Где и как сдавать анализ на Хеликобактер пилори? Правильная сдача анализа кала Обследование желудка на хеликобактер.

Нарушение работы желудочно-кишечного тракта — одна из наиболее распространенных проблем со здоровьем современного человека. Тошнота, тупая или острая боль в животе, чувство тяжести в желудке после приема пищи, отрыжка свидетельствуют о появлении в организме опасного и коварного врага — бактерии Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori). Игнорирование симптомов и откладывание посещения врача могут привести к другим, более грозным заболеваниям — гастриту, язве желудка и двенадцатиперстной кишки, раку и некоторым видам лимфом. Поэтому при первых же проблемах с пищеварительной системой следует сдать анализы крови и , выявить вредителя и обезвредить, проведя соответствующее лечение.

В отличие от многих других бактерий хеликобактер прекрасно чувствует себя в кислой среде, что делает желудок его любимым местом пребывания и размножения. Подвижные жгутики и спиралевидная форма позволяют микроорганизмам передвигаться в густой среде (слизистой внутренних органов). При неблагоприятных условиях хеликобактер принимает круглую форму, напоминающую споры, и может затаиться на долгое время в организме.

Впервые обнаруженная более века назад только в 1994 году вредоносная бактерия была официально признана одной из главных причин рецидивирующих гастритов и язв желудка. Ученые Робин Уорелл и Барри Маршал не один год посвятили изучению хеликобактер пилори и способам ее обезвреживания, за что были удостоены Нобелевской премии по медицине в 2005 году.

Показания к проведению обследования

Несмотря на то что хеликобактер пилори — одна из самых распространенных инфекций человека (по некоторым данным носителями бактерии являются более 70 % земного населения старше 40 лет), ее наличие в организме не всегда приводит к патологическим нарушениям. У большинства инфицированных не наблюдается никаких симптомов. Причины же, указывающие на необходимость консультации гастроэнтеролога, следующие:

  • неприятие белковой (мясной) пищи;
  • ощущение тяжести в желудке;
  • рвота;
  • тошнота, изжога, частая отрыжка;
  • боли в области желудка (особенно стихающие после приема пищи) и других отделах живота;
  • метеоризм;
  • нарушение аппетита;
  • дисфагия (затрудненное глотание);
  • потеря веса;
  • запоры, поносы;
  • появление в рвотных или каловых массах крови.

Необходимо сдать бак анализ также в случае:

  • наличия в анамнезе таких заболеваний, как язва желудка и двенадцатиперстной кишки, диспепсия и атрофический гастрит;
  • обнаружения рака желудка у кровного родственника;
  • первичного выявления хеликобактер пилори у одного из совместно проживающих членов семьи.

Чаще всего заражение происходит внутри семьи и тесно общающихся групп (школах, детских садах) бытовым путем через слизь и слюну. Скученность, нарушение правил гигиены, использование общей посуды увеличивают риск заражения. В случае же бессимптомного носительства толчком к развитию заболеваний могут стать такие негативные факторы, как курение, неправильное питание, злоупотребление алкоголем, стрессы.

Методы диагностики

На сегодняшний день медицина предлагает несколько методов исследования организма на наличие бактерий хеликобактер пилори без традиционного бак посева. Наиболее эффективно зарекомендовали себя следующие виды диагностики:

Анализ крови на наличие антител к инфекции

В организме человека антиген хеликобактер вызывает ответную реакцию иммунной системы в виде выработки антител (иммуноглобулинов). Анализ крови предусматривает определение титра этих антител.

Исследование кала на антиген хеликобактер

Одним из самых удобных и безболезненных методов диагностики является анализ кала на антиген с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Подходит детям, людям пожилого возраста и тяжелобольным. Данный бак анализ характеризуется высокой точностью (до 95%) даже при условии изменения активных форм бактерий и снижения их концентрации в кале.

Уреазный дыхательный тест или хелик тест

Данная диагностика основана на способности микроорганизмов вырабатывать особый фермент — уреазу, защищающую бактерии от агрессивного воздействия кислой среды желудка. Уреаза расщепляет мочевину в желудочно-кишечном тракте, в результате чего образуются аммиак и углекислый газ, выделяемый при дыхании. Наличие этих веществ и определяется с помощью хелик теста. Данный вид исследования является максимально безопасным, поэтому рекомендован маленьким детям и беременным женщинам.

Экспресс-тест на уреазную активность хеликобактер при гастроскопии (ФГДС)

С помощью специального зонда при гастроскопии (зрительном исследовании) проводится забор микроскопических частей слизистой желудка, которые впоследствии помещаются в специальную тестовую среду. Если слизистая заселена хеликобактер пилори, то выделяемая ими уреаза будет расщеплять мочевину, входящую в состав тестовой среды.

Биопсия и цитологическое исследование

Метод клеточного исследования с максимальной точностью позволяет определить наличие в организме инфекции, практически исключая ложноположительный результат. Биопсию слизистой берут из наиболее подозрительных участков, не тревожа эрозии и язвы.

Для достоверного подтверждения наличия или отсутствия хеликобактериоза врач назначает как минимум два вида анализов, из которых наиболее эффективен бактериологический анализ кала, позволяющий обнаружить ДНК микроорганизмов в образце (метод ПЦР).

Правила сбора материала

Помимо информированности об исследованиях важно знать, как сдавать бак анализ правильно, чтобы получить максимально точный диагноз. Существуют особые правила сбора материала для каждого вида диагностики:

  1. Для проведения анализа на антитела берут кровь из вены. Сдавать кровь лучше всего в утренние часы натощак. Накануне следует ограничить употребление жирной и острой пищи.
  2. Забор кала для исследования можно проводить как минимум через месяц после приема каких-либо антибиотиков. За трое суток до анализа следует исключить из рациона красящие продукты, грубую клетчатку, медикаментозные препараты, усиливающие перистальтику кишечника. Собранный кал помещается в стерильную емкость и как можно быстрее доставляется на исследование. На результат также могут повлиять присутствие в биологическом образце желчи, крови, неорганических солей, поэтому в случае некоторых заболеваний кишечника лучше выбрать другую диагностику хеликобактериоза.
  3. Дыхательный тест имеет несколько вариантов проведения, но все они включают в себя процесс дыхания через трубку. Берутся несколько проб воздуха — первая на голодный желудок, а последующие после употребления специального тестового раствора. Накануне сдачи теста следует ограничить употребление жидкости и пищи, за сутки исключить продукты, повышающие газообразование в ЖКТ, за трое суток ввести запрет на алкоголь. Необходимо исключить факторы, повышающие слюноотделение (курение, жевание жевательной резинки). Если пациент принимает какие-либо медикаменты, следует уведомить об этом врача и лаборанта.
  4. Перед проведением гастроскопии необходимо пройти клиническое обследование: сдать общие анализы крови и мочи, определить группу крови и резус-фактор, свертываемость крови, провести диагностику на антиген гепатита С и В. Пожилым пациентам рекомендовано проведение ЭКГ и измерение артериального давления. Забор биопсии проводится натощак. Может применяться местная анестезия.

Более подробно о том, как подготовиться и правильно сдавать анализ кала, читайте в .

После проведения исследований необходимо показать результаты врачу-гастроэнтерологу, который верно их расшифрует, поставит правильный диагноз, успокоит пациента, а в случае обнаружения хеликобактер пилори назначит грамотное лечение. Враг коварен, но не так страшен, как кажется, если его вовремя обнаружить и обезвредить. Будьте здоровы!

Анализ на Хеликобактер (Helicobacter pylori) назначается при наличии симптомов хронического гастрита и язвы желудка , поскольку именно эта бактерия является возбудителем данных заболеваний. Что это такое, в каких случаях следует проводить исследование, как расшифровывать результаты и как лечить инфекцию?

Название микроорганизма происходит от «пилори», указывающего на место его обитания (пилорический отдел желудка), и характеристики формы – «хелико», что значит «спиралевидная».

Анализы на Хеликобактер

Существует несколько способов диагностики HP-инфекции (сокращение НР от Helicobacter pylori), они имеют разную достоверность и отличаются по времени и стоимости проведения. Какой из методов быстрее и дешевле, а какой точнее покажет результат?

Методы лабораторной диагностики инфекции хеликобактер пилори делятся на инвазивные и неинвазивные. Инвазивные предполагают проведение эндоскопии с взятием биоматериала (биопсия) и последующим цитологическим исследованием.

Самыми информативными из неинвазивных тестов считаются иммунологические исследования, с помощью которых определяют наличие антител к хеликобактер пилори в крови, антигена Н. pylori в кале, анализы методом ПЦР, позволяющие выявить генетический материал бактерии, и дыхательные тесты.

ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить фрагменты ДНК возбудителя хеликобактериоза. В качестве исследуемого биоматериала используют каловые массы. В ходе анализа из биоматериала выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно дублируется на специальном устройстве – амплификаторе. Когда количество ДНК оказывается достаточным для дальнейшей детекции, выясняют, обнаружен ли в пробе геномный фрагмент, характерный для Helicobacter pylori. Положительный результат означает наличие хеликобактерной инфекции. Анализ на ПЦР позволяет подтвердить присутствие чужеродного микроорганизма в организме с точностью до 90-95%. В норме генетический материал Helicobacter pylori в исследуемом материале не обнаруживается.

ИФА

Иммунологические методы не определяют возбудителя напрямую, а выявляют антитела к характерным для него антигенам.

Инфекцию, вызванную Helicobacter pylori, связывают с хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, злокачественными опухолями желудка (аденокарциномой, В-клеточной лимфомой).

Основным методом анализа крови на антитела является иммуноферментный анализ (ИФА) – количественное определение уровня антител классов IgA, IgM и IgG к Helicobacter pylori. ИФА также позволяет оценить эффективность терапии инфекции. Так, выработка антитела IgM к Helicobacter pylori – маркер острой стадии процесса. Через несколько недель после первичного инфицирования IgM исчезают. При прогрессировании заболевания и переходе его в хроническую форму обнаруживаются антитела класса IgA, затем IgG. Высокий уровень их концентрации сохраняются в крови в течение длительного времени. Чувствительность метода составляет 87-98%.

Иммуноблотинг

Иммуноблотинг существенно уступает другим иммунологическим методам как по стоимости, так и по трудоемкости выполнения анализа, однако только с его помощью можно, имея лишь сыворотку крови больного, получить данные о свойствах штамма Helicobacter pylori (на основании того, продуцирует ли он специфические антигены CagA и VacA).

Дыхательные тесты

Дыхательный тест – определение в выдыхаемом пациентом воздухе продуктов гидролиза мочевины уреазой Н.pylori. Исследование основано на способности бактерии продуцировать гидролитический фермент уреазу. В пищеварительном тракте уреаза разлагает мочевину до углекислого газа и аммиака. Углекислый газ транспортируется в легкие и выделяется с воздухом в процессе дыхания, его количество фиксируется специальным прибором для уреазного анализа. Дыхательные тесты на хеликобактер подразделяют на углеродные и аммиачные.

Микробиологические методы

Микробиологические и бактериологические методы используются реже, так как для их проведения нужно больше времени. Они предполагают бактериологический посев кала, выделение культуры возбудителя и определение его чувствительности к антибиотикам. В ходе исследования кал помещают в ростовую среду, благоприятную для выращивания колоний хеликобактера. Спустя определенный срок культуру изучают под микроскопом, отмечая количество колоний и их свойства.

Основные признаки, которые могут указывать на инфицирование Хеликобактер пилори, являются типичными симптомами заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Решение о выборе метода принимает лечащий врач. При выявлении у пациента НР-инфекции может быть целесообразным обследование членов семьи больного.

Подготовка к анализу

Для сдачи анализа на Хеликобактер не требуется специальной подготовки, но важно соблюсти общие правила, так как только правильно собранный материал гарантирует достоверность результата. Как правило, все анализы сдаются натощак, то есть после как минимум восьми часов воздержания от пищи. Перед исследованием следует исключить прием алкоголя, курение, употребление жирной и жареной пищи. При самостоятельном сборе материала, например, для анализа кала , важно избегать его загрязнения, так как любые посторонние включения (например, моющие средства, которыми чистился унитаз или подкладное судно) могут исказить результат.

Важное правило при сдаче анализов: в течение месяца перед забором материала пациент не должен принимать антибиотики и препараты, стимулирующие перистальтику желудка.

Как происходит расшифровка результатов

Если проводился качественный анализ (определение наличия бактерий Хеликобактер в организме), то в бланке результатов может быть только два варианта – «отрицательный» или «положительный». Если же метод анализа предполагал количественную оценку, нормы результатов зависят от методики, лаборатории, единиц измерения и других факторов, поэтому интерпретировать результаты анализа может только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает лечение.

Хеликобактер пилори и ее особенности

До 70-х годов прошлого века считалось, что любые бактерии, попадающие в желудок, гибнут под воздействием соляной кислоты, лизоцима и иммуноглобулина. В 1989 г. исследователи сумели выделить в чистом виде и культивировать спиралевидный микроорганизм со слизистой оболочки желудка больного, страдающего гастритом – бактерию Helicobacter pylori.

Самыми информативными из неинвазивных тестов считаются иммунологические исследования, с помощью которых определяют наличие антител к хеликобактер пилори в крови, антигена Н. pylori в кале, анализы методом ПЦР, позволяющие выявить генетический материал бактерии, и дыхательные тесты.

Название микроорганизма происходит от «пилори», указывающего на место его обитания (пилорический отдел желудка), и характеристики формы – «хелико», что значит «спиралевидная».

Заражение бактерией обычно происходит при контакте с грязными поверхностями, через слюну, воздушно-капельным способом, в результате контакта с инфицированным больным, несоблюдения правил личной гигиены, употребления в пищу недостаточно чистых овощей и фруктов, воды из загрязненных источников.

Появление клинических симптомов зависит от состояния иммунитета. Среди инфицированных людей встречается и бессимптомное носительство, так как микроб способен к длительному паразитированию без выраженных клинических проявлений и конфликтов с иммунной системой хозяина. В этом случае бактерия принимает неактивную форму, увеличивая активность при появлении благоприятных для нее условий. Однако даже в неактивном состоянии патогенный микроорганизм способен вызывать повреждение стенок желудка и двенадцатиперстной кишки. Развивающиеся воспалительные изменения способны привести к атрофии слизистой оболочки и развитию

Об инфекционной природе язвенной болезни гастроэнтерологи задумывались с конца XX века. В современной медицине анализ на пилори (Helicobacter pylori) назначается практически всем пациентам с язвенной болезнью желудка и/или двенадцатиперстной кишки. Впервые о спиральных бактериях, обитающих в желудке, заговорили в конце XIX века. То, что они могут причинять вред здоровью человека, доказали только на исходе XX столетия.

Сегодня считается, что наличие хеликобактериоза (инфицированность этими микробами) может приводить к ряду заболеваний:

  • Хронический .
  • Железодефицитная .
  • Множественный полипоз желудка.
  • Язвенная болезнь.
  • Рак желудка.

Состояния достаточно серьезные, чтоб на них обратили внимание доктора и ученые.

В современной медицине анализ на пилори (Helicobacter pylori) назначается практически всем пациентам с язвенной болезнью желудка и/или двенадцатиперстной кишки

Факт! Раз эти болезни вызываются микроорганизмом, то их можно предупредить, избавившись от микроба при помощи антибиотиков.

Для этого даже придумали свое название – эрадикация. Так называют курс приема противомикробных средств, который должен уничтожить вредные микроорганизмы. Но перед этим бактерии хеликобактер нужно достоверно выявить.

На первую декаду XXI века инфицированными считаются от 50 до 80% населения планеты (в зависимости от региона проживания и возраста). Учитывая это, медики искали наиболее простой и эффективный способ выявить хеликобактер.

Краткая классификация методов исследования

Учеными было предложено много методик, на вооружение взято несколько. Все они делятся на две больших категории:

  1. Прямые, направленные на выявление непосредственно микробных тел. Цель – увидеть бактерию в микроскоп и подтвердить факт инфицирования.
  2. Непрямые, которые позволяют судить об инфицировании на основании косвенных признаков. Обычно направлены на выявление продуктов жизнедеятельности микроорганизма.

Есть у врачей и другой классификационный подход, основанный на методике получения материала для исследования. Согласно ему, выделяют тоже две большие категории:

  1. Инвазивные – требуют фиброэзофагогастродуоденоскопии (ФЭГДС) и забора биопсионного материала.
  2. Неинвазивные – для них существенное вмешательство в организм не нужно, а требуется сдача слюны или кала.

Постараемся объединить эти методики, упростить и представить в табличном виде.

Название метода Прямой

/косвенный

Инвазивный

/неинвазивный

Материал для исследования
Бактериологический Прямой Инвазивный Кусочек ткани (биоптат) с внутренней поверхности желудка
Морфологический, включая:

– гистологический;

– цитологический;

Прямой Инвазивный Биоптат
Быстрый уреазный тест Косвенный Инвазивный Биоптат
Молекулярно-биологический (полимеразно-цепная реакция или ПЦР ), Прямой Оба варианта Биоптат, кал, слюна, зубной налет
Фазово-контрастная микроскопия Прямой Инвазивный Биоптат
Иммуногистохимический Прямой Инвазивный Биоптат
Серологический (иммуноферментный анализ, ИФА) Косвенный Оба варианта Кровь, желудочный сок, кал, слюна
Дыхательный тест:

– аммиачный;

– уреазный;

Косвенный Неинвазивный Выдыхаемый воздух

Важно! Чтобы получить материал для биопсии хирургических манипуляций не требуется – крохотный фрагмент ткани желудка берется при ФЭГДС.

Рассмотрим подробнее каждый из методов, попытаемся понять, почему врачам нужно столько разных способов. Ведь, на первый взгляд, чтоб получить полный и достоверный результат анализов на хеликобактер, можно ограничиться прямыми тестами. Но все не так просто.


Бактериологический

Второе название – культуральный. В основе лежит выделение возбудителя. Материал сеют на специальные питательные среды, где микроб может хорошо размножаться.

Если искомая бактерия в посеянном материале есть, то с вероятностью 90% она прорастет. Если она прорастет, то лаборатория даст 100% гарантию, что результат исследования на хеликобактер положительный.

Дополнительные преимущества:

  1. Выявление и определение устойчивости к отдельным антибиотикам.
  2. Контроль за развитием этой резистентности (приобретается ли стойкость к новым препаратам).
  3. Типирование микробов до штаммов (позволяет отличить случай нового инфицирования от рецидива неадекватно проведенной эрадикации).
  4. Предоставляет значительную информацию для научных изысканий.

Однако этот метод не лишен и недостатков. Наиболее существенные:

  1. Результаты анализов нужно ждать не меньше недели.
  2. Материал для исследования нуждается в особых условиях транспортировки и хранения. Если их не соблюсти, могут быть получены ложные данные.
  3. Есть 10% на то, что в бактерии в желудке живут, но в биоптате их или слишком мало для роста или они туда не попали.
  4. Не обнаруживаются «спящие» формы, которые не размножаются в текущее время и роста не дадут. Но в организме, деление может начаться в любой момент.
  5. Высокая стоимость оборудования и его обслуживания.

В чистом виде, недостатки теста преобладают над преимуществами, поэтому широкого распространения этот метод не получил. Медики его используют только для выявления лекарственной стойкости микроорганизмов.

Важно! Перед лечением этот анализ проводят, чтобы подобрать такой комплекс антибиотиков, какой будет наиболее эффективен по результатам чувствительности.

Гистологический метод

Несмотря на вышеизложенное, именно вариант культурального метода является основным для клинической практики.

Факт! Он обладает высокой чувствительностью (вероятность того, что если возбудитель есть, то его найдут) в 80-90% и специфичностью (вероятность точного заключения о том, что возбудитель – именно хеликобактер пилори) в 97%.

В отличие от биологического, образцы не сеются на питательные среды, а фиксируются парафином и рассматриваются под микроскопом.

При обнаружении возбудителя, может указать на ориентировочную массивность обсеменения желудка (по количеству микробных тел, попавших в образец).

Расшифровка выглядит так:

  • Слабая (+) обсемененность – до 20 бактерий в поле зрения.
  • Средняя (++) – от 20 до 50.
  • Высокая (+++) – больше 50 микробных тел в одном поле зрения.

К позитивным качествам относят несложные требования к хранению и транспортировке биологического материала.

Без недостатков тоже не обошлось:

  1. На фиксацию и приготовление срезов нужно немало времени (несколько дней).
  2. Стойкость к антибиотикам не определяется.
  3. Провести внутривидовое типирование тоже нельзя.
  4. Могут быть ложно-негативные результаты, связанные с ошибками при заборе материала.

Быстрый уреазный тест

Принцип действия основан на механизме жизнедеятельности хеликобактера, а именно – расщеплении мочевины. Конечным продуктом является аммиак, слабая щелочь.

Биологический материал помещают в специальный контейнер с рабочим раствором мочевины, заданным pH и индикатором. Попав туда, бактерия начинает расщеплять мочевину, щелочность за счет аммиака повышается. Тогда индикатор меняет цвет и можно утверждать, что микроб есть.

О степени обсеменения судят по тому, как быстро меняется цвет раствора. Индикатор может сработать в течении часа (высокая степень ифицированности) или не сработать вовсе (норма, бактерий нет).

Обратите внимание! Среди клиницистов есть мнение, что золотым диагностическим стандартом является сочетание быстрого уреазного и гистологического методов.

ИФА

Иммуноферментный анализ крови на хеликобактер пилори отлично подходит в качестве скринингового метода, для массового использования.

Принцип заключается в обнаружении специфических антител к микроорганизму. Ведь это – чужеродный агент, а значит иммунная система его без внимания не оставит.

Уже через 20-30 дней после инфицирования, можно выявить по крови хеликобактер у человека. Основа – антитела (иммуноглобулины) к бактерии. Причем в разных местах, они будут разных видов:

  1. В крови встречаются иммуноглобулины IgG, IgA, IgM.
  2. В слюне и желудочном соке – классы sIgA, sIgM.

Методика хорошо изучена и отработана (тот же принцип лежит в основе диагностики ). На рынке много предложений, а значит и цену можно выбрать демократичную. Материал – несколько капель крови. Время – до 3 часов.

Недостаток серологического анализа на антитела к хеликобактер пилори заключается в невозможности отслеживать динамику лечения. Иммуноглобулины продолжают циркулировать в крови несколько месяцев даже после полной элиминации возбудителя.

Важно! ИФА, который применяется массово, дешев, но не позволяет объективно оценить эффективность используемой схемы эрадикации.

Неинвазивный вариант

В 1998 году появилась уникальная модификация серологического метода. Она позволяет выявлять специфические антигены хеликобактера в фекалиях пациента.

То есть вместо анализов крови проводится анализ кала. Это очень прогрессивный способ, так как позволяет определять не только наличие, а и количество антигенного материала. То есть, если схема эрадикации оказалась эффективна, результаты эту покажут. И наоборот.

Но исследование очень дорогостоящее, потому и не очень популярное. В последнее время на рынке появились недорогие тест-системы для выявления анализа кала, но их качество оставляет желать лучшего.

Точность начинается от 53% достоверных результатов. Потому перед тем, как сдавать анализ, есть смысл узнать, где изготовлена тест-система. Доверять лучше производителям из Европы.

Полимеразная цепная реакция

Его специфичность достигает 100%. И он стал первым способом сделать анализ кала на хеликобактер. Преимущества очень существенны:

  1. Неинвазивный.
  2. Непревзойденная специфичность.
  3. Относительно прост в работе.
  4. Высокая скорость (30 образцов исследуются за 4-5 часов).
  5. Доступная стоимость.

Принцип – выявление генетического материала хеликобактер пилори в слюне, зубном налете и кале. Идеален для детей и людей, которым невозможно провести ФЭГДС. Таким пациентам, чтобы достоверно выявить хеликобактер, сдать анализ кала несложно.

Негативные стороны такие:

  1. У взрослых пища дольше движется по пищеварительному тракту, при этом ДНК бактерий разрушается, а значит снижается и чувствительность теста.
  2. Может давать ложноположительные результаты, даже если схема лечения эффективна. Может реагировать на генетический материал в кале , но это будет ДНК уже погибших микробов.

Если нужно, методом ПЦР исследуется и кровь. В наше время используется метод второго поколения – гибридизация ДНК. Он полностью автоматизирован: специалист получает на руки готовую оценку результата.

Специалисту остается лишь оценить машинную расшифровку анализа крови на хеликобактер, и сделать выводы о динамике процесса, эффективности лечения.

Дыхательные тесты

Их два, оба основаны на выявлении уреазной активности хеликобактера.

Уреазный

Карбамид (мочевина) очень активно расщепляется бактериальным ферментом – уреазой. На этом ее свойстве основан самый первый, внедренный в практику в 1987 году тест.

Человек принимает на завтрак мочевину, меченную радиоактивным углеродом. Если хеликобактер есть, он расщепляет карбамид до углекислого газа, который пациент выдыхает в специальный прибор.

По количеству выдыхаемого радиоактивного углерода, составляется мнение об инфицированности человека. Преимущества:

  1. Неинвазивный.
  2. Чувствительность 99%, специфичность – 98%.
  3. Можно использовать у детей и тяжелых больных с противопоказаниями к ФЭГДС.
  4. Позволяет обследовать большие группы населения.

Важно! Перед тем, как сделать дыхательный тест на хеликобактер, проводятся контрольные замеры выдыхаемого воздуха. Только в сравнении с ними можно говорить о повышенной уреазной активности, а, значит, и об инфицированности.

Ложноотрицательные результаты могут встречаться у людей, принимавших антибиотики по не связанным с гастроэнтерологией причинам, соли висмута. Таким пациентам нужно ждать, чтобы сдать анализ на хеликобактер как минимум месяц после последнего приема этих лекарств.

Ложноположительные – если в полости рта есть другие бактерии с уреазной активностью.

Недостатки очевидны: дороговизна радиоактивных материалов и особые правила осторожности в работе с ними. Поэтому как скрининг метод не пошел.

Аммиачный тест

Разработан в Санкт-Петербурге. Исследуется уровень аммиака в выдыхаемом воздухе. Обладает всеми преимуществами классического уреазного теста, к тому же дешев, не опасен, проводится гораздо быстрее.

Но. Требует качественной оценки состояния здоровья пациента. Ведь уровень аммиака зависит от питания, работы почек и печени и так далее.

Наиболее перспективен как скрининговый массовый метод диагностики хеликобактериоза.

Сухой уреазный тест

В качестве рабочей поверхности используется полоска бумаги, обработанная мочевиной и специальным индикатором, меняющим цвет при смене pH. Методика такая: тест-билет смачивают слюной и выжидают три минуты. Норма – отсутствие синего пятна на желтом фоне.

Если окрас появился, то по ширине окрашенного пятна делают заключение об интенсивности расщепления мочевины (уреазной активности слюны).

В серию не идет из-за слишком высокой чувствительности полоски к изменениям кислотно-основного состояния. Например, у курящих – оно немного смещено от нормы, а значит и результат может быть ложным.

Отдельные тесты

Фазово-контрастная микроскопия состоит в том, что полученный на ФЭГДС образец располагается на предметном стекле, измельчается и рассматривается специальном режиме.

Преимущество – быстрый результат (1-2 минуты). Недостаток – высокая частота ложноотрицательных результатов. Опираться не его данные можно только при высоких степенях обсемененности.

Иммуногистохимический метод подразумевает использование антител к возбудителю. Образец фиксируется формалином и парафином, а затем обрабатывается специальным раствором с моноклональными антителами.

Если искомый микроб есть, наблюдают характерное окрашивание материала.

Метод достаточно хорош:

  1. Чувствителен при малой обсемененности.
  2. Имеет высокую специфичность.
  3. Выявляет кокковые (неактивные) формы.

Но растворы очень дороги и его широкое использование экономически нецелесообразно. Хотя, в индивидуальном порядке, его можно применять.

Цитологический тест – микроскопия мазков-отпечатков с поверхности желудка или двенадцатиперстной кишки. Проводится быстрее, чем гистология, дает такую же информацию, но процент ложноотрицательных результатов тоже высок.

Что выбрать?

Разнообразие методик по диагностике хеликобактер пилори действительно впечатляет. Вот только универсальной и абсолютно точной – еще не придумали.

Одни очень точные (инвазивные), но сложные. Материал для других легко получить (кровь, слюна, кал), но дорого исследовать и достоверность оставляет желать лучшего.

Поэтому часто используется сочетание двух или трех методик, отличающихся принципом работы. Пример: контроль эрадикации.


После курса проводится дыхательный тест – результаты отрицательны. Значит, все пришло в норму, лечение успешно.

Если же тест позитивный, нужно провести инвазивное исследование или ИФА или ПЦР, чтобы исключить ложноположительное срабатывание дыхательного теста. И только после подтверждения неудачи терапии другим методом, следует рассмотреть вопрос о повторной эрадикации.

А перед этим – провести биологическое исследование на предмет стойкости бактерий к некоторым антибиотикам.

После заражения микроб появляется во многих средах организма. Так что становится возможным анализ на хеликобактер пилори по биохимии крови, слюне, калу и так далее. Вопрос об этом решается по наличию соответствующих возможностей у местной лаборатории. Анализ крови на проводится с целью выявить наличие антител IgG и некоторых других комплексов, формируемых под действием антигенов (CagA и другие). Расшифровка анализа ведётся по таблицам. Так норма в крови этих веществ известна.

Золотым методом у медиков считается вовсе не анализ крови на хеликобактер пилори. Рекомендуется сделать биопсию с последующим посевом образца на питательные среды. Это как результативный анализ хеликобактер, так и путь для определения чувствительности культуры к лекарственным препаратам.

В сыворотке быстро формируются антитела к хеликобактер пилори. Картина характеризуется количественным изменением интелейкинов:

  1. Повышение числа IL-6, 8 и 10.
  2. Снижение количества IL-2.

Однако в исследованиях, проведённых на подростках, обнаружено несоответствие картин у детей и взрослых. С 14 до 17 лет у людей не зафиксировано количественного изменения цитокинов. Подростки сдали кровь на хеликобактер, и не выявилось никаких различий по содержанию интерлейкинов, факторов некроза и интерферонов.

Что такое цитокины

Цитокины пока ещё недостаточно изучены, так что диагностика в этом плане носит скорее предположительный характер. О чем и было сказано выше. Медики пока ещё выясняют соотношения между понятиями хеликобактер пилори, анализ крови, норма и цитокины.

Описываемые структуры представляют собой белковые комплексы, формируемые как ответ иммунной системы. По конфигурации цитокины близки к гормонам, а функции их пока что не изучены. Вот некоторые предположения на этот счёт:

  1. Контроль за производством клеток крови и их дифференцированием.
  2. Балансировка иммунной системы.
  3. Регулировка процессов воспаления.
  4. Поддержание нормального давления крови и её свёртывания.

Цитокины сегодня постоянно пополняются новыми представителями класса. Медики делят их на классы следующим образом:

  • Интерлейкины.
  • Интерфероны.
  • Хемокины.
  • Монокины.
  • Лимфокины.
  • Колониестимулирующие факторы.

Когда велось исследование новой тогда ещё инфекции хеликобактер пилори, медики обнаружили в цифрах повышенный фон IL-1 бета и IL-6 (на слизистой, а не в крови). Со временем стало ясно, что неадекватные реакции иммунной системы, которая отказывается бороться с инфекцией и постепенно переключается на аутоиммунные реакции, обусловлены формируемыми цитокинами. Указанные вещества проникали в цитоплазму клеток и межклеточное вещество.

Вот почему сегодня положительный анализ крови расшифровывается, как источник проблем в области сердечно-сосудистой системы, кожных заболеваний, анемии и других. При в первую очередь фиксируется снижение уровня факторов некроза опухоли альфа, IL-8 и IL-1 бета.

Не все штаммы провоцируют подобные изменения, а те, которые содержат антиген CagA. IL-8 – провокатор воспаления в организме.

Антитела

Когда медики столкнулись с проблемой замены биопсии ввиду сложности проведения процедуры, то выдумали сонм иных методик. Исследования на антитела в крови относятся к этому разряду. Анализ считается неинвазивным, хотя проводится при помощи шприца. Первоначально исследование на антитела напоминало то, что проводится для кампилобактера. Посредством перекрёстной реакции антигенов медики решали вопрос о присутствии их в сыворотке крови.

Что касается исследований на специфические факторы, например, CagA, то было вынесено решение о нецелесообразности такого подхода из-за плохой чувствительности.

Наличие IgG не указывает на присутствие инфекции. Удаётся обнаружить при анализе этот фрагмент в течение продолжительного времени. Из-за резкого снижения носителей инфекции в развитых странах удаётся определить наличие IgG у тех, кто давно уже получил негативный статус присутствия микроба.

Постепенно титры антител падают. Требуется парный анализ (до и после лечения), чтобы понять, каков диагноз. Потому единые цифры не удаётся выявить для отдельно взятого пациента. Снижение титров длится десятилетиями. Сегодня медики предлагают оценивать успех лечения по 50% снижению за 6 месяцев. Этот признак отличается повышенной чувствительностью (97%) и специфичностью (95%).

Сегодня тесты на иммуноглобулины IgA и IgM не одобряются в развитых странах. Поскольку показатели достоверности желают лучшего.

Прочие маркеры присутствия инфекции

Помимо морфологических признаков, регистрируемых инструментальными методиками (гастрит, язва и так далее), выделяют клинические признаки, как например, сильный голод. Это обусловлено биохимическим составом крови – повышенным уровнем гастрина. Слабоположительный прирост уровня пепсиногена рассматривается как фактор риска развития язвы. Однако этот фактор указывает не на формирование заболевания, а выявляет в крови маркер присутствия хеликобактера.

Сначала этот признак отнесли к генетически заложенному в организме человека. Поскольку то же характерно при аутоиммунном гастрите. Однако повторный анализ ситуации показал, что бактерия – причина. Так что медики уровень пепсиногена и гастрина в крови считают весомым доводом в пользу выставляемого диагноза. Так при росте соотношения пепсиногенов I и II на 25% пора уже присмотреться. Фурута сообщает о специфичности этой методики в 90% случаев и чувствительности – 95%.

Гипотеза проверялась путём оценки титров IgG после лечения инфекции. Через 2 недели после излечения медики зафиксировали снижение гастрина. Однако, чтобы сдать тест крови по этой методики, придётся выполнить его дважды с интервалом 6-12 месяцев.

Анализ результата

Результат оценивается, например, по той сумме, которую дают антитела к хеликобактер (иммуноглобулины А, М и G):

  1. 0,8 – суммарные показатели указывают на негативный ответ о наличии диагноза.
  2. 0,8 – 1,1 – требуется дополнительное исследование.
  3. Свыше 1,1 – значит, что в желудке локализована инфекция.

Исследования кала

Бактерия обнаруживается в испражнениях, так что анализ кала на хеликобактер – неотъемлемое исследования на бактерию. Однако стул анализируется на антиген. В США (штат Цинциннати) уже разработан комплект количественной оценки кала на наличие нужных молекул.

В основу заложен иммуноферментный анализ, чувствительность которого к антигену составляет 185 нг/мл. Подготовка сильно напоминает то, о чем было написано выше в отношении проб крови. На антитела из состава оборудования осаждаются антигены (посредством белковых механизмов идентификации). Однако это не даёт представления о том, как лечить инфекцию. То, что антиген в кале, показывает наличие бактерии в желудке.

Поликлональные антитела, связанные с пероксидазой, и пробу инкубируют в течение 1 часа. Затем материал наносится на лунки и выдерживается 10 минут. Связанный фермент изменяет цвет, регистрируемый спектрофотометрическими методами. Для фиксации результата (чтобы остановить процесс) добавляют стоп-раствор.

Результат по достоверности сравним с гистологическим исследованием биопсии. Медики даже не берутся сказать, какой самый точный. Однако ошибки (5%) все-таки встречаются. С биопсией это случается реже.

Медики обратили внимание на зависимость качества ингредиентов, поставляемых вместе с набором, а также значение профессионализма сотрудников лаборатории. Реактивы получают из подопытных кроликов, и стандартизация сильно осложнена из-за недостатка знаний о нужных технологиях.

Исследование кала по результативности сравнивается с тестом дыхательным. Этим путём проводится определение достоверности результатов, полученных по крови.

Методики оценки присутствия инфекции

Помимо того, как сдаётся анализ, как берут пробу, выделяют пути оценки нужных параметров. Выше приведены сведения о биохимических и иммуноферментных разновидностях. Но точный – ПЦР. Это клонирование участков ДНК при помощи специальных реакций, что позволяет обнаружить бактерию.

Этот метод считается сегодня перспективным. В особенности, когда речь идёт о дизентерии. ПЦР на определение микроба в кале затруднено, так как наличие специфических компонентов препятствует протеканию реакции. Это мешает правильно понять результаты. К тому же, некоторые участки ДНК схожи с теми, что выявлены у других бактерий (которых в испражнениях много). Поэтому тест в этом случае не считается оптимальным, а стоит дороже, нежели дыхательный.

Однако ПЦР позволяет быстрее обнаруживать мутации ДНК, обусловливающие резистентность класса к тем или иным медицинским препаратам. Так что достоверность отходит на второй план перед перспективами, открывающимися исследователям (в научном, а не клиническом смысле).

Общие инструкции по выбору

Из сказанного понятно, что одно обследование дополняет другое. Они не альтернатива друг другу. Проверяйтесь по той и другой методике, чтобы правильно диагностировать заболевание. Этим методы дополняют собой .

По большей части оба применяются уже после лечения для оценки успешности эрадикации. С целью определения титра, где повышен эффект присутствия антител. Если речь идёт о диагностике, то сдаётся в лаборатории кал. Поскольку так обнаруживается присутствие микроба в ЖКТ. Что касается крови, то наилучшие результаты получаются при двух разнесённых по времени пробах. Что далеко не во всех случаях уместно.

Чаще делается всё-таки дыхательный тест, который люди иной раз сдают в домашних условиях. А кровь при необходимости берётся медиками в клинике. Проверенным случаем считается тот, когда при ФГДС проводится взятие биопсии с последующим высеванием на питательную среду. Лучше пока что ничего не придумано.

А рассматриваемые виды – вспомогательные методики. Если речь идёт об экспресс-анализе, исследование кала помогает уточнить диагноз. Если о лечении – состояние крови характеризует результативность эрадикации. Желающим определить наличие микроба лучше начинать с дыхательного теста, как безобидного и простого в реализации.

На сегодняшний день медицина может предоставить большое количество возможных методик для исследования организма. При обнаружении вредоносной бактерии хеликобактер пилори норма существует для каждого отдельного вида анализов. Перед началом проведения диагностики пациенту необходимо подготовиться.

Обычно врачи настаивают на том, чтобы все группы населения регулярно проходили медицинское обследование, сдавали на анализ кровь, а также, если потребуется, мочу и тесты кала.

Более чем 80% населения нашей планеты заражены бактерией хеликобактер пилори. Однако за всю жизнь не всех эти микроорганизмы могут беспокоить. Чаще всего анализ на хеликобактер пилори нет смысла проводить, если для этого нет весомых причин.

Дело в том, что данный вид бактерий не всегда переходит в активную стадию развития. Если человека не беспокоят симптомы заболеваний желудочно-кишечного тракта, тогда проводить диагностику организма не обязательно.

Хеликобактер пилори распространяется очень быстро, так еще вчера результат анализа мог дать отрицательный результат, а на следующий день человек уже мог заразиться этими бактериями. Они могут передаваться множеством разных способов – от воздушно-капельного пути до употребления грязных продуктов.

По этой причине тест на хеликобактер пилори необходимо проводить тогда, когда начинают проявляться определенные признаки нарушения пищеварительной системы.

В первую очередь необходимо отметить, что для патологий, связанных с желудочно-кишечным трактом, характерна сильная боль в животе. Обычно она имеет режущий характер, и может нарастать как во время приема пищи, так и после. Чувство боли возникает при застое еды, кардинальном изменении уровня кислотности, от чего пища не может перевариваться равномерно или начинает разъедать стенки слизистой оболочки желудка.

Боль может застать больного поздней ночью. Она возникает при длительном чувстве голода или отсутствии пищи в пищеварительном органе более 4 часов. «Голодная боль» постепенно утихает после начала приема пищи. Такая разновидность боли характерна для образования поврежденного эпителия на стенках желудка.

Ощущение боли часто сопутствует ряд других смежных признаков поражения организма бактерией хеликобактер пилори. У больного появляется регулярная изжога. Это достаточно неприятный симптом, который весьма проблематично купировать. Изжога возникает при повышенном уровне кислотно-щелочного баланса в пищеварительной системе, происходит заброс по пищеводу желудочного сока и пищеварительных ферментов, которые и вызывают раздражение на слизистой оболочке. Если изжога появляется очень редко, в единичных случаях, то это не повод паниковать. Это может быть вызвано острой или копченой пищей, а также временным нарушением работы желудка.

Если во время изжоги проявляется кислая отрыжка и частая икота, то это повод провести диагностику или сдать кровь на анализ. У больного также часто возникает в желудке чувство тяжести, которое отступает после приема пищи, даже небольшой порции.

Существует еще и более опасные признаки: образование кровотечения в органах пищеварительной системы, нарушение стула (запор или понос) и частое возникновение рвотных позывов после еды.

При обнаружении данных симптомов необходимо обратиться к врачу и провести тест на хеликобактер пилори в обязательном порядке.

Видео “Анализ крови”

Виды анализов

Методика исследования организма человека бывает разной, по этой причине используется несколько различных видов анализа пациента на хеликобактериоз. Существуют экспресс-методы, а есть и более длительные и точные подходы. Любое считывание полученных результатов проводится специалистом, после требуемой подготовки.

Уреазный

Данный вид диагностики нельзя проводить в домашних условиях, несмотря на то, что прибор легко транспортируется.

Перед проведением диагностики нужна подготовка организма. Сдавать Уреазный дыхательный тест необходимо натощак, зачастую в утреннее время. Последний прием пищи не должен быть раньше, чем 6 часов до начала проведения теста. За 20 дней до уреазной пробы пациенту необходимо прекратить употреблять антибиотики, анальгетики, антацидные препараты. За несколько дней также нельзя употреблять алкоголь. В день проведения теста нельзя курить, а с утра нужно хорошо почистить зубы.

Данный вид диагностики заключается в принятии больным специального раствора, а затем при помощи измерительного прибора зафиксировать двуокись углерода выдыхаемого пациентом. Он образовывается при расщеплении бактериями мочевины, которую нужно употребить внутрь организма перед тестом.
Другой способ проведения экспресс теста фиксирует уровень аммиака. Суть данного анализа заключается в биохимическом методе. Необходимо сравнить химическую реакцию двух результатов.

Во время проведения диагностики пациент дышит в течение нескольких минут в трубку, которая подключена к прибору. Затем он должен выпить раствор карбамида и через некоторое время снова подышать в трубку, но с другого конца. Этот экспресс-анализ безболезненный и проводится за короткий промежуток времени (до 20 минут).
Результаты и расшифровка находится у гастроэнтеролога.

  • до 1% – норма;
  • от 1 до 3,5%; – легкая степень;
  • от 3,5 до 6,4% – средняя степень;
  • от 6,5 до 9,4% – тяжелая;
  • более 9,5% Н.Р – крайне тяжелая степень. (Н.Р. – содержание Helicobacter Pylori).

Вероятность получения точного результата при проведении уреазного дыхательного теста около 95%.

Биопсия с цитологией

Проведения биопсии с цитологией при фиброгастродуоденоскопии является самым точным видом диагностики. Остальные методы исследования могут быть назначены в комплексе.

Метод биопсии с цитологией заключается в сборе тканей из пищеварительной системы для последующего клеточного исследования материала и обнаружения антител. Данный вид диагностики практически исключает вероятность ложноположительного результата.

Существует 3 вида биопсии: игловая, инцизионная, эксцизионная. Они определяют время и способ сбора тканей.

Биопсия проводится с применением эндоскопии, на голодный желудок. Эндоскопия подразумевает использование оптического и осветительного устройства для предоставления визуальной информации при сборе тканей из ЖКТ. Таким образом, можно провести обследование пищеварительных органов визуально, собрав биологический материал для гистологического исследования. Если в них обнаруживаются антитела или уреазы, тогда результат положительный.

Гистологический

Гистологическое исследование подразумевает под собой проведение морфологического анализа полученных тканей из организма пациента. Гистологический вид анализа включается в себя биопсию.

Проведение гистологии необходимо при диагностике злокачественной опухоли. Полученный материал исследуется в лабораторных условиях. Отсутствие в клетках специфических антител к бактерии хеликобактер пилори является нормальным показателем. Гастроэнтеролог получает и расшифровку результатов, сверяет из с данными анамнеза и определяет диагноз.

ИФА

Иммуноферментный анализ – ИФА. Данный вид диагностики заключается в проведении детального исследования плазмы крови. Анализ крови на хеликобактер пилори также помогает обнаружить в ее составе концентрацию антител к данной бактерии. Уровень концентрации определяется титрами.

Когда в организм попадает вредоносный возбудитель хеликобактериоза, то начинается работа сложных механизмов иммунной системы человека, при которых вырабатываются антитела для борьбы с чужеродными белками.

Также следует отметить, что для четкой выраженной реакции иммунной системы на возбудителя заболеваний должен пройти определенный промежуток времени. По этой причине антитела в крови появляются не сразу, и некоторые результаты анализа могут быть неточными или ложными. Учитывается также тот факт, что специфические антитела могут сохраняться в организме продолжительное время после полного устранения инфекции из организма. А это может привести к ложноположительным результатам диагностики в период после лечения.

Недостатки исследования преодолеваются при помощи анализа фракционных иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA. Они представляют собой разновидность антител, которые вырабатываются иммунной системой человека.

Отсутствие IgG антител является нормой, если нет признаков инфекции или в раннем периоде после заражения (до 20 дней). Другие виды также свидетельствуют об отрицательном результате, если они не обнаружены в крови. Их обнаружение характеризует активность стадии заболевания.

Результаты наличия сывороток титров антител считываются по схеме.

  • 1:5 – норма;
  • 1:10 – слабо положительный;
  • 1:20 – положительный;
  • 1:40 – сильно положительный.

Собранный материал для анализа должен храниться при температуре 20 градусов.
Если показатели титров ниже 20, тогда это не опасно для здоровья. Можно придерживаться определенных правил питания, врач может назначить препараты. Показания положительные, уровень 20 – требуют большего внимания, а также обследования пищевода на наличия патологий. Значительное превышение уровня титров 20 может свидетельствовать об остром протекании хеликобактериоза, а также сопутствующих симптомов.

Если в течение месяца после проведения терапии уровень титров сократился более чем на 20%, то это означает, что наступила эрадикация бактерии.

ПЦР

Полимеразная цепная реакция – ПЦР. Данный вид диагностики организма заключается в обнаружении образцов ДНК хеликобактер пилори в режиме реального времени. Данный метод анализа считается одним из самых надежных, он проводится на основе крови и кала пациента. Также исследования могут проводиться на слюне или других выделениях.

Результат может быть положительным или отрицательным. На исследование не оказывает влияние то, на какой стадии развития находится бактерия. Принцип исследования заключается в синтезе копий ДНК бактерии, увеличивая количество копий для облегчения анализа.