع الثرومبوبلاستين البقري قبل وبعد تبريد بلازما الدم قيد الدراسة لمدة 18-24 ساعة عند درجة حرارة + 4 درجة مئوية (بارد) اختبار التنشيط). مع وجود عدد من الثرومبوفيليا ، بعد التبريد ، لوحظ انخفاض في زمن البروثرومبين بنسبة 25-50 ٪. الثرومبوبلاستين بخلاف الأبقار ليست مناسبة لهذه الدراسة.
وجود الببتيد A الحر في بلازما الدم
إن وجود الببتيد A الحر في بلازما الدم ، الذي تم الكشف عنه بالطرق المناعية ، هو دليل مباشر على تجلط الدم ، لأن الثرومبين يشق الببتيدات بشكل أساسي من جزيء الفيبرينوجين.تتوفر هذه التقنية بشكل محدود بسبب صعوبة الحصول على مضاد مناعي لـ A- مصل.
بالإضافة إلى ذلك ، فإن الزيادة في مستوى الببتيد في بلازما الدم عادة ما تكون قصيرة العمر ، حيث يتم التخلص منها بسرعة من مجرى الدم بواسطة نظام البالعات وحيدة النواة. في هذا الصدد ، يكون مستوى الببتيد أ مفيدًا فقط عند زيادته ، وهي علامة موثوقة على وجود الثرومبين النشط في الدم.
التقسيم الطبقي لبركة الفيبرينوجين وتشكيل مجمعات الفيبرين مونومر القابلة للذوبان (SFMC) في البلازما
في الأشخاص الأصحاء ، يتخثر الفيبرينوجين ، بحكم خصائصه ، والتنقل الكهربي وحساسية الثرومبين ، تمامًا في اختبار الثرومبين مع إضافة الثرومبين لمدة 12-14 ثانية.
على النقيض من ذلك ، مع التنشيط داخل الأوعية الدموية لتخثر الدم (تخثر الدم) وانحلال الفيبرين ، يتم تقسيم تجمع الفيبرينوجين إلى طبقات ، وتشكيل RFMCs التي تربط جزءًا من الفيبرينوجين (الفيبرينوجين المحظور) ، وربما منتجات انحلال الفيبرين المبكرة (شظايا X و V) ، وكذلك ملفات PDF المبكرة والمتأخرة في الحالة المجانية. RFMK والفيبرينوجين المرتبط به تحت تأثير الثرومبين إما لا يتخثر (يبقى في المصل) ، أو يتخثر ببطء وفقط عند التعرض لتركيزات عالية من الثرومبين (3 ثوان). تُستخدم اختبارات تجلط الدم التالية للكشف عن السلع الاستهلاكية والمكونات الخاملة الأخرى من تجمع الفيبرينوجين في البلازما ومصل الدم.
اختبار بيتا نافثول
اختبار بيتا-نافثول (المعروف سابقًا باسم تحديد الفيبرينوجين ب) ليس محددًا بدرجة كافية ، لذلك نادرًا ما يستخدم في الوقت الحالي.
يكمن جوهرها في حقيقة أن محلول بيتا-نافثول في 50٪ إيثانول (5 قطرات لكل 1 مل) يضاف إلى بلازما الدم. إذا ، بعد 10 دقائق ، ترسب راسب على شكل رقائق خشنة عند الاهتزاز ، تعتبر العينة إيجابية.
اختبار الإيثانول
من السهل إجراء اختبار الإيثانول ؛ لإجراء اختبار الإيثانول ، يتم إضافة 0.15 مل من محلول الإيثانول بنسبة 50٪ إلى 0.4 مل من بلازما الاختبار ، مع تثبيت محلول السترات الممزوج بحمض أمينوكابرويك (لمنع انحلال الفيبرين) (يتم فحص التركيز بمقياس كحول).
يشير تكوين جلطة طرية بعد 10 دقائق إلى وجود RFMK في بلازما الدم. الاختبار محدد ، لكنه يسمح باكتشاف جزء فقط من RFMK (جزيئي كبير بشكل أساسي) ، ويعطي نتيجة إيجابية في DIC والتخثر وأنواع أخرى من الجلطات الدموية. في المرحلة الثالثة مدينة دبي للإنترنت ، على خلفية نقص فيبرينوجين الدم الحاد (أقل من 0.5-0.7 جم / لتر) ، كما هو الحال مع الهيبارين ، غالبًا ما يصبح اختبار الإيثانول سالبًا.
اختبار كبريتات البروتامين
يعتمد اختبار كبريتات البروتامين على ترسيب منتجات انحلال الفبرين المبكرة وجزء من RFMK مع كبريتات البروتامين الذي يتم الحصول عليه من ذوبان الأسماك. الاختبار محدد تمامًا ، ولكن فقط أنواع معينة من كبريتات البروتامين مناسبة لتنفيذه.
لا ترتبط قدرة كبريتات البروتامين على تعطيل الهيبارين والتسبب في تجلط الدم. لهذا السبب ، يجب اختبار عينات كبريتات البروتامين المستخدمة في اختبار تجلط الدم مسبقًا إما على محلول مونومر الفبرين أو على بلازما الدم الطبيعية ، حيث يتم إضافة كمية صغيرة من الثرومبين والستربتوكيناز (أو الستربتوكيناز فقط) مسبقًا.
إذا أصبح الاختبار في نفس الوقت إيجابيًا ، فإن كبريتات البروتامين مناسبة للاستخدام التشخيصي. تتضمن العديد من مجموعات التشخيص ذات العلامات التجارية بلازما التحكم (المرجعية) ، والتي تعطي نتيجة إيجابية في اختبار كبريتات البروتامين. يتم استخدامه لاختبار الكاشف.
يجب أن يؤخذ في الاعتبار أن باستخدام اختبارات الإيثانول وكبريتات البروتامين ، تم الكشف عن مكونات مختلفة من تجمع الفيبرينوجين، وبالتالي فإن نتائجهم لا تتوافق دائمًا مع بعضها البعض. لذلك ، في بعض مرضى DIC ، كلا الاختبارين إيجابي ، في البعض الآخر ، واحد منهم فقط. لذلك ، من أجل تشخيص أكثر موثوقية ، من الضروري إجراء كلا الاختبارين.
اختبار أورثوفينانثرولين
يعد اختبار أورثوفينانثرولين (OPT) مفيدًا للغاية ، ويسمح بالتحديد النوعي والكمي لـ RFMK في البلازما مع عدد صغير من الصفائح الدموية (يتم طرده أيضًا لمدة 20 دقيقة عند 4000 دورة في الدقيقة).
مناسب للاختبار فقط حمض الهيدروكلوريك أورثوفينانثرولين. يتم خلط محلول أورثوفينانثرولين 0.033 م (0.78٪) في درجة حرارة الغرفة بكميات متساوية (0.1 مل لكل منهما) مع البلازما قيد الدراسة على شريحة زجاجية ، وأثناء الرج ، يتم تحديد وقت ظهور الرقائق الأولى في الخليط .
تتم المحاسبة في غضون دقيقتين.
يتم تحويل النتائج التي تم الحصول عليها (بالثواني) باستخدام منحنى معايرة إلى مقدار RFMK. يتم الحصول على منحنى المعايرة عن طريق إضافة تركيزات مختلفة من مونومر الفبرين ، الذي تم الحصول عليه بطريقة Radzevich-Khodorova ، إلى تجمع بلازما الدم للأشخاص الأصحاء (المتبرعين). عادة ، تظهر الرقائق بعد 120 ثانية ؛ كلما ظهرت بشكل أسرع ، زاد احتواء البلازما المدروسة على RFMK.
الاختبار أكثر موثوقية من الإيثانول وكبريتات البروتامين.
الكشف عن RFMK عن طريق تراص كريات الدم الحمراء المغلفة بمونومرات الفيبرين (اختبار FM)
المجموعة الأولى (O) كرات الدم الحمراء البشرية مغلفة بمونومرات الفيبرين وتستخدم في التشخيص.
يتم خلط بلازما الدم على الزجاج مع كريات الدم الحمراء الاختبارية. يشير ظهور التراص (المقدّر من + إلى +++) إلى وجود تفاعل RFMK مع مونومرات الفيبرين على سطح كريات الدم الحمراء.
الاختبار حساس للغاية ، فهو يسمح باكتشاف RFMK بتركيزات أعلى من 10 مجم / مل.
الكشف الكامل عن جزء التخثر من تجمع الفيبرينوجين و RFMK باستخدام سم الإيفا الرملية
محلول من سم الرمل efa أو كسر تجلطه ( إيكيتوكس ، إيكارين) يتخثر تمامًا الفيبرينوجين ، وجميع منتجات SFMC ومنتجات انحلال الفبرين المبكرة ، وبالتالي يمكن استخدامه لتقدير الكمية الإجمالية لمكونات التخثر في تجمع الفيبرينوجين في بلازما الدم وكمية SFMC والفيبرينوجين المحظور المتبقي بعد التجلط الأولي في المصل الذي تم الحصول عليه بعد تخثر الثرومبين.
يستخدم تركيز السم الذي يسبب تخثر البلازما الطبيعي في 20-30 ثانية.
في حالة وجود RFMK في العينة التي تحتوي على السم ، يتم اكتشاف كمية أكبر من الفيبرينوجين في بلازما الدم مقارنة باختبار الثرومبين ، وفي مصل الدم الذي تم الحصول عليه بعد التخثر بثرومبين لمدة 15 ثانية ، عند إضافة السم ، يتم تكوين الجلطة الثانية ، حيث يتم حظر الفيبرينوجين المرتبط به جميع RFMK ، وكذلك ملفات PDF المبكرة.
هذه الظواهر هي سمة من سمات تخثر الدم والتخثر الهائل داخل الأوعية (DIC ، الجلطات الدموية ، وما إلى ذلك) ، بينما في مصل دم الأشخاص الأصحاء ، لا يكشف اختبار السموم عن RFMK ويسد الفيبرينوجين. بعد التخثر بالسم ، لم يعد يتم اكتشاف الفيبرينوجين ومشتقاته الجزيئية الكبيرة سواء بالكروماتوغرافيا أو باستخدام اختبار تراص المكورات العنقودية.
بالإضافة إلى ما سبق ، يمكن استخدام الاختبارات التالية لاكتشاف RFMK والمنتجات المبكرة لانقسام الفيبرينوجين (أو الفيبرين) بواسطة البلازمين.
اختبار التصاق المكورات العنقودية
اختبار التصاق المكورات العنقودية (SCC ، اختبار لقط العنقوديات) هو طريقة بسيطة ومفيدة للغاية لاكتشاف RFMK في المصل ومنتجات انحلال الفبرين المبكر (شظايا X ، وكذلك الفيبرينوجين المحظور المرتبط بها).
يعتمد على قدرة بعض سلالات المكورات العنقودية الذهبية (نيومان D 2 S وغيرها) ، نظرًا لوجود عامل تثبيت خاص على سطحها ، للخضوع للتراص تحت تأثير RFMK وملفات PDF المبكرة (أجزاء X) المتبقية في المصل بعد التخثر.
الدم للبحثيؤخذ على محلول استقرار ممزوج بحمض أمينوكابرويك لمنع انحلال الفبرين في المختبر.
يتم إجراء الاختبار على الزجاج أو في طبق من 74 بئراً عن طريق خلط كميات متساوية من التشخيص ومصل دم الاختبار بتخفيفات 1: 2 ، 1: 4 ، 1: 8 ، إلخ.
يتم أخذ التخفيف النهائي في الاعتبار ، حيث لا يزال يتم تحديد التراص. في الأشخاص الأصحاء ، لا يتجاوز محتوى RFMK وملفات PDF المبكرة في المصل 0.002 جم / لتر (2 ميكروغرام / مل).
التحديد المناعي لـ PDP المبكر والمتأخر في مصل الدم
يعتمد التحديد المناعي لـ PDP المبكر والمتأخر في مصل الدم على قدرة مصل مضاد الفيبرينوجين على إعطاء ترسيب مناعي مع مكونات تجمع الفيبرينوجين (يتم تحديد حساسية المصل عن طريق تخفيف الفيبرينوجين).
مع الرحلان الكهربي المناعي ، بسبب التنقل المختلف لـ RFMK ، الأجزاء X و Y و D و E ، يمكن تحديدها التقريبي. يتم إجراء التقييم الكمي من خلال فحص التخفيفات المختلفة للفيبرينوجين والبلازما والمصل. اختبارات أكثر تحديدًا باستخدام الأمصال المضادة لـ D ، و anti-dimer D ، إلخ.
اختبار PDF لاتكس
يتكون اختبار ارتباط جسيمات اللاتكس المحمّل بالأجسام المضادة لـ D ، و Anti-E ، و antidimer D ، وما إلى ذلك (اختبار PDF-latex) في تحديد ملفات PDF المدرجة باستخدام مجموعات التشخيص لربط جزيئات اللاتكس عند مزجها بتخفيفات مختلفة من مصل الاختبار.
تحديد محتوى العامل الثالث عشر المنشط في بلازما الدم كمؤشر لدوران الثرومبين في الدم
ينشط العامل الثالث عشر بواسطة الثرومبين في وجود أيونات الكالسيوم، مشقوق في السلسلة A ، التي لها نشاط استقرار الفبرين ، وسلسلة S الخاملة.
إن التحديد المنفصل لمحتواها (وفقًا لدرجة استقرار أوليغومرات الفيبرين والمناعة) يجعل من الممكن تشخيص تخثر الدم داخل الأوعية الدموية عن طريق وجود تجلط الدم. الطريقة معقدة وتستخدم بشكل أساسي للبحث العلمي. يتم حاليًا تطوير طرق أكثر بأسعار معقولة لتحديد العامل الثالث عشر أ.
الكشف عن تنشيط البروثرومبين
عندما يتم تنشيط البروثرومبين بواسطة العامل Xa ، فإن جزء F1-2 ، الذي يتم تحديده مناعيًا ، ينشطر من الركيزة. تشير الزيادة في محتوى الأخير في البلازما إلى تنشيط نظام تخثر الدم.
تحديد العلامات الخلوية لتنشيط التخثر داخل الأوعية الدموية
ظاهرة تلف (تجزئة) كريات الدم الحمراء
مع DIC وأنواع أخرى من الحصار المفروض على دوران الأوعية الدقيقة في الأوعية الصغيرة ، تتضرر كريات الدم الحمراء ، وبالتالي يزداد عدد الخلايا المجزأة في مسحات الدم (أكثر من 7-10٪).
بتعبير أدق ، يتم تحديد هذه الظاهرة من خلال فصل خلايا الدم في تدرج كثافة ficoll-verografin (كثافة 1.077) وفقًا للطريقة المستخدمة في علم المناعة لعزل الخلايا الليمفاوية والوحيدات. عادةً ما تكون حلقة الطور البيني للكريات البيض ذات لون أبيض براق ، وعند عدها في غرفة غورييف ، تحتوي على أقل من 400 كريات حمراء لكل 1 ميكرولتر (عادةً ما يصل إلى 200).
مع مدينة دبي للإنترنت ، يزداد عدد كريات الدم الحمراء العائمة (التالفة) بشكل كبير(ما يصل إلى 1000-40.000 في 1 ميكرولتر أو أكثر) ، حيث تتحول الحلقة إلى اللون الوردي أو الأحمر. يتم تحديد هذه الظاهرة عن طريق حساب محتوى كريات الدم الحمراء في الطور البيني (في غرفة Goryaev).
تسمح هذه الطريقة بالتمييز بين مدينة دبي للإنترنت مع حصار دوران الأوعية الدقيقة وتجلط الأوعية الرئيسية ، حيث يكون الضرر الذي يصيب كريات الدم الحمراء ضئيلًا.
ظاهرة إنتاج الثرومبوبلاستين بواسطة الخلايا الوحيدة
في بعض أنواع DIC (خاصة من أصل مناعي ومعدي) ، يتم تنشيط الخلايا الأحادية وتكتسب القدرة على إنتاج الثرومبوبلاستين في الأنسجة.
للكشف عن هذه الظاهرة ، يتم فصل خلايا الدم بتدرج كثافة (خليط ficoll-verografin ، كثافة 1.077) للحصول على جزء يحتوي على عدد كبير من الخلايا الوحيدة المستزرعة لفترة وجيزة ، ثم يتم تحديد نشاط التخثر للمعلق قبل الخلية وبعدها تدمير. في عملية الإنتان المعدية الشديدة ، يمكن قمع وظيفة الخلايا الوحيدة.
تحديد انخفاض في مستوى بلازما الدم (استهلاك) لمكونات أنظمة التخثر ومحلل الفبرين وكاليكرين-كينين
في مدينة دبي للإنترنت الحادة وتحت الحاد ، هناك زيادة في استهلاك واستقلاب عدد من مكونات نظام الإرقاء ، وبالتالي ينخفض مستواها في البلازما بشكل كبير. إن قمع العوامل الثامن ، الخامس ، مضاد الثرومبين الثالث ، البروتينات C و S ، الفبرونيكتين ، البريكاليكرين ، كينينوجين عالي الوزن الجزيئي ، البلازمينوجين واضح بشكل خاص.
إن تحديد بعض هذه المعلمات مهم ليس للتشخيص بقدر ما هو مهم لتقييم شدة العملية وفعالية العلاج البديل.
مستوى العامل الأول (الفيبرينوجين)غالبًا ما يتناقص ، ومع ذلك ، يتم حجبه عن طريق محتواه المرتفع في البداية من البلازما في الأمراض المعدية والمناعة ، وتسمم الحمل ، وأنواع أخرى من علم الأمراض.
الكشف عن المستضدات
في عملية تنشيط عوامل التخثر وانحلال الفيبرين والتكوين اللاحق لمجمعاتها مع مضادات فسيولوجية ، تظهر علامات مستضدية جديدة ، والتي لا توجد بشكل منفصل في الأجزاء المكونة لهذه الأزواج. وهكذا ، على سبيل المثال ، يشكل معقد الثرومبين ومضاد الثرومبين III مستضدًا لا يتميز بالثرومبين أو مضاد الثرومبين III بشكل منفصل.
بالطريقة نفسها ، يتم تكوين المستضد الجديد في مركب البلازمين - مضاد البلازمين المقترن ، وما إلى ذلك. في ظل وجود مضادات هذه المستضدات الجديدة ، من السهل إثبات وجود إنزيمات رئيسية نشطة لتخثر الدم (الثرومبين) وانحلال الفيبرين في الدم (بلازمين).
تحتوي العيادة الحديثة على مجموعة كبيرة من الاختبارات التي تكشف عن التنشيط داخل الأوعية الدموية لتخثر الدم وانحلال الفيبرين.
العديد من هذه الاختبارات متاحة للجمهور وهي سريعة وسهلة الإكمال. يوفر استخدامها مع بعض الدراسات الأخرى تشخيصًا مختبريًا موثوقًا لمدينة دبي للإنترنت وأنواع أخرى من التخثر الهائل داخل الأوعية. تعد مراقبة علامات تخثر الدم داخل الأوعية أمرًا مهمًا أيضًا من أجل التقييم الصحيح لديناميكيات العملية المرضية ، ودرجة فعالية العلاج وكفايته.
المبدأ: تعتمد الطريقة على الترسيب في وسط حمضي وعند درجة حرارة منخفضة لجزء euglobulin الذي يحتوي على عوامل التخثر وانحلال الفيبرين. المكون الرئيسي لجزء euglobulin هو البلازمينوجين ، بالإضافة إلى أنه يحتوي على حوالي 25 ٪ من الفيبرينوجين والبروثرومبين وعوامل أخرى من نظام تخثر الدم. يذوب الراسب الناتج من اليوجلوبولين. يتم تحويل الفيبرينوجين إلى الفبرين. الوقت من تكوين جلطة الفيبرين إلى ذوبانها يعبر عن نشاط تحلل الفبرين في الدم.
الكواشف: 1. محلول 0.1 م من أكسالات الأمونيوم أو أكسالات الصوديوم. 2. محلول بورات الصوديوم (9.0 جم من NaCI و 1.0 جم من Na2B4O7 مذابة في 1 لتر من الماء المقطر) ؛ 3. الماء الحمضي: 1 مل من محلول حمض الخليك 1٪ و 90 مل من الماء المقطر. 4. 0.025 M محلول CaCl2.
تقدم التعريف. يتم نقل 0.1 مل من البلازما إلى أنبوب الطرد المركزي ويضاف 1.8 مل من الماء الحمضي. في هذه الحالة ، يسقط جزء euglobulin من البروتين من البلازما. يتم خلط محتويات أنبوب الاختبار بعناية ويوضع أنبوب الاختبار في الثلاجة بدرجة حرارة +4 درجة مئوية. بعد 20 دقيقة من أجهزة الطرد المركزي لمدة 10 دقائق عند 2000 دورة في الدقيقة. يمتص السائل الطاف. على الراسب صب 0.1 مل من بورات الصوديوم ووضعها في ترموستات عند 37 درجة مئوية لبضع دقائق حتى الذوبان الكامل. أضف 0.1 مل من CaCl2. يتم ملاحظة لحظة تكوين الجلطة ووضعها مرة أخرى في منظم حرارة حتى يتم التحلل الكامل.
القيم الطبيعية: تتحلل الجلطة خلال 150 - 220 وحتى 260 دقيقة.
طريقة موحدة لتحديد نشاط انحلال الفبرين عن طريق طريقة تحلل euglobulins البلازما (وفقًا لـ E.Kowalski et al. ، 1959).
المبدأ: إن وقت انحلال الجلطة ، كما هو محدد بواسطة تحلل جزء الأوجلوبولين ، يعكس نشاط تحلل الفبرين للبلازما الخالية من المثبطات.
الكواشف والمعدات: 1. محلول أكسالات الأمونيوم 1.42٪ أو محلول أكسالات الصوديوم بنسبة 1.34٪. 2. محلول 1٪ من حامض الخليك. 3. محلول بورات (9 جم من كلوريد الصوديوم و 1 جم من بورات الصوديوم ، يتم إذابتهما في 1000 مل من الماء المقطر. من الأفضل تخزين محلول البورات ومحلول حمض الأسيتيك عند 4 درجات مئوية لمدة تصل إلى 6 أشهر) ؛ 4. 0.025 م محلول كلوريد الكالسيوم. 5. حمام مائي عند 37 درجة مئوية.
مسار التحديد: يُخلط الدم المأخوذ من الوريد بمضاد التخثر بنسبة 9: 1 ويخزن في حمام جليدي حتى الطرد المركزي. الطرد المركزي لمدة 10 دقائق عند 1500 دورة في الدقيقة. صب 0.5 مل من البلازما و 8 مل من الماء المقطر في أنبوب اختبار ، واخلطهم وأضف 0.15 مل من محلول حمض الخليك 1٪ (يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني للخليط 5.3). يُترك الأنبوب لمدة 30 دقيقة عند +4 درجة مئوية. ثم يتم طرد الخليط بسرعة 1500 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق ، ويتم تصريف السائل الطاف وإزالة السائل المتبقي عن طريق قلب أنبوب الاختبار على ورق الترشيح. يذوب راسب اليوجلوبولين في 0.5 مل من محلول بورات. يتم نقل عينتين من المحلول ، 0.2 مل لكل منهما ، إلى أنابيب اختبار بقطر 10 مم ويتم إنزالها في حمام عند 37 درجة مئوية. بعد دقيقة واحدة ، يضاف 0.2 مل من محلول كلوريد الكالسيوم إلى كل عينة. بعد بضع دقائق ، تتشكل جلطة. يتم تحديد وقت انتهاء التحلل من خلال الاختفاء التام (انحلال) الجلطة.
القيم الطبيعية: 183-263 دقيقة.
تقييم النتائج والتعليقات على الطريقة: إذا تم تقليل احتمالية انحلال الفبرين للبلازما (بسبب انتهاك تنشيط البلازمينوجين بسبب نقص منشطاته ، تباطؤ في تنشيط kallikrein-kinin ، تثبيط عامل ChPa ، a انخفاض في كمية البلازمينوجين) ، يستمر تحلل الأوجلوبولين لأكثر من 300 دقيقة. لوحظت هذه الظاهرة في المرضى الذين يعانون من تجلط الدم ، مع حالات ما قبل الجلطة ، والمراحل الثالثة والرابعة من مدينة دبي للإنترنت ، في أولئك الذين يعانون من التهاب الأوعية الدموية النزفية ، وتعفن الدم ، وتسمم الحمل. يعتبر التحلل المتأخر علامة على ما قبل تجلط الدم ، مما يعكس حالة فرط التخثر أو يساهم في تطورها.
مع زيادة إمكانات البلازمين ، يتم تسريع تحلل الأوجلوبولين (يستمر أقل من 150 دقيقة) ، عندما يتم تنشيط البلازمينوجين بسبب زيادة في كل من الخارجية (العقدية ، المكورات العنقودية ، اليوروكيناز ، التربسينيميا ، إلخ) والداخلية (منشطات الأنسجة ، عامل CP ، kinin ، kallikrein) المنشطات. درجة تنشيط البلازمين ، كقاعدة عامة ، تعكس إما شدة التخثر داخل الأوعية الدموية ورد الفعل الوقائي للجسم لخطر تكوين الجلطة (انحلال الفبرين الثانوي) ، أو التضمين المستقل لنظام البلازمين بواسطة منشطاته في العملية المرضية (انحلال الفبرين الأولي). يلعب انحلال الفيبرين الأولي دورًا في تطور بعض الحالات النزفية لدى مرضى التوليد والجراحة والمسالك البولية. لذلك ، يتم تصحيحه باستخدام الأدوية المضادة لتحلل الفبرين (EACC ، trasilol ، contrical ، Gordox ، إلخ). وفي الوقت نفسه ، في المرضى الذين يعانون من انحلال الفبرين الثانوي ، هذه الأدوية ، كقاعدة عامة ، هي بطلان ؛ في نفوسهم ، يتم تطبيع انحلال الفيبرين بعد إعطاء الهيبارين.
يعكس تحلل euglobulin الطبيعي المتأخر أو المتسارع الإمكانات النشطة لنظام البلازمين. ومع ذلك ، فإن استنتاج حالة نظام البلازمين ككل ودوره في تطور النزيف وتكوين الجلطة أمر مستحيل إذا لم يتم الحصول على بيانات من دراسة تحلل الفيبرين التلقائي ونشاط مثبطات البلازمين ، مقارنة بالبيانات السريرية للمريض.
يجب تحديد تحلل جزء euglobulin من البلازما في غضون 1-2 ساعة بعد أخذ عينات الدم.
من الضروري إزالة المادة الطافية بعناية شديدة من جدران أنبوب الاختبار: مباشرة بعد تصريف المادة الطافية ، قم بتجفيف جدران الأنبوب بورق مرشح مطوي في أنبوب ، دون لمس راسب الأوجلوبولين ، ومرة أخرى "قم بإزالة" بقايا المادة الطافية بورق ترشيح آخر مبلل بالماء المقطر. يحتوي الطاف على العديد من مثبطات نظام البلازمين ؛ لذلك فإن قطراته الصغيرة على جدران الأنبوب تطيل بشكل حاد من تحلل الجلطة ، مما يؤدي إلى تشويه بيانات الدراسة.
بعد تكوين الجلطة ، يجب عدم اهتزاز الأنبوب ، لأنه في بعض الأحيان ، بعد اهتزاز طفيف ، تتراجع الجلطة ويتمدد تحللها بشكل حاد.
تحلل الأوجلوبولين أسرع بنسبة 35-45 دقيقة في ترموستات الهواء الجاف منه في الحمام المائي. لذلك ، يجب إجراء دراسات التحكم في المرضى الأصحاء وفي نفس الظروف.
يمكن تسريع تحلل Euglobulin بشكل كبير عن طريق إضافة منشطات انحلال الفبرين (الستربتوكيناز ، urokinase ، إلخ) إلى النظام أو عن طريق المعالجة المسبقة للبلازما بالكاولين.
يمكن نقل جزء euglobulin المخفف إلى ألواح الفيبرين لتقييم شدة التحلل من خلال منطقة الفيبرين المتحلل.